SHH/BMP4信号在肛门直肠畸形肠神经系统发育中的作用研究

目的研究不同类型先天性肛门直肠畸形(ARM)胎鼠直肠末端肠神经系统(ENS)发育程度,探讨SHH/BMP4在其发育过程中的作用。方法利用全反式维甲酸(ATRA)诱导大鼠产生肛门直肠畸形胚胎,孕20d剖宫取胎,应用免疫组织化学方法检测对照组和高、低位ARM组直肠末端神经元特异性烯醇化酶(NSE)及骨形态发生蛋白4(BMP4)的表达;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组直肠末端SHH/BMP4mRNA的表达差异。结果对照组肠壁肌间及黏膜下神经丛可见NSE和BMP4抗体染色阳性细胞,ARM高位组与ARM低位组、对照组比较,阳性细胞的平均光密度(MOD)值明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);ARM低位组和对照组相比,阳性细胞的MOD值略降低,差异有统计学意义(P<0.05)。在ARM直肠末端SHH和BMP4基因表达呈正相关(P<0.01,r=0.884),对照组与ARM组相比较,BMP4和SHHmRNA的表达水平明显高于ARM组,差异均有统计学意义(P<0.05),不同ARM组之间比较,高位ARM组的表达水平显著减弱低于低位ARM组,差异也有统计学意义(P<0.05)。结论①不同类型ARM胎鼠直肠末端ENS发育程度存在差异,不仅与闭锁的位置密切相关,还可能与BMP4基因的表达水平有关。②过量的ATRA可能抑制了SHH/BMP4信号表达,干扰了直肠ENS的正常发育。     

全反式维甲酸减轻大鼠移植心脏血管病变及纤维化

目的 探讨全反式维甲酸(atRA)对大鼠移植心脏血管病变(CAV)及心肌纤维化的影响及可能机制.方法 以近交系Wistar大鼠为供者,SD大鼠为受者,进行异位心脏移植,一组受者术后接受环孢素A(CsA,10 nag·kg-1·d-1)皮下注射,同时以atRA(10 mg·kg-1·d-1)灌胃(atRA治疗组),另一组受者术后接受CsA皮下注射(慢性排斥组).术后60 d,取移植心脏,行Masson染色观察心肌组织纤维化程度,Van Gieson染色分析血管狭窄程度,免疫组织化学染色(sP法)观察心肌组织中CD68+细胞浸润情况,逆转录聚合酶链反应分析心肌组织中血小板生长因子(PDGF)A mRNA的相对含量.结果 慢性排斥组和atRA治疗组心肌纤维化指数分别为64.0±11.9和34.7±6.3,慢性排斥组纤维化指数明显高于atRA治疗组(P<0.01).慢性排斥组的血管狭窄指数为62.9±17.2,atRA治疗组为40.1±8.2,二者比较,差异有统计学意义(P<0.01).慢性排斥组CD68+细胞数为(32.1±9.3)个,atRA治疗组CD68+细胞数为(17.6±4.2)个,慢性排斥组明显高于atRA治疗组(P<0.01).慢性排斥组PDGF-AmRNA的相对含量为0.94±0.11,atRA治疗组为0.46±0.08,慢性排斥组明显高于atRA治疗组(P<0.01).结论 atRA能减轻大鼠心脏移植后的CAV及心肌纤维化,机制可能与其抑制CD68+细胞浸润及PDGF A mRNA表达有关.     

全反式维甲酸与肝脏疾病的关系及其分子机制研究进展

全反式维甲酸(ATRA)也叫做视黄酸、维生素甲酸,是维生素A主要的生物活性形式,迄今为止ATRA在急性早幼粒细胞白血病(APL)中的应用已超过20年,并仍为APL治疗的标准方案.随着研究的不断深入,ATRA被广泛应用于甲状腺癌、肺癌、胃癌、卡波西氏肉瘤、卵巢癌、膀胱癌、神经母细胞瘤,等肿瘤的治疗中,且正逐步延伸至更多肿...     

镓盐对维甲酸致大鼠骨质疏松模型影响的实验研究

目的 研究镓盐对维甲酸致骨质疏松大鼠骨代谢的影响,为镓盐治疗骨质疏松提供实验依据。方法 用维甲酸建立大鼠骨质疏松模型,并通过氯化镓灌胃给药治疗两个月,应用生化、病理等方法研究其对反映骨质疏松相关指标的影响。结果 维甲酸可导致大鼠骨结构改变,密度降低,骨有基质含量下降,血清抗酒石酸酸性磷酸酶（TPAP）上升。应用氯化镓后,可增加骨密度,增加骨皮质厚度和骨小梁百分比,降低TRAP活性和碱性磷酸酶（AKP）活性,从而降低骨转换率。结论 镓盐是一种有效的降低骨转换率的药物。     

复方维甲酸软膏联合白芍总苷胶囊治疗斑纹型口腔扁平苔藓半年疗效观察

目的 观察复方维甲酸软膏与白芍总苷胶囊联合应用治疗斑纹型口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)的临床疗效.方法 临床纳入120例OLP患者,采用随机数法随机均分为3组,试验组局部使用复方维甲酸软膏及口服白芍总苷胶囊;对照1组局部使用复方维甲酸软膏;对照2组口服白芍总苷胶囊.3个月及6个月时观察临床疗效及复发情况.试验过程中未按时复诊或出现严重不良反应的患者不纳入统计分析.结果 试验结束时共有107例患者纳入统计分析,3组年龄及男女比例差异均无统计学意义.用药3个月时试验组治疗总有效率为78％(29/37),显著优于对照2组[56％(19/34),x2=4.094,P=0.043],但与对照1组[75％ (27/36)]相比差异无统计学意义(x2 =0.117,P=0.733);用药6个月时试验组总有效率为86％(32/37),显著优于对照1组[64％(23/36),x2=4.303,P=0.038]及对照2组[62％(21/34),x2=5.722,P=0.017],3组的复发率差异均无统计学意义.结论 联合应用复方维甲酸软膏与白芍总苷胶囊可有效控制斑纹型OLP的临床病损及不适症状.     

HISTOLOGICAL EVALUATION OF THE EFFECT OF 0.05% TRETINOIN IN THE TREATMENT OF PHOTO DAMAGED SKIN

In a randomised double-blind vehicle controlled trial of 0.05% tretinoin cream in the treatment of photodamaged skin, the histological results of paired biopsies from 28 individuals who applied tretinoin for 26 weeks are compared with 28 paired biopsies from a control group applying vehicle alone. There was a significant increase in epidermal thickness in the tretinoin-treated group (P.001). Epidermal atrophy was reversed in ten patients applying tretinoin cream. Baseline biopsies obtained from participants in Melbourne, Victoria (38° latitude) showed significantly less elastosis than those in Sydney (34° latitude) and Newcastle in N.S.W., although the two groups did not show significant differences in age or sex, and the differences could not be correlated with skin type. Tretinoin cream had no effect on the degree of solar elastosis after 26 weeks application. Tretinoin cream appears effective in reversing epidermal atrophy and clinically diminishes fine wrinkling, mottled hyperpigmentation and skin roughness. Tretinoin cream may not offer a solution to the gross solar damage seen in the Australian population who have marked solar elastosis as a principal, clinical and histologie finding. However it is possible that dermal repair and reversal of solar elastosis may require topical application of tretinoin cream for a longer period than the six months used in this trial.     

脊柱裂动物模型制作与胚胎发生机制探讨

目的 建立大鼠隐性脊柱裂和显性脊柱裂畸形动物模型，观察丙戊酸钠和维甲酸诱导大鼠脊柱裂畸形的特点，初步探讨脊柱裂畸形的发生机制。方法 雌性Wistar孕鼠随机分成组：对照组，实验组分成丙戊酸钠三个不同剂量组和维甲酸组。对照组孕鼠不予任何处置，20d胎鼠脊柱染色标本采集图像经计算机软件显微图像分析，测量出每个椎体椎弓两个软骨端距离，目的确定软骨端距离参考值。雌性Wistar大鼠，在确定怀孕的第9d9：00、16：00，按体重计算剂量后于后肢皮下注射20％丙戊酸钠溶液。妊娠第20d剖宫，检查胚胎外观，判定是否有外观可见畸形，然后取脊柱进行骨和软骨双重染色，染色后标本采集图像测量出每个椎体椎弓两个软骨端距离。参照正常胎鼠确定的参考值判定隐性脊柱裂。Wistar大鼠确定怀孕的第10d9：00，胃管灌入维甲酸矿物油混悬液135mg／kg(40mg／m1)，妊娠第20d剖宫，检查胚胎外观判定显性脊柱裂畸形发生情况并记录。结果 丙戊酸钠诱导隐性脊柱裂畸形随药物剂量加大，畸形发生率升高，丙戊酸钠剂量400mg／kg、450mg／kg、500rng／kg~导畸形发生率分别是80％、93％、100％，腰椎对丙戊酸钠的致畸作用最敏感；丙戊酸钠还可以导致头端神经管畸形，未观察到显性脊柱裂的发生。维甲酸135rng／kg诱导胎鼠显性脊柱裂的发生率52．3％，畸形都发生在腰骶段，其他畸形的总发生率高达90．7％。结论 丙戊酸钠抑制软骨细胞增生，影响椎体的软骨发生使椎弓不能闭合导致胎鼠隐性脊柱裂的发生。腰椎对丙戊酸钠的致畸作用最敏感，隐性脊柱裂多发生在腰骶段。过量的维甲酸直接影响神经上皮细胞、神经嵴细胞、原基器官间质细胞的生化过程和尾端未分阶段的中胚层，导致胚胎尾端发育不良综合症复杂畸形出现。丙戊酸钠和维甲酸通过不同机制导致畸形的发生。     

全反式维甲酸对大鼠残余肾功能的保护作用及其机制

目的：研究全反式维甲酸(atRA)能否延缓大鼠残余肾功能的丧失，并探讨其可能机制。 方法： Wistar大鼠40只，采用5/6肾大部切除大鼠模型，分别给予5 mg·kg-1·d-1（A1组，n=8）、10 mg·kg-1·d-1（A2组，n=8）、20 mg·kg-1·d-1（A3组，n=8）的atRA灌胃，单纯肾大部切除非干预组（NX组，n=8）和假手术组（sham组，n=8）为对照。采用反相高效液相色谱检测大鼠血浆atRA浓度；肾脏病理切片采用PAS染色，计算肾小球硬化指数；应用免疫组化和Western blotting等方法观察转化生长因子β1（TGFβ1）在残余肾组织上的分布水平。 结果： 3个不同剂量的atRA组血药浓度高出NX和sham组10倍以上，并呈现出同给药剂量相吻合的浓度梯度。肾小球硬化评分结果表明，atRA 干预的大鼠肾小球硬化明显轻于NX组，其中A3组硬化程度明显轻于A1组和A2组，P<0.05；A1组和A2组无显著差异，sham组无硬化表现； NX组肾小球TGFβ1表达量最多，atRA干预的3个组明显少于sham组，但A1、A2、A3组间无差异。 结论： atRA能减轻5/6肾大部切除大鼠残余肾硬化，可能是通过抑制TGFβ1起作用。     

乌苯美司下调c-myc表达与其增强全反式维甲酸诱导NB4细胞

目的： 了解氨肽酶抑制剂乌苯美司（bestatin）能否增强全反式维甲酸（ATRA）对NB4细胞的诱导分化作用，及此过程中NB4细胞c-myc mRNA表达水平的改变。 方法： MTT法检测药物抑制细胞生长的作用。流式细胞仪测细胞表面分化抗原CD11b及四氮唑蓝（NBT）还原实验检测NB4细胞的分化。RT-PCR检测细胞c-myc mRNA表达水平。 结果： 50 mg/L、75 mg/L、100 mg/L乌苯美司与10 nmoL/L ATRA联合处理72 h，均能明显增强NB4细胞的NBT还原能力，与10 nmoL/L ATRA组差异显著（P<0.05，P<0.01）。从48 h到96 h，100 mg/L乌苯美司时间依赖性地增强10 nmoL/L ATRA诱导NB4细胞的NBT还原能力，与相应时点10 nmoL/L ATRA组差异明显（P<0.01）。100 mg/L乌苯美司与10 nmoL/L ATRA联合应用72 h，NB4细胞CD11b表达率明显高于10 nmoL/L ATRA组（P<0.01）。50 mg/L、75 mg/L、100 mg/L乌苯美司与10 nmoL/L ATRA联合处理4 h，NB4细胞c-myc mRNA表达水平明显低于单用ATRA组（P<0.05，P<0.01）；药物联合应用各组NB4细胞的c-myc mRNA表达水平与NBT还原能力之间呈负相关（r=-0.917,P<0.05）。 结论： 乌苯美司可能通过下调NB4细胞c-myc mRNA的表达，从而增强ATRA诱导NB4细胞分化的作用。