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Neu RNAi对卵巢癌细胞生长、凋亡及药物敏感性的作用
引用本文:张欣,杨尚斌,张果,朱红霞,吴令英,徐宁志. Neu RNAi对卵巢癌细胞生长、凋亡及药物敏感性的作用[J]. 癌症进展, 2010, 8(4): 394-400. DOI: 10.3969/j.issn.1672-1535.2010.04.018
作者姓名:张欣  杨尚斌  张果  朱红霞  吴令英  徐宁志
作者单位:煤炭总医院妇产科,北京,100028;中国医学科学院,北京协和医学院,肿瘤医院,肿瘤研究所细胞生物学与分子生物学研究室,北京,100021;中国医学科学院,北京协和医学院,肿瘤医院,肿瘤研究所妇瘤科,北京,100021
摘    要:目的探讨nenRNAi对卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP细胞生长、凋亡及药物敏感性的作用,寻找下调基因表达并逆转化疗耐药的方法,为卵巢癌的基因治疗探索新途径。方法应用含有u6启动子的pSilencer 1.0-U6表达载体构建neu基因的小干扰RNA(siRNA)表达载体(pSilencer—neu),用脂质体方法将pSilencer—neu转染卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP,另设未转染组及转染pSilencer—control组为对照。显微镜下观察转染前后细胞的变化;用RT—PCR及Western Blot检测neu基因mRNA及蛋白的表达;MTT法检测细胞生长情况;流式细胞仪检测细胞凋亡及周期的变化;加入顺铂后检测RNAi对SKOV3/DDP顺铂药物敏感性的影响。结果neuRNAi可明显下调卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP中neu的基因表达;使其细胞生长受到抑制,生长速度减慢,生长曲线低平;细胞凋亡增加且细胞周期发生变化,G1/G0期细胞增多,S期细胞则减少;顺铂耐药实验显示,转染RNAi的SKOV3/DDP细胞IC50明显下调,细胞凋亡率显著增加。结论应用RNAi可以部分阻抑neu基因在卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP中的表达,使SKOV3/DDP细胞生长减慢、凋亡增加,而且对顺铂的敏感性增强。

关 键 词:Neu基因  RNAi  卵巢癌  SKOV3/DDP细胞株

Effects of Neu RNAi on growth, apoptosis, and chemoresistance of ovarian cancer cell SKOV3/DDP
Zhang Xin,Yang Shangbin,Zhang Guo,Zhu Hongxia,Wu Lingying,Xu Ningzhi. Effects of Neu RNAi on growth, apoptosis, and chemoresistance of ovarian cancer cell SKOV3/DDP[J]. Oncology Progress, 2010, 8(4): 394-400. DOI: 10.3969/j.issn.1672-1535.2010.04.018
Authors:Zhang Xin  Yang Shangbin  Zhang Guo  Zhu Hongxia  Wu Lingying  Xu Ningzhi
Affiliation:Zhang Xin~1 Yang Shangbin~2 Zhang Guo~2 Zhu Hongxia~2 Wu Lingying~(3#) Xu Ningzhi~2 1 Department of Obstetrics and Gynecology,China Meitan General Hospital,Beijing 100028,China 2 Department of Cellular and Molecular Biology,3 Department of Gynecological Oncology,Cancer Institute & Hospital,PUMC & CAMS,Beijing 100021,China
Abstract:Objective To explore the effects of RNA interference(RNAi) on the growth,apoptosis,and chemotherapeutic sensitivity of ovarian cancer cell line SKOV3/DDP.Methods Expression vector of Neu gene - targeting siRNA was constructed using pSilencer 1.0 - U6 vector contained U6 promotor(pSilencer - neu ) and transfected into SKOV3/DDP cells by lipofectamine.Untransfected group and pSilencer - control group were used as controls.The expression of Neu mRNA and protein were identified by RT - PCR and Western blot.The ...
Keywords:RNAi
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