| 增殖细胞核抗原 siRNA 序列的设计、合成与筛选 |
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| 引用本文： | 蒋建伟,史金桃,吴智慧,曾慧兰,严玉霞,陈涛,丁文婷.增殖细胞核抗原 siRNA 序列的设计、合成与筛选[J].中国病理生理杂志,2008,24(3):484-489. |
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| 作者姓名： | 蒋建伟 史金桃 吴智慧 曾慧兰 严玉霞 陈涛 丁文婷 |
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| 作者单位： | 暨南大学1医学院生化教研室，2附属第一医院血液科，广东 广州 510632 |
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| 基金项目： | 广东省广州市科技计划
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广东省医学科学技术研究基金 |
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| 摘 要： | 目的：设计并筛选能有效抑制人肝癌SMMC-7721细胞、人结肠癌Caco2细胞、人胃癌SCG-7901细胞增殖的增殖细胞核抗原(PCNA) siRNA。方法:总结以往提出的siRNA 设计原则的基础上，设计4 条PCNA siRNA，体外转录合成PCNA siRNA；并作用于3 种肿瘤细胞，WST-8法检测细胞增殖活性，筛选能有效抑制肿瘤细胞增殖的siRNA序列；RT-PCR检测细胞PCNA mRNA水平；免疫细胞化学方法检测 PCNA 蛋白表达水平。结果:4 条PCNA siRNA中，有3 条序列（No.2、No.4、No.3）的siRNA能有效抑制3 种肿瘤细胞的增殖；其中No.2、No.4作用效果最优，以50 nmol/L浓度作用48 h，对3种肿瘤细胞的增殖抑制率均可达到62％以上，No.2、No.4 PCNA siRNA均能在mRNA和蛋白水平显著下调PCNA的表达。结论:PCNA siRNA能在体外有效抑制SMMC-7721细胞、Caco2细胞、SCG-7901细胞的增殖，其适宜作用浓度为50 nmol/L，适宜作用时间为48 h。
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| 关 键 词： | 增殖细胞核抗原 siRNA 结直肠肿瘤 肝肿瘤 胃肿瘤 |
| 文章编号： | 1000-4718(2008)03-0484-06 |
| 收稿时间： | 2006-12-12 |
| 修稿时间： | 2006年12月12 |
Design, preparation and screening of siRNA of proliferating cell nuclear antigen |
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| JIANG Jian-wei,SHI Jin-tao,WU Zhi-hui,ZENG Hui-lan,YAN Yu-xia,CHEN Tao,DING Wen-ting.Design, preparation and screening of siRNA of proliferating cell nuclear antigen[J].Chinese Journal of Pathophysiology,2008,24(3):484-489. |
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| Authors: | JIANG Jian-wei SHI Jin-tao WU Zhi-hui ZENG Hui-lan YAN Yu-xia CHEN Tao DING Wen-ting |
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| Institution: | 1Department of Biochemistry, Medical College, 2Department of Hematology, The First Affiliated Hospital, Jinan University, Guangzhou 510632, China. E-mail: jjw703@163.com |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Proliferating cell nuclear antigen siRNA Colorectal neoplasms Liver neoplasms Stomach neoplasms |
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