人鼻咽癌DNA的转化活性

本文以鼻咽癌活检组织及CNE_1细胞株DNA为实验材料,用磷酸钙沉淀法转染了NIH/3T3 小鼠纤维母细胞、Rat-1 大鼠纤维母细胞和JB_6Cl_(41)小鼠上皮细胞,并以软琼脂培养法检测了转染后的MIH/3T3 细胞集落生成情况。实验表明:鼻咽癌及其CNE_1细胞DNA均可以诱发NIH/3T3细胞、Rat-1细胞转化,也可使NIH/3T3细胞获得在软琼脂上生长的能力,但不能使JB_6Cl_(41)细胞转化。本文还讨论了鼻咽癌及其CNE_1细胞DNA诱发的受体细胞转化与EB病毒感染间的关系,并对鼻咽癌转化基因的性质作了初步估计。     

p53基因和血管生成抑制素基因共转染对胃癌SGC7901细胞凋亡的影响

目的:探讨血管生成抑制素(angiostatin,AS)基因和p53基因共转染人胃癌细胞株SG7901后对其凋亡的影响. 方法:分别将p53、AS基因以及p53联合AS基因转染SG7901细胞;采用RT-PCR法检测转染后SG7901细胞中目的基因的表达;通过细胞集落形成实验和MTT法观察不同转染对细胞的生长抑制作用;FCM法检测p53基因和AS基因对SGC7901凋亡的影响.结果:经p53或AS基因转染后,SG7901细胞的集落数量及大小均有不同程度的降低;且p53和AS基因具有协同作用,以共转染组降低最为明显,差异有统计学意义(P<0.05).MTT法检测结果表明,共转染组细胞的生长情况较其他2组单基因转染的细胞更为缓慢(P<0.05).共转染组凋亡率较AS基因单转染组、p53基因单转染组以及空载体转染组均高,差异有统计学意义(P<0.05).结论:p53和AS基因均能诱导胃癌细胞SG7901的凋亡,且两者具有协同作用.     

PTEN磷酸酶活性对乳腺癌细胞ZR-75-1迁移能力的影响

目的:探求PTEN蛋白的磷酸酶活性对乳腺癌细胞ZR-75-1转移能力的影响。方法:采用脂质体介导法分别将野生型PTEN质粒(wt-PTEN)、磷酸酶失活的PTEN质粒(G129R-PTEN)和只具有蛋白磷酸酶活性的PTEN质粒(G129E-PTEN)转染PTEN基因缺失的人乳腺癌细胞株ZR-75-1,Western印迹法检测PTEN蛋白及P397-FAK的表达水平,体外细胞划痕实验观察PTEN磷酸酶活性对ZR-75-1细胞迁移能力的影响,细胞基质黏附试验和人工重组基底膜侵袭试验测定PTEN质粒转染和未转染的ZR-75-1细胞的黏附抑制率和侵袭抑制率,免疫组化法检测MMP-2的水平。结果:wt-PTEN、G129R-PTEN及G129E-PTEN3种质粒均成功转染ZR-75-1细胞并有PTEN蛋白的表达,其中wt-PTEN、G129E-PTEN均能抑制ZR-75-1细胞迁移;wt-PTEN和G129E-PTEN转染细胞之间的黏附抑制率和侵袭抑制率或侵袭细胞相对数均无显著性差异,但与G129R-PTEN转染的和未经转染的ZR-75-1细胞相比有显著性差异(P<0.01)。wt-PTEN和G129E-PTEN质粒转染的ZR-75-1细胞其P397-FAK水平均显著低于G129R-PTEN质粒转染的ZR-75-1细胞;wt-PTEN与G129E-PTEN质粒转染的ZR-75-1细胞MMP-2水平对比于G129R-PTEN质粒转染的和未经质粒转染的ZR-75-1细胞有显著性差异(P<0.01)。结论:具有双特异磷酸酶活性的野生型PTEN基因和只具蛋白磷酸酶活性的PTEN基因均能抑制乳腺癌细胞ZR-75-1的迁移,而磷酸酶失活的PTEN基因则无此作用。