| 脂质体介导兔角膜内皮细胞基因转染的观察 |
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| 引用本文： | 毛晓春,张虹,李贵刚. 脂质体介导兔角膜内皮细胞基因转染的观察[J]. 眼科新进展, 2007, 27(7): 485-488 |
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| 作者姓名： | 毛晓春 张虹 李贵刚 |
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| 作者单位： | 1. 441021,湖北省襄樊市,华中科技大学同济医学院附属襄樊医院眼科
2. 430030,湖北省武汉市,华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科 |
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| 摘 要： | 目的观察阳离子脂质体Lipofectamine2000能否介导目的基因转移至兔角膜内皮细胞内及脂质体潜在的毒副作用。方法RT-PCR检测特异性胶原Ⅷ进行细胞鉴定,通过体外细胞转染实验优化阳离子脂质体与质粒DNA的浓度和比例,选择Lipo-fectamine^TM 2000/pEGFP-N1比值3∶1,脂质体体积分别为0μL、6μL、9μL、12μL转染兔角膜内皮细胞,荧光显微镜观察目的基因的表达,透射电镜观察细胞超微结构。结果RT-PCR扩增得到单一产物,与预期的扩增序列大小完全一致,角膜内皮细胞内可见脂质体介导的绿色荧光蛋白表达,Lipofectamine^TM 2000浓度能显著影响其对兔角膜内皮细胞的转染效率,存在最佳浓度,在35mm培养皿中,3μg DNA与9μL脂质体转染效率最高,透射电镜显示12μL脂质体可导致细胞器出现肿胀、崩解现象。结论阳离子脂质体可有效介导目的基因转移至角膜内皮细胞内,在35mm培养皿中,12μL脂质体对角膜内皮细胞有一定的毒副作用。
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| 关 键 词： | 角膜内皮细胞 脂质体 转染 |
| 文章编号： | 1003-5141（2007）07-0485-04 |
| 修稿时间： | 2006-10-172007-04-16 |
Liposome mediated gene transfer into corneal endothelial cell |
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| MAO Xiao-Chun,ZHANG Hong,LI Gui-Gang. Liposome mediated gene transfer into corneal endothelial cell[J]. Recent Advances in Ophthalmology, 2007, 27(7): 485-488 |
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| Authors: | MAO Xiao-Chun ZHANG Hong LI Gui-Gang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | corneal endothelial cell liposomes transfection |
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