大鼠高迁移率族蛋白 B1表达水平与 COPD 肺动脉平滑肌细胞合成分泌干扰素-γ的关系

目的：肺动脉高压与慢性阻塞性肺疾病（ chronic obstructive pulmonary disease ， COPD）密切相关。研究COPD继发肺动脉高压的机制，探讨COPD模型大鼠远端肺动脉平滑肌细胞（pulmonary arterial smooth muscle cells ， PASMCs）高迁移率族蛋白B1（high mobility group protein B1， HMGB1）表达水平与其合成分泌干扰素-γ（interferon-γ， IFN-γ）的相关性及临床意义。方法建立COPD大鼠模型，原代培养PASMCs并鉴定，检测香烟烟雾提取物（CSE）及脂多糖（LPS）诱导下PASMCs合成分泌细胞因子的功能，实验分组：对照组、CSE组、LPS组、CSE＋LPS组，同时4组另设瓶并分别加入1∶1000抗HMGB1抗体0．2 mL培养作为干预组；分别于培养12、24、48、72 h后，采用Western blot检测各组PASMCs中HMGB1蛋白表达变化，ELISA检测细胞培养上清液HMGB1、IFN-γ浓度，并进行相关分析。结果光镜下见细胞呈长梭形或“峰、谷”状生长，α-actin免疫组化染色及细胞免疫荧光鉴定为PASMCs；Western blot及ELISA法检测结果显示，4实验组组间培养12 h后HMGB1表达水平及细胞上清液HMGB1、IFN-γ，两两比较差异均有统计学意义（P＜0．05）；HMGB1蛋白表达水平与IFN-γ浓度变化呈正相关（r＝0．91）；加入抗HMGB1抗体干预培养12 h后，干预组IFN-γ浓度均较对应实验组减弱（P＜0．05）；同组内，于细胞培养12、24、48、72 h，Western blot及ELISA法检测结果差异均无统计学意义（ P＞0．05）。结论 HMGB1表达水平与COPD模型大鼠远端PASMCs合成分泌IFN-γ呈正相关，抗HMGB1抗体为临床治疗COPD、抑制其全身炎症反应提供了新的干预靶点。