榄香烯吗素与阿霉素联合应用对CEM／ADM细胞生长的影响

应用台盼蓝排染法,Ｗｉｒｇｈｔ－Ｇｉｅｍｓａ混合染色法,Ｈｏｅｃｈｓｔ３３４２荧光染色法及碘化丙啶（Ｐｒｏｐｉｄｉｕｍ ｉｏｄｉｄｅ,ＰＩ）与Ｈｏｅｃｈｓｔ－３３４２共染计数坏死细胞的ＰＩ阳性率测定法,研究β－榄香烯吗素（ＰＩＣ－ＢＥ）及其与阿霉素（ＡＤＭ）联合应用对ＣＥＭ．ＡＤＭ细胞生长的影响。结果显示：①ＰＩＣ－ＢＥ能够显著抑制ＣＥＭ．ＡＤＭ细胞的生长,并诱导该细胞凋亡,其作用强度在一定范围内     

靶序列三链DNA对质粒pBR322的Amp^r基因表达的抑制

利用ＣａＣｌ２法成功地将寡核苷酸导入大肠杆菌ＪＭ１０９细胞。质粒ｐＢＲ３２２转化结果表明,寡革酸片段５’－ＡＧＣＧＧＧＡＡＴＡＡＧＧＧＡＡ－３’在转化前（或后）与靶序列结合均能抑制β－内酰胺酶基因的表达,细菌生长受到抑制。体外聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明,该片段能与靶序列形成三链结构。这些结果表明多聚嘌呤寡核苷酸是通过与靶序列形成三链ＤＮＡ来抑制β－内酰胺酶基因的表达。     

Immunosuppressive activity on the murine immune responses of glycyrol from Glycyrrhiza uralensis via inhibition of calcineurin activity

Context: Calcineurin (CN), a unique protein phosphatase, plays an important role in immune regulation. Our laboratory has established an effective molecular drug-screening model based on CN activity.

Objective: Our aim is to search for an effective immunosuppressant from Glycyrrhiza uralensis (Leguminosae).

Materials and methods: As guided by CN inhibitory test, an active compound was purified and identified as glycyrol. Immunosuppressive activity of glycyrol in vitro was assayed by T lymphocytes proliferation and mixed lymphocyte reaction (MLR). In addition, delayed-type hypersensitivity reaction (DTH) and skin allograft test in vivo were also carried out. Further, we have investigated the effect of glycyrol on phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA)/ionomycin (Io)-stimulated IL-2 expression in Jurkat cells.

Results: The enzymatic assay showed glycyrol (IC₅₀?=?84.6?μM) inhibited calcineurin activity in a dose-dependent manner. Glycyrol, at the non-cytotoxic concentration, significantly inhibited proliferation of murine spleen T lymphocytes induced by Concanavalin A (Con A) and mixed lymphocyte reaction (MLR) in vitro. In addition, mice treated with glycyrol had shown the dose-dependent decrease in delayed type hypersensitivity (DTH) and prolonged the graft survival by 59% compared to the control group (*p?<?0.05). RT-PCR showed glycyrol suppressed IL-2 production in a concentration-dependent manner.

Discussion and conclusion: Our results show the immunosuppressive activity of glycyrol and this activity should be due to its inhibitory effect on CN activity, thereby suppressing IL-2 production and regulating T lymphocytes. Thus, glycyrol could be a candidate for development as a novel immunomodulatory drug.     

茶多酚有效成分对淋巴细胞增殖的抑制和抗氧化作用

研究表明,茶多酚具有很强的消除有害自由基、抗衰老等多种药理作用[1],茶多酚临床治疗白癜风具有较明显的效果,但其各类组分在临床治疗白癜风所发挥的作用还未见报道。1材料与方法1.1动物C57BL/6(B6)小鼠,体质量(20±2)g,由浙江中医药大学实验动物中心提供。1.2主要药品与试剂H2O2、EGCG均购自美国Sigma公     

脊髓损伤中钙蛋白酶的作用

脊髓损伤后可发生不同程度的神经坏死和组织变性,导致脊髓神经功能障碍。脊髓继发性损伤过程中钙蛋白酶(calpain)在脊髓损伤中发挥重要作用。Calpain为一Ca2+依赖性半胱氨酸蛋白酶,该酶包括2种同分异构体μ-calpain和m-calpain,分别由微摩尔和毫摩尔浓度的Ca2+激活。细胞内calpain以非活性酶原形式存在,细胞内游离Ca2+浓度升高后,calpain酶原被活化,引起calpain活化后一系列分子生物化学的改变,在脊髓引起细胞凋亡或损伤。应用calpain的特异性抑制剂进行干预后,脊髓calpain的表达和活性受到抑制,脊髓的病理改变和细胞凋亡得到缓解,神经功能得以保护。该文将calpain在脊髓损伤发展过程中的作用作一综述。     

miR-3195对人喉癌Hep-2细胞增殖的抑制作用及其机制

目的：探讨miR-3195对喉癌Hep2细胞增殖的影响及其分子机制。方法：选取2008年1月至2012年8月期间在南华大学教学医院郴州市第一人民医院耳鼻喉科收治的29例喉癌患者的喉癌组织及其相应的癌旁组织标本,采用qPCR检测miR-3195在喉癌和癌旁组织中的表达;构建miR-3195在喉癌Hep-2细胞中稳定高表达的细胞株,采用MTT法观察miR-3195稳定高表达组和对照组的增殖情况;建立裸鼠移植瘤模型,观察miR-3195稳定高表达的人喉癌细胞株Hep-2在裸鼠体内增殖的情况。利用生物信息学预测 miR-3195 的靶基因,构建 TBX1 3''UTR 的荧光素酶载体,双荧光素酶检测系统检测其荧光素酶活性;Western blotting检测稳定高表达miR-3195组和对照组细胞株的TBX1蛋白表达水平。结果：miR-3195在喉癌组织中的表达明显低于癌旁组织（P<0.01）;miR-3195上调可抑制Hep-2细胞的增殖（P<0.01）,且可明显抑制裸鼠移植瘤瘤体的生长（P<0.05）;双荧光素酶报告基因检测结果表明miR-3195可能与TBX1靶向结合（P<0.05）,同时Western blotting法验证了miR-3195能够抑制TBX1蛋白的表达（P<0.05）。结论：miR-3195对Hep2细胞有明显的增殖抑制作用,其分子机制可能与负性调控TBX1的表达有关。     

经辐照氟银处理脐静脉的抑菌效果观察

目的观察经辐照氟银处理脐静脉的抑菌效果。方法脐静脉随机分为3组:冷冻脐静脉组(Ⅰ组)、冻干辐照脐静脉组(Ⅱ组)、辐照氟银脐静脉组(Ⅲ组);对辐照氟银组脐静脉进行含银量测量,细菌培养及抑菌实验并与其他组进行比较。结果细菌培养各组均无细菌生长;辐照氟银脐静脉组含银(376.5±23.0)μg/g;具有抑菌作用,与其他各组相比,差别显著(P<0.01)。结论辐照氟银脐静脉具有抗菌作用,可用来预防移植后感染导致的手术失败。     

他汀类药物在肾脏疾病中抗炎作用的研究现状

他汀类药物即3-羟基3-甲基戊二酸单酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制剂.近年的研究发现他汀类药物不但具有降血脂作用,同时还具有一定的肾保护作用.这种作用并非完全由他汀类药物的降脂作用引起,这类药物还具有非降脂相关的肾保护作用,抑制炎症过程是直接肾脏保护作用的重要机制之一.本文就他汀类药物在肾脏疾病中的抗炎作用的研究新进展作一综述.     

白细胞介素-18对荷卵巢癌裸鼠的肿瘤生长抑制作用

目的:研究白细胞介素-18(IL-18)对荷卵巢癌裸鼠的肿瘤生长抑制作用,并探讨治疗前后肿瘤的病理改变。方法:采用人卵巢癌细胞株HO-8910建立24只裸鼠卵巢癌皮下移植瘤模型,种植后1周随机分4组,每组6只,分别用不同浓度的IL-18进行腹腔注射治疗,并于种植后第4周处死裸鼠,测量瘤重,计算抑瘤率,绘制肿瘤生长曲线,计算镜下肿瘤细胞平均坏死率。结果:IL-18剂量为0μg/100μL、0.25μg/100μL、0.5μg/100μL和1μg/100μL时,瘤体重量分别为:(0.600 8±0.189 5)g、(0.247 8±0.047 3)g、(0.223 0±0.112 0)g和(0.169 0±0.112 1)g,抑瘤率分别为58.76%、62.88%和71.87%,治疗后2周,平均相对体积分别为12.028 9±1.575 2、6.831 5±2.514 8、5.502 9±1.443 6和4.126 4±1.881 2,光镜下可见治疗组中肿瘤细胞呈片状、条带状坏死,肿瘤组织细胞核碎裂、溶解,部分坏死组织呈均质红染无结构区域,镜下肿瘤细胞的平均坏死率分别为0.120 0±0.059 8、0.385 3±0.137 1、0.435 6±0.121 1和0.554 8±0.117 8。与对照组相比,卵巢癌生长的抑制作用和肿瘤细胞坏死率有显著性差异(P<0.01),且随着IL-18剂量的增加,抑制作用越明显。结论:细胞因子IL-18能通过引起更多卵巢癌肿瘤细胞的坏死,从而有效地抑制卵巢癌的生长。     

截哮口服液对呼吸道合胞病毒的抑制作用研究

目的：观察截哮口服液对呼吸道合胞病毒复制的抑制作用.方法：将呼吸道合胞病毒接种于Hela细胞单层增殖,测定截哮口服液对细胞最低无毒浓度.取不同浓度的药液加入病毒,观察在细胞单层上的空斑形成以判定病毒产量.结果：截哮口服液使呼吸道合胞病毒产量减少,药物浓度的高低与病毒产量的高低呈明显的负相关（rs=-1,P＜0.05）;其对RSV有直接灭活作用,且能影响病毒的吸附与吸附后的复制过程.结论：截哮口服液在Hela细胞中对呼吸道合胞病毒的复制有抑制作用.