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4株蚊媒病毒多重RT-PCR快速检测方法的建立
引用本文:王军军,李歆,任瑞文. 4株蚊媒病毒多重RT-PCR快速检测方法的建立[J]. 广东寄生虫学会年报, 2010, 0(8): 918-920
作者姓名:王军军  李歆  任瑞文
作者单位:[1]广州军区广州总医院体检中心,广州510010 [2]广州医学院附属肿瘤医院检验科,广州510010 [3]广州军区疾病预防控制中心疾病预防控制科,广州510507
基金项目:广东省科技计划项目(No.20006B36008005)
摘    要:目的建立登革1、2型病毒、黄热病毒及流行性乙型脑炎病毒的多重RT-PCR快速检测方法。方法参照病毒核酸序列设计多重RT-PCR引物,并检索GenBank国际基因序列数据库初步验证其特异性,随后对Mg2+、dNTP及引物浓度,RT-PCR反应条件进行优化,建立稳定、特异的多重RT-PCR快速检测4株病毒方法 ,并以同属于黄病毒科的登革3型病毒、登革4型病毒及甲病毒属基孔肯亚病毒、辛德毕斯病毒为对照,验证其特异性。结果应用多重RT-PCR反应体系,对引物的相关性实验结果表明引物之间不会因相互干扰而出现假阳性结果 ;采用多重RT-PCR引物对登革1、2型病毒、黄热病毒及流行性乙型脑炎病毒进行扩增,分别获得574、251、879、422 bp片段,与设计相符,而对照病毒组均无非特异性扩增条带。结论实验证明,所建立的多重RT-PCR方法能够快速地检测登革1、2型病毒、黄热病毒及流行性乙型脑炎病毒,为其检测提供了一种方便易行的方法 。

关 键 词:登革病毒  黄热病毒  流行性乙型脑炎病毒  多重RT-PCR

Development of Multiplex RT-PCR Methods for Detection of Arboviruses
WANG Jun-jun,LI Xin,REN Rui-wen. Development of Multiplex RT-PCR Methods for Detection of Arboviruses[J]. Journal of Tropical Medicine, 2010, 0(8): 918-920
Authors:WANG Jun-jun  LI Xin  REN Rui-wen
Affiliation:1.Medical Center of General Hospital of Guangzhou Military Command of PLA,Guangzhou 510010;2.Laboratory of Cancer Center of Guangzhou Medical College,Guangzhou 510010;3.Guangzhou Institute for Drug Control,Guangzhou 510507,China)
Abstract:
Keywords:dengue virus  Japanese encephalitis virus  Yellow Fever virus  multiplex RT-PCR
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