| HCC特异性结合的scFv-AP融合蛋白的构建与表达 |
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| 引用本文： | 程欣,黄永建,黄宇,朱慧芬,余冰,唐珍洁,李文涵,沈关心.HCC特异性结合的scFv-AP融合蛋白的构建与表达[J].细胞与分子免疫学杂志,2005,21(6):717-718,722. |
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| 作者姓名： | 程欣 黄永建 黄宇 朱慧芬 余冰 唐珍洁 李文涵 沈关心 |
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| 作者单位： | 1. 华中科技大学同济医学院,免疫学系,湖北,武汉,430030
2. 华中科技大学同济医学院,附属同济医院儿科,湖北,武汉,430030 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划（973）资助（No.2002CB513109） |
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| 摘 要： | 目的：构建与肝癌细胞特异性结合的单链抗体-AP融合蛋白，并诱导表达。方法：提取从大型人源噬菌体抗体库中筛选的含有与HCC特异性结合的scFv-10基因的质粒，用SfiⅠ、NotⅠ分别酶切，连接至经同样双酶切后的原核分泌型表达载体pDAP2上，转化和筛选后，阳性细菌经IPTG诱导表达，细胞ELISA鉴定融合蛋白活性。结果：重组质粒经PCR扩增，Eco91Ⅰ单酶切及Eco91Ⅰ／NotⅠ双酶切鉴定，证明scFv-10基因已插入到原核分泌型表达载体pDAP2上。表达产物的定位分析表明融合蛋白主要分泌性表达到周质腔，细胞ELISA证明表达产物有与HCC结合的活性。结论：成功地构建并表达了与HCC特异性结合的单链抗体．AP融合蛋白，为其应用奠定了基础。
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| 关 键 词： | 单链抗体 碱性磷酸酶 融合蛋白 诱导表达 |
| 文章编号： | 1007-8738（2005）06-0717-03 |
| 收稿时间： | 2005-02-28 |
| 修稿时间： | 2005-02-282005-05-09 |
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