人骨髓间质干细胞体外培养及诱导成骨的鉴定 |
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作者姓名: | 张利 查振刚 姚平 吴昊 张嘉晴 刘宁 黄春华 林宏生 王国普 |
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作者单位: | 暨南大学附属第一医院骨科,广州,510630;暨南大学医学院,生理教研室,广州,510630;暨南大学医学院,生化教研室,广州,510630 |
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基金项目: | 广东省广州市科技攻关项目 |
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摘 要: | 目的 优化人骨髓间质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,hBMSCs)体外分离培养方法,对hBMSCs体外培养及诱导成骨能力进行鉴定.方法 密度梯度离心法分离hBMSCs,流式细胞分析法(FACS)对细胞表面抗原、细胞活力、细胞周期进行检测.以含地塞米松(1×10-7 mmol/L)、β-甘油磷酸钠(10 mmol/L)、抗坏血酸(35.22 mg/L)的DMEM培养液对hBMSCs进行诱导分化,相差显微镜和透视电镜观察细胞形态,Gomori钙钴法进行碱性磷酸酶染色(ALP),免疫组化检测Ⅰ型胶原,茜素红法进行钙结节染色.结果 hBMSCs可在体外分离扩增,表达CD44、CD105和CD106,不表达CD34和CD45,细胞活力为92.3%,G0-G1细胞占94.2%.经成骨培养液诱导后细胞形态由长梭形向多边形转变,ALP染色、Ⅰ型胶原染色及钙结节染色均为强阳性.结论 hBMSCs可在体外长期、稳定培养,具有向成骨细胞分化的潜能.
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关 键 词: | 骨髓间质干细胞 细胞培养 诱导成骨 |
收稿时间: | 2006-08-15 |
修稿时间: | 2006-08-15 |
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