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肠出血性大肠杆菌O157 LPS单克隆抗体的制备与鉴定
引用本文:孙洋,冯书章,祝令伟,郭学军,尹铁勇,刘军,周博. 肠出血性大肠杆菌O157 LPS单克隆抗体的制备与鉴定[J]. 中国人兽共患病杂志, 2007, 23(10): 971-973,977
作者姓名:孙洋  冯书章  祝令伟  郭学军  尹铁勇  刘军  周博
作者单位:军事医学科学院军事兽医研究所 长春130062
摘    要:目的建立能够分泌针对肠出血性大肠杆菌O157∶H7表面抗原的特异性单克隆抗体,以期用于该病原菌的检测。方法以敲除毒力基因的O157突变株F25全菌免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0融合,分别以全菌抗原和热酚水法纯化的O157 LPS抗原用间接ELISA筛选能够分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株,纯化抗体并鉴定。结果建立了稳定分泌抗O157 LPS抗原单克隆抗体的杂交瘤细胞株3D6,分泌抗体属IgG3亚类,轻链为κ型。腹水抗体ELISA效价达1∶3.2×106。以辛酸/饱和硫酸铵法纯化后抗体效价为1∶1.6×106,亲和常数Ka大于6.14×10-11mol/L。用于协同凝集和间接荧光抗体试验具有良好的特异性。结论该单克隆抗体针对O157的LPS抗原,特异性强,亲和力高,可用于O157的检测或分离鉴定。

关 键 词:肠出血性大肠杆菌O157∶H7  单克隆抗体  免疫荧光  协同凝集
文章编号:1002-2694(2007)10-0971-03
修稿时间:2007-02-102007-07-02

Preparation and characterization of monoclonal antibody against LPS antigen of Enterohemorrhagic Escherichia coli O157∶H7
SUN Yang,FENG Shu-zhang,ZHU Ling-wei,GUO Xue-Jun,YIN Tie-yong,LIU Jun,ZHOU Bo. Preparation and characterization of monoclonal antibody against LPS antigen of Enterohemorrhagic Escherichia coli O157∶H7[J]. Chinese Journal of Zoonoses, 2007, 23(10): 971-973,977
Authors:SUN Yang  FENG Shu-zhang  ZHU Ling-wei  GUO Xue-Jun  YIN Tie-yong  LIU Jun  ZHOU Bo
Affiliation:Institute of Amimal Science, The Academy of Military Medical Sciences, Changchun 130062, China
Abstract:
Keywords:LPS
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