| 小鼠核结合因子a1基因启动子报告载体的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 郑纺,崔壮,王宝利,王洪武.小鼠核结合因子a1基因启动子报告载体的构建及鉴定[J].天津医药,2011,39(12):1133-1135. |
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| 作者姓名： | 郑纺 崔壮 王宝利 王洪武 |
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| 作者单位： | 1. 300193,天津中医药大学中医学院
2. 300193,天津医科大学 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目，教育邵高等学校博士学科点专项科研基金项目，天津市高等学校科技发展基金计划项目，天津市应用基础及前沿技术研究计划项目 |
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| 摘 要： | 目的:构建小鼠核结合因子a1(Cbfa1)基因启动子萤光素酶报告载体,并检测其驱动报告基因的转录活性。方法:以小鼠基因组DNA为模板,巢式PCR扩增含有Cbfa1基因启动子(-1000～+200bp)的序列。限制性内切酶MluI和XhoI酶切这段序列后定向克隆到不含启动子的PGL3-Basic报告基因载体上,重组质粒命名为pGL3-Cbfa1。pGL3-Cbfa1瞬时转染成骨细胞系MC3T3-E1,检测其能否在Cbfa1基因启动子的调控下表达报告基因并提高萤光素酶活性。结果:pGL3-Cbfa1经酶切鉴定和序列分析证实与设计完全一致。细胞瞬时转染结果表明Cbfa1启动子具有转录活性,pGL3-Cbfa1的萤光素酶水平约是pGL3-Basic的35倍。结论:小鼠Cbfa1启动子报告基因载体的成功构建,为进一步将其用于抗骨质疏松药物的筛选与评价奠定了实验基础。
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| 关 键 词： | 基因 报告 萤光素酶类 核心结合因子类 转录启动子 |
Construction and Identification of Mouse Cbfa1 Gene Promoter Reporter Vector |
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| ZHENG Fang,CUI Zhuang,WANG Baoli,WANG Hongwu.Construction and Identification of Mouse Cbfa1 Gene Promoter Reporter Vector[J].Tianjin Medical Journal,2011,39(12):1133-1135. |
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| Authors: | ZHENG Fang CUI Zhuang WANG Baoli WANG Hongwu |
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| Institution: | ZHENG Fang,CUI Zhuang,WANG Baoli,WANG Hongwu Traditional Chinese Medical College,Tianjin University of Traditional Chinese Medicine,Tianjin 300193,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | |
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