益肺逐积方诱导人肺腺癌A549细胞凋亡机制 |
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引用本文: | 蒋时红,吴耀松,孙超龙,贾乐乐.益肺逐积方诱导人肺腺癌A549细胞凋亡机制[J].中国实验方剂学杂志,2018,24(5):131-136. |
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作者姓名: | 蒋时红 吴耀松 孙超龙 贾乐乐 |
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作者单位: | 河南中医药大学 基础医学院, 郑州 450008,河南中医药大学 基础医学院, 郑州 450008,河南省中医药研究院 附属医院, 郑州 450004,河南中医药大学 基础医学院, 郑州 450008 |
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基金项目: | 河南省教育厅高校重点科研计划项目(14A360019) |
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摘 要: | 目的:通过体外实验观察益肺逐积方对人肺腺癌A549细胞活性、细胞凋亡以及表皮生长因子受体(EGFR),G蛋白偶联受体30(GPR30)蛋白表达的影响,探讨中药复方益肺逐积方抑制肺癌细胞活性,诱导肺癌细胞凋亡的作用机制。方法:将人肺腺癌A549细胞培养至对数生长期,益肺逐积方高、低质量浓度组分别加入2,1.5 g·L~(-1)益肺逐积方培养液,5-氟尿密啶(5-FU)组加入2.5 g·L~(-1)5-FU培养液,溶剂组加入含10%胎牛血清的RPMI 1640培养液,分别作用24,48 h后,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测益肺逐积方对人肺腺癌A549细胞活性的影响;吖啶橙/溴乙啶(AO/EB)荧光染色观察益肺逐积方作用不同时间后人肺腺癌A549细胞的凋亡形态学变化;流式细胞术(FCM)测定益肺逐积方作用下人肺腺癌A549细胞的凋亡率;利用倒置显微镜观察益肺逐积方作用24,48 h后A549细胞的形态学改变,蛋白质免疫印迹法(Western blot)测定人肺腺癌A549凋亡细胞EGFR,GPR30蛋白的表达。结果:与溶剂组比较,1.5,2 g·L~(-1)益肺逐积方均能抑制人肺腺癌A549细胞活性(P0.05),诱导A549细胞发生不同程度的凋亡形态学改变;流式细胞术检测显示,益肺逐积方作用24,48 h后,可使人肺腺癌A549细胞其发生晚期凋亡(P0.05);Western blot结果显示,益肺逐积方可以不同程度地下调人肺腺癌A549细胞GPR30,EGFR蛋白的表达(P0.05)。结论:益肺逐积方可抑制人肺腺癌A549细胞活性、诱导其发生晚期凋亡,并使其发生凋亡形态学改变,这可能与下调EGFR,GPR30蛋白表达有关。
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关 键 词: | 益肺逐积方 A549细胞 凋亡 表皮生长因子受体 G蛋白偶联受体30 |
收稿时间: | 2017/8/29 0:00:00 |
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