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淫羊藿甙对成骨细胞Smad4 mRNA作用的实验研究
引用本文:雪原,王沛,齐清会,倪虹,马信龙,郭世绂.淫羊藿甙对成骨细胞Smad4 mRNA作用的实验研究[J].中华骨科杂志,2005,25(2):119-123.
作者姓名:雪原  王沛  齐清会  倪虹  马信龙  郭世绂
作者单位:1. 300052,天津医科大学总医院骨科
2. 300052,天津医科大学总医院中西医结合外科
3. 南开大学生命科学院分子生物学二室
基金项目:天津市自然科学基金(033609511)
摘    要:目的检测淫羊藿甙对体外培养的成骨细胞MC3T3-E1中Smad4mRNA的影响。方法用0、10、20、40ng/ml的淫羊藿甙刺激MC3T3-E1细胞。用倒置相差显微镜观察细胞生长情况。通过四甲基噻唑蓝(MTT)法测绘细胞生长曲线和计算细胞群体倍增时间;描述刺激MC3T3-E1细胞的增殖能力。用速率分光光度法测定ALP的含量,免疫组织化学法观察Ⅰ型胶原的产生,用以判断细胞的分化情况。用RT-PCR测定Smad4mRNA的数量。结果10、20ng/ml浓度淫羊藿甙可使MC3T3-E1细胞的生长曲线明显上移(P<0.01);0、10、20和40ng/ml组群体倍增时间分别为(39.37±2.35)h、(26.76±1.78)h、(29.30±2.12)h和(36.35±2.34)h,各组间比较差异有统计学意义(P<0.01);0、10ng/ml可使MC3T3-E1细胞产生ALP和Ⅰ型胶原量增加,刺激ALP作用呈现时间和剂量的依赖性(P<0.01);RT-PCR显示10、20ng/ml浓度淫羊藿甙可以刺激MC3T3-E1细胞Smad4mRNA的数量增加。上述作用以10ng/ml浓度最强(P<0.01)。结论淫羊藿甙刺激成骨细胞MC3T3-E1增殖与分化,可能是通过提高MC3T3-E1细胞Smad4mRNA的量而产生作用。

关 键 词:成骨细胞  淫羊藿甙  细胞培养

The experimental study of the effects of icariin on increasing Smad4 mRNA level in MC3T3-E1 cell in vitro
Abstract:
Keywords:Osteoblasts  Icariin  Cell culture
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