| 人血小板源性生长因子B基因的体外扩增以及克隆和鉴定 |
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| 引用本文： | 罗文娟,王传富,吕振华,刘湘萍,隋爱华.人血小板源性生长因子B基因的体外扩增以及克隆和鉴定[J].中国临床康复,2006,10(25):80-82. |
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| 作者姓名： | 罗文娟 王传富 吕振华 刘湘萍 隋爱华 |
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| 作者单位： | [1]青岛大学医学院附属医院眼科,山东省青岛市266003 [2]青岛大学医学院附属医院中心实验室,山东省青岛市266003 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目（30572011） |
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| 摘 要： | 目的：自行构建人血小板源性生长因子B（PDGF-B）真核表达载体，为人血小板源性生长因子B基因转染真核细胞的实验研究及基因治疗奠定基础。方法：实验于2002-01／2005-01在青岛大学医学院附属医院中心实验室完成。①根据GeIlbank的人血小板源性生长因子B的全长基因序列，设计合成一对附加BamHⅠ，XhoⅠ两个限制性内切酶酶切位点的特异性引物。②采用反转录聚合酶链反应从人胎盘mRNA中扩增出人血小板源性生长因子B基因片段，将其插入真核表达载体PcDNA4构建成重组真核表达载体PcDNA4／PDGF-B。⑧经测序鉴定后，再用双酶切和聚合酶链反应对插入片段进行分析和验证。结果：反转录-聚合酶链反应产物经琼脂糖电泳结果显示在预期位置有相对分子质量为725bp的特异性扩增带。②序列分析、双酶切和聚合酶链反应结果证实插入片段序列正确。结论：成功扩增出完整的人血小板源性生长因子B基因，构建了基因重组真核表达载体PcDNA4／PDGF-B。为人及动物细胞的转基因研究，在基因水平改变其遗传性状打下基础。
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| 关 键 词： | 血小板源性生长因子 基因 序列分析 |
| 收稿时间： | 11 28 2005 12:00AM |
| 修稿时间： | 01 26 2006 12:00AM |
In vitro proliferation, clone and identification of human platelet-derived growth factor B gene |
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| Luo Wen-juan, Wang Chuan-fu, Lu Zheng-hua, Liu Xiang-ping, Sui Ai- hua.In vitro proliferation, clone and identification of human platelet-derived growth factor B gene[J].Chinese Journal of Clinical Rehabilitation,2006,10(25):80-82. |
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| Authors: | Luo Wen-juan Wang Chuan-fu Lu Zheng-hua Liu Xiang-ping Sui Ai- hua |
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| Institution: | 1,Department of Ophthalmology, 2,Central Laboratory, Affiliated Hospital of Qingdao Medical College, Qingdao 266003, Shandong Province, China |
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