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| MultiSite Gateway技术在疟原虫条件性基因打靶载体快速构建中的应用 | |
| 引用本文： | 王各各,李娇娜,杜峰,邓舒,梁佳元,曹雅明,罗恩杰. MultiSite Gateway技术在疟原虫条件性基因打靶载体快速构建中的应用[J]. 中国医科大学学报, 2012, 41(12): 1068-1072 |
| 作者姓名： | 王各各 李娇娜 杜峰 邓舒 梁佳元 曹雅明 罗恩杰 |
| 作者单位： | 1. 中国医科大学基础医学院免疫学教研室,沈阳,110001 2. 沈阳市中医药学校基础教研室,沈阳,110001 3. 中国医科大学基础医学院病原生物学教研室,沈阳,110001 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
| 摘 要： | 目的构建可条件性敲除约氏疟原虫ebl基因的打靶载体。方法以约氏疟原虫基因组DNA为模板,PCR扩增EBL-3U和EBL-5U1、EBL-5U2+EBL.orf同源臂片段,利用MultiSite Gateway技术,完成若干DNA片段的定性重组,构建打靶载体pCHD-EBL-RFT,并对质粒酶切和测序鉴定。PCR扩增约氏疟原虫UIS4-5U片段,置换质粒PbUIS4/flp中原有同源臂,并通过位点特异突变技术,获取AvrII和NheI两种线性化位点,构建插入载体PyUIS4/flp。结果构建出打靶载体pCHD-EBL-FRT和PyUIS4/flp,酶切鉴定和测序分析正确。结论将MultiSite Gateway技术成功地用于疟原虫条件打靶载体的构建,建立了以MultiSite Gateway技术为基础的打靶载体构建体系。 |
| 关 键 词： | 疟原虫 质粒 基因打靶 MultiSite Gateway技术 |
Application of MultiSite Gateway Technology in High Efficient Construction of Plasmodium Gene-targeting Vector |
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| WANG Ge-ge , LI Jiao-na , DU Feng , DENG Shu , LIANG Jia-yuan , CAO Ya-ming , LUO En-jie. Application of MultiSite Gateway Technology in High Efficient Construction of Plasmodium Gene-targeting Vector[J]. Journal of China Medical University, 2012, 41(12): 1068-1072 | |
| Authors: | WANG Ge-ge LI Jiao-na DU Feng DENG Shu LIANG Jia-yuan CAO Ya-ming LUO En-jie |
| Affiliation: | 1.Department of Immunology,College of Basic Medical Sciences,China Medical University,Shenyang 110001,China;2.Basic Course Section,Shenyang Traditional Chinese Medical School,Shenyang 110001,China;3.Department of Pathogen Biology,College of Basic Medical Sciences,China Medical University,Shenyang 110001,China) |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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