| 白细胞介素12基因修饰大鼠胶质瘤9L/rIL-12细胞的建立 |
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| 引用本文： | 林健,戴学军,王伟民,张宏斌,武婕,冼江,詹纯列,王捷. 白细胞介素12基因修饰大鼠胶质瘤9L/rIL-12细胞的建立[J]. 中国微侵袭神经外科杂志, 2007, 12(7): 321-324 |
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| 作者姓名： | 林健 戴学军 王伟民 张宏斌 武婕 冼江 詹纯列 王捷 |
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| 作者单位： | 1. 中国人民解放军广州军区广州总医院神经外科,广东,广州,510010
2. 中国人民解放军广州军区广州总医院医学实验科,广东,广州,510010 |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金;军队医学科研项目 |
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| 摘 要： | 目的 构建大鼠白细胞介素12（rIL-12）基因真核表达载体质粒,建立rIL-12基因修饰并稳定表达的大鼠胶质瘤9L/rIL-12细胞.方法 用Trizol提取大鼠腹腔巨噬细胞总RNA,RT-PCR方法分别获取rp40和rp35 cDNA,依次克隆人pcDNA3.1（-）/mycHis A质粒中,以IRES连接双亚基,构建成双顺反子真核表达载体质粒pcDNA3.1/rIL-12.将构建的重组质粒转染大鼠胶质瘤9L细胞,G418筛选单克隆细胞株,ELISA法检测其培养上清rIL-12（p70）蛋白含量,同时抽提细胞RNA,RT-pCR方法检测rp40、rp35基因在9L/rIL-12细胞中的表达.结果 所得rp40cDNA序列与Gene Bank NM022611及AF133197、rp35cDNA序列与Gene Bank NM053390及AF177031均一致,构建的质粒经PCR、酶切及测序鉴定正确.质粒转染9L细胞后,获得2个rIL-12基因稳定、高效表达的9L/rIL-12单克隆细胞株,其培养上清rIL-12（p70）蛋白含量分别为139.0、162.1 pg/ml,RT-PCR结果显示细胞中rIL-12基因表达呈阳性.结论 成功构建了rIL-12真核表达质粒pcDNA3.1/rIL-12,并建立了9L/rIL-12细胞株,为rIL-12基因修饰的胶质瘤疫苗研究打下了基础.
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| 关 键 词： | 大鼠 白细胞介索12 质粒 神经胶质瘤 9L细胞 |
| 文章编号： | 1009-122X（2007）07-0321-04 |
| 修稿时间： | 2007-04-192007-06-07 |
Establishment of rat glioma 9L/rIL-12 cells genetically modified by interleukin 12 genes |
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| LIN Jian, DAI Xuejun, WANG Weimin, et al. Establishment of rat glioma 9L/rIL-12 cells genetically modified by interleukin 12 genes[J]. Chinese Journal of Minimally Invasive Neurosurgery, 2007, 12(7): 321-324 |
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| Authors: | LIN Jian DAI Xuejun WANG Weimin et al |
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| Affiliation: | Department of Neurosurgery, Guangzhou General Hospital of Guangzhou Military Command, Guangzhou 510010, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | rats interleukin-12 plasmids glioma 9L cell |
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