| 戊型肝炎病毒基因Ⅳ型病毒样颗粒的表达和抗原性分析 |
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| 引用本文： | 柯昌文,李天成,武田直和.戊型肝炎病毒基因Ⅳ型病毒样颗粒的表达和抗原性分析[J].华南预防医学,2005,31(3):1-5. |
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| 作者姓名： | 柯昌文 李天成 武田直和 |
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| 作者单位： | 广东省疾病预防控制中心,广东,广州,510300;日本国立感染症研究所 |
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| 摘 要： | 目的表达戊型肝炎病毒(HEV)基因Ⅳ型(G4)结构蛋白ORF2截短的基因片段,观察病毒样颗粒(VLP)的装配情况,对纯化的VLP进行抗原性分析。方法为了制备HEV病毒样颗粒,将结构蛋白ORF2的N末端111个氨基酸残基截掉,然后将112至660共549个氨基酸残基的基因与杆状病毒基因重组,在昆虫细胞Tn5表达。首先用聚丙烯酰胺凝胶电泳和WesternBlotting检测基因是否正确表达,再用超速离心检测是否形成病毒样颗粒,最后用免疫电镜和ELISA分析病毒样颗粒的抗原特异性。结果含有截掉了N末端111个氨基酸残基的HEVG4的ORF2基因的重组杆状病毒感染昆虫细胞Tn5,除了可以表达最初的产物(相对分子质量为58×103的蛋白分子)外,也产生了一些可能经过宿主细胞酶类处理的蛋白分子,相对分子质量分别为57×103、56×103和54×103,并分泌到培养液中。经超速离心和密度梯度离心,电镜观察发现只有54×103的蛋白分子可以自行组装成VLP,颗粒直径为23~24nm,浮密度为1·285g/cm3,与HEVG1比较,G4VLP具有相同的大小和浮密度,但表达量低。G4VLP与HEV病人血清可以发生抗原抗体反应,用G4VLP作抗原可以检测HEV的G1、G3、G4型特异性IgM和IgG抗体。结论该研究证实截短的HEVG4的ORF2结构蛋白基因可以在重组杆状病毒表达系统高效表达。形成的VLP具有HEV病毒颗粒类似的抗原活性,可用于制备抗HEV诊断试剂和开发预防用疫苗。
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| 关 键 词： | 肝炎病毒 戊型 基因 病毒 抗原抗体反应 |
| 文章编号： | 1671-5039(2005)03-0001-05 |
| 修稿时间： | 2005年3月9日 |
Expression and antigenic analysis of recombinant ORF2 from hepatitis E virus genotype 4 |
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| KE Chang-wen,LI Tian-cheng,TAKEDA Naokazu.Expression and antigenic analysis of recombinant ORF2 from hepatitis E virus genotype 4[J].South China JOurnal of Preventive Medicine,2005,31(3):1-5. |
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| Authors: | KE Chang-wen LI Tian-cheng TAKEDA Naokazu |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Hepatitis E virus Genes viral Antigen-antibody reactions |
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