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糖原合成酶激酶-3β对巨噬细胞系RAW264.7活化的影响
作者姓名:张丹丹  李珊珊  李璐  李俊峰  郑素军  段钟平  陈煜
作者单位:张丹丹 (100069,首都医科大学附属北京佑安医院人工肝中心); 李珊珊 (100069,首都医科大学附属北京佑安医院人工肝中心); 李璐 (100069,首都医科大学附属北京佑安医院人工肝中心); 李俊峰 (100069,首都医科大学附属北京佑安医院人工肝中心); 郑素军 (100069,首都医科大学附属北京佑安医院人工肝中心); 段钟平 (100069,首都医科大学附属北京佑安医院人工肝中心); 陈煜 (100069,首都医科大学附属北京佑安医院人工肝中心);
基金项目:十二五重大专项课题资助项目(2012ZX10004904-003-001,2013ZX10002002-006-001);中国肝炎基金会-天晴肝病研究基金课题资助项目(20120093);北京市医院管理局临床医学发展专项经费资助(项目编号:XM,201308)
摘    要:目的探讨糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)对巨噬细胞系RAW264.7活化的影响。方法将生长状态良好的RAW264.7细胞分为3组:实验对照组、脂多糖(LPS)组和GSK-3β特异抑制剂SB216763干预组,在12 h、24 h进行指标检测。采用Western印迹法检测细胞GSK-3β、p-GSK-3β^ser9蛋白的表达,ELISA试剂盒法检测细胞上清IL-10、TNF-α的变化,RT-PCR检测细胞中5-LO mRNA变化,免疫荧光法检测ED1表达,电镜下观察RAW264.7细胞形态变化。结果12 h和24 h LPS组与对照组相比,p-GSK-3β^ser9表达减少,GSK-3β表达不变,活性升高;TNF-α、IL-10及5-LO mRNA表达增多(P〈0.05);ED1表达绿色荧光明显增多;透射电镜观察LPS组巨噬细胞形态不规则,吞噬坏死物质细胞变多。12 h和24 h SB216763干预组与LPS组进行比较,p-GSK-3β^ser9表达明显增多,GSK-3β表达不变,活性降低;TNF-α及5-LO mRNA表达减少(P〈0.05),IL-10表达明显增多(P〈0.05);ED1绿色荧光表达减少;透射电镜观察细胞形态较规则。结论 GSK-3β对于RAW264.7细胞活化发挥重要的作用。

关 键 词:糖原合成酶激酶3β  RAW264.7细胞活化
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