| Y盒结合蛋白1单克隆抗体的研制、表位测定及其免疫学应用 |
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| 引用本文： | 李朴,史静,成凤,梁勤东,匡文斌,王秦,董晋豫,涂植光.Y盒结合蛋白1单克隆抗体的研制、表位测定及其免疫学应用[J].海峡预防医学杂志,2012,32(3). |
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| 作者姓名： | 李朴 史静 成凤 梁勤东 匡文斌 王秦 董晋豫 涂植光 |
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| 作者单位： | 1. 重庆医科大学临床检验诊断学教育部重点实验室 重庆400016
2. 重庆医科大学附属第一医院检验科 重庆400016 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 建立稳定分泌抗人Y盒结合蛋白1单克隆抗体(anti-YB-1 mAb)的杂交瘤细胞株,鉴定其表位与免疫学应用.将重组YB-1蛋白免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合.经ELISA法筛选鉴定、定株后采用腹水诱生法制备anti-YB-1 mAb;Protein G亲和层析法纯化mAb,ELISA法测定mAb效价、亚型及相对亲和力.采用抗原表位预测法鉴定anti-YB-1 mAb识别表位所在区域.Westem blot和免疫组化鉴定mAb识别内源性YB-1的特异性.经筛选鉴定获得2株稳定分泌anti-YB-1 mAb的杂交瘤细胞(1-D9,3-E8)；腹水抗体效价均≥1×10-6,亚型均为IgG1；1-D9和3-E8单抗识别表位分别位于(134-160aa)与(266-303aa)肽段.Western blot、免疫组化结果证实anti-YB-1 mAb能特异性识别内源性YB-1.该研究为YB-1免疫学定性、定量检测方法的建立、肿瘤靶向抗体治疗及进一步探讨YB-1的生物学功能奠定了基础.
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| 关 键 词： | YB-1 单克隆抗体 抗原表位 免疫学检测 |
Preparation, Characterization and Application of Monoclonal Antibodies Against Human Y box-binding Protein 1 |
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| LI Pu
,
SHI Jing
,
CHENG Fen
,
HANG Qin-dong
,
KUANG Wen-bin
,
WANG Qin
,
DONG Jin-yu
,
TU Zhi-guang.Preparation, Characterization and Application of Monoclonal Antibodies Against Human Y box-binding Protein 1[J].Strait Journal of Preventive Medicine,2012,32(3). |
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| Authors: | LI Pu SHI Jing CHENG Fen HANG Qin-dong KUANG Wen-bin WANG Qin DONG Jin-yu TU Zhi-guang |
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