人骨形成蛋白2和7成熟肽编码区基因克隆和真核表达载体的构建

[摘要] 目的 克隆和构建人骨形成蛋白2和人骨形成蛋白7成熟肽真核表达载体。方法 采用Trizol法从人骨肉瘤细胞中提取制备总RNA，利用RT-PCR、PCR转录、扩增BMP-2和BMP-7获得成熟肽基因，与真核表达载体pcDNA3.1(+)连接，构建真核表达重组子pcDNA3.1(+)/BMP-2MP和pcDNA3.1(+)/BMP-7MP。结果 总RNA提取液电泳可见在28S、18S和5S处出现明显的条带，PCR和酶切可在439bp和364bp出现条带，阳性克隆测序结果与Genebank中登录的序列一致。结论 成功克隆出人BMP-2MP和BMP-7MP基因，成熟肽基因已与pcDNA3.1(+)连接，成功构建其真核表达重组子pcDNA3.1/BMP-2MP和pcDNA3.1/BMP-7MP，为进一步研究BMP-2、BMP-7的功能及其成熟肽基因在骨髓间充质细胞(hMSCs)中表达以及在骨组织工程中的应用研究奠定了基础。

Cloning of Human BMP-2 and -7 Gene of mature peptide and Constructing of Eucaryotic Expression Plasmid