褪黑素受体mRNA检测方法的建立 |
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引用本文: | 何金,陆祖谦,刘会敏,刘志民.褪黑素受体mRNA检测方法的建立[J].第二军医大学学报,2001,22(11):1100-1100. |
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作者姓名: | 何金 陆祖谦 刘会敏 刘志民 |
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作者单位: | 1. 第二军医大学长征医院病理科, 2. 长征医院内分泌科 |
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摘 要: | 1 方法介绍1.1 组织标本制备 待检新鲜组织标本立即用 4%多聚甲醇 DEPC液固定 ,梯度乙醇脱水、二甲苯透明、石蜡包埋组织 ,置4℃冰箱贮存待检测。1.2 原位杂交检测方法1.2 .1 载玻片的预处理 载玻片盐酸浸泡 2 4h,流水洗净 ,蒸馏水洗后晾干 ,用 95 %乙醇浸泡 30 min,180℃烘干过夜 ,室温冷却 ,涂切片粘合剂。1.2 .2 探针制备 L B培养基各 5 0 ml,分别加入 mt1 、和 MT2 受体探针大肠杆菌菌株甘油保存液各 15 μl,37℃ ,2 0 0 r/ m in培养过夜。 10 0 0 0× g离心 5 min回收大肠杆菌 ,按照华舜公司质粒抽提纯化试剂盒说明抽提纯…
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关 键 词: | 褪黑素受体 mRNA检测 原位杂交方法 |
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