| pFLAG-CMV-TRAF1真核表达载体的构建及其对NF-κB信号通路的影响 |
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| 引用本文： | 黄晓碧,王建,王晓辉,姚景辉,原艳芝,杨晓明,汪思应.pFLAG-CMV-TRAF1真核表达载体的构建及其对NF-κB信号通路的影响[J].安徽医科大学学报,2009,44(2). |
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| 作者姓名： | 黄晓碧 王建 王晓辉 姚景辉 原艳芝 杨晓明 汪思应 |
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| 作者单位： | 安徽医科大学病理生理学教研室,合肥,230032;军事医学科学院放射与辐射医学研究所、北京(国家)蛋白质组研究中心,北京,100850 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金创新研究群体基金，国家高技术研究发展计划(863计划)，国家重点基础研究发展规划(973计划)，安徽省人才开发基金 |
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| 摘 要： | 目的 构建人TRAF1真核表达载体,应用荧光素酶报告基因实验研究TRAF1对NF-κB报告基因活性的影响.方法 采用PCR技术扩增出TRAF1编码基因,将其构到真核表达载体pFlag-CMV-2上.用脂质体将构建的真核表达载体瞬时转染HEK293细胞,用Western blot检测TRAF1蛋白是否表达.用荧光素酶报告基因实验验证其对NF-κB转录活性的影响.结果 成功克降TRAF1编码基因至相应表达载体上.构建的TRAF1真核表达载体使HEK293细胞高表达TRAF1蛋白;在肿瘤坏死因子(TNF-α)的刺激下可以抑制NF-κB的转录活性.结论 TRAF1负调控NF-κB的活性,为进一步研究TRAF1的功能提供了线索.
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| 关 键 词： | NF-κB 基因 转录 肿瘤坏死因子-alpha |
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