| β-arrestin 2 shRNA慢病毒载体的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 涂秋杰,任涛. β-arrestin 2 shRNA慢病毒载体的构建及鉴定[J]. 同济大学学报(医学版), 2017, 38(6): 33-36, 40 |
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| 作者姓名： | 涂秋杰 任涛 |
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| 作者单位： | 同济大学附属东方医院呼吸内科,上海 200120,同济大学附属东方医院呼吸内科,上海 200120 |
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| 基金项目： | 上海市浦东新区卫生系统重点学科建设项目(PWZx2014-10) |
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| 摘 要： | 目的 构建β-arrestin 2的shRNA慢病毒载体,获得稳定低表达β-arrestin 2的人非小细胞肺癌A549细胞并验证敲低效果。方法 查询4对可信的β-arrestin 2敲低序列,将载体质粒pSicoR-GFP线性化,构建目的质粒,转化感受态细胞,对长出的克隆应用菌落PCR鉴定,再对阳性结果进行测序和比对分析。重组病毒质粒与另外三种辅助包装原件载体质粒通过Lipofectamine 2000共转染293T细胞,培养48h后,收集细胞培养上清液,导入人非小细胞肺癌细胞A549中,用qRT-PCR检测转染效率。结果 成功构建β-arrestin 2的shRNA慢病毒载体质粒,测序比对结果一致。qRT-PCR检测发现一组β-arrestin 2的mRNA表达只有对照组的56%。结论 成功构建β-arrestin 2的shRNA慢病毒载体,并验证其在人非小细胞肺癌细胞A549中敲低效果显著。
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| 关 键 词： | β-arrestin 2 shRNA 慢病毒 非小细胞肺癌 |
| 收稿时间： | 2017-04-10 |
Construction and verification of a lentivector for beta arrestin 2 short hairpin RNA |
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| TU Qiu-jie and REN Tao. Construction and verification of a lentivector for beta arrestin 2 short hairpin RNA[J]. Journal of Tongji University(Medical Science), 2017, 38(6): 33-36, 40 |
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| Authors: | TU Qiu-jie and REN Tao |
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| Affiliation: | Dept. of Respiratory Medicine, East Hospital, Tongji University, Shanghai 200120, China and Dept. of Respiratory Medicine, East Hospital, Tongji University, Shanghai 200120, China |
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