人lrg在大肠杆菌中的表达及表达产物的免疫血清制备和鉴定 |
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引用本文: | 杜可军,柴玉波,常文辉,侯理朝,张晓楠,陈南春,林树新,陈苏民. 人lrg在大肠杆菌中的表达及表达产物的免疫血清制备和鉴定[J]. 医学争鸣, 2004, 25(16): 1456-1459 |
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作者姓名: | 杜可军 柴玉波 常文辉 侯理朝 张晓楠 陈南春 林树新 陈苏民 |
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作者单位: | 第四军医大学基础部生物化学和分子生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部生物化学和分子生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部生物化学和分子生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部生物化学和分子生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部生物化学和分子生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部生物化学和分子生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部生物化学和分子生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部生物化学和分子生物学教研室,陕西,西安,710033 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目 (30 1 70 361 ) |
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摘 要: | 目的:在大肠杆菌表达人lrg,制备鉴定人Lrg免疫血清.方法:构建pcTAT-lrg重组表达质粒,并在大肠杆菌中诱导表达相应的融合蛋白;对表达的融合蛋白采用镍柱和SDS-PAGE纯化;以纯化蛋白作为免疫抗原,对新西兰白兔实施多次免疫(问隔时间分别为1mo,3wk,2wk).结果:获得兔抗人Lrg免疫血清.经过ELISA和Western Blot检测,效价在1:1000以上.真核细胞实验表明,6His-TAT-Lrg蛋白具有良好的穿透性,可以在30min内从培养液进入细胞质;免疫组化实验表明Lrg是一种胞质蛋白;兔抗人Lrg免疫血清可有效应用于细胞和组织的检测.结论:制备得到兔抗人Lrg免疫血清,为lrg的功能研究打下基础。
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关 键 词: | 人lrg基因 亲和纯化 免疫血清 |
文章编号: | 1000-2790(2004)16-1456-04 |
修稿时间: | 2003-12-31 |
Expression of human lrg in E.coli and identification of immune serum against human Lrg protein |
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Abstract: | |
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Keywords: | lrg affinity purification immune sera |
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