人源性脑胶质瘤噬菌体抗体库的构建 |
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引用本文: | 王彦刚,章翔,阎岩,付洛安,刘卫平,吴景文,郭庆东,刘先珍. 人源性脑胶质瘤噬菌体抗体库的构建[J]. 解放军医学杂志, 2001, 26(11): 795-797 |
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作者姓名: | 王彦刚 章翔 阎岩 付洛安 刘卫平 吴景文 郭庆东 刘先珍 |
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作者单位: | 1. 第四军医大学西京医院, 2. 第四军医大学微生物教研室 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助课题 (编号 39970 85 2 ) |
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摘 要: | 为构建人源性脑胶质瘤噬菌体抗体库 ,从脑胶质瘤患者外周血淋巴细胞 (PBL)中提取细胞总RNA ,经逆转录后用套式PCR分别扩增抗体轻链Vκ和重链VH基因。先构建Vκ基因库 ,并使连接Vκ和VH基因的linker与Vκ基因连接 ,再将VH基因克隆入Vκ基因库 ,即构建成功单链抗体 (ScFv)库。随机挑取菌落鉴定 ,测序表明从PBL中扩增出人源性Vκ和VH基因 ,并构建了库容量约为 2× 10 6的ScFv噬菌体抗体库。随机挑取克隆的测序表明 ,测定的VH基因与Kabat的抗体基因库中人抗体VH基因有较高的同源性 ,证明所克隆的基因属人抗体可变区基因。结果表明实验构建成人源性脑胶质瘤噬菌体抗体库 ,为进一步筛选人源性抗脑胶质瘤抗体奠定了基础
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关 键 词: | 神经胶质瘤 噬菌体抗体库 单链抗体 免疫治疗 脑肿瘤 PBL 外周血淋巴细胞 |
修稿时间: | 2001-04-11 |
CONSTRUCTION OF PHAGE LIBRARY OF HUMAN ANTIBODY FROM GLIOMA PATIENTS |
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Abstract: | |
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Keywords: | glioma phage antibody repertoire single chain Fv gene |
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