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携绿色荧光蛋白和调控元件的人胰岛素原基因在HepG2细胞的表达
引用本文:邵敬伟,董海燕,王涛. 携绿色荧光蛋白和调控元件的人胰岛素原基因在HepG2细胞的表达[J]. 福建医科大学学报, 2007, 41(5): 393-395,399
作者姓名:邵敬伟  董海燕  王涛
作者单位:福州大学,药物生物技术与工程研究所,福州,350002
摘    要:目的 研究含绿色荧光蛋白(GFP)和人胰岛素原基因的逆转录病毒表达载体在HepG2细胞中的表达. 方法 将IRES-EGFP片段克隆到含调控元件的人胰岛素原基因逆转录病毒表达载体(pLXSN-GI-Ins)中,构建得到表达质粒pLXSN-GI-Ins-EGFP,经脂质体介导转染HepG2细胞后,各孔分别加入含有不同浓度葡萄糖的培养液继续培养24 h,在荧光显微镜下观察GFP基因的表达,检测细胞上清液中的胰岛素值及考察细胞中胰岛素mRNA的表达量. 结果 成功构建逆转录病毒表达质粒pLXSN-GI-Ins-EGFP.转染HepG2细胞后48 h,葡萄糖浓度为4.0,12.0,24.0 mmol/L,表达GFP基因的细胞数目占总细胞数目的 比值分别为(4.00±0.15)%,(10.00±0.07)%,(25.00±0.10)%;胰岛素分泌量分别为(4.05±0.82),(8.67±0.62),(30.70±1.55)mU/L,不同葡萄糖浓度诱导的胰岛素mRNA表达量明显不同. 结论 含GFP和调控元件的人胰岛素原基因逆转录病毒表达载体能够在HepG2细胞中成功表达,并且GFP基因的表达量反映了人胰岛素的分泌量.

关 键 词:绿色荧光蛋白质类  胰岛素  逆转录病毒科  转染  基因  细胞,培养  遗传载体
文章编号:1672-4194(2007)05-0393-04
修稿时间:2007-03-092007-05-23

Recombinant of Green Fluorescent Protein Gene and Human Insulin Gene Allows Efficient Coexpression in HepG2 Cells
Shao Jingwei,Dong Haiyan,Wang Tao. Recombinant of Green Fluorescent Protein Gene and Human Insulin Gene Allows Efficient Coexpression in HepG2 Cells[J]. Journal of Fujian Medical University, 2007, 41(5): 393-395,399
Authors:Shao Jingwei  Dong Haiyan  Wang Tao
Affiliation:Institute of Pharmaceutical Biotechnology and Bioengineering, Fuzhou University, Fuzhou 350002, China
Abstract:
Keywords:green fluorescent proteins    insulin    retroviridae    transfection   genes    cells, cultured   genetic vectors
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