双氢青蒿素的抗肿瘤作用机制

双氢青蒿素是青蒿的活性成分之一,可通过与铁离子形成自由基杀伤肿瘤细胞、诱导细胞凋亡、抗肿瘤血管生成、抑制肿瘤侵袭转移、逆转多药耐药、影响细胞内Ca2浓度、调控细胞周期、调节细胞自噬和免疫系统等方式参与抗肿瘤过程,是潜在可利用的抗肿瘤新药.     

DHA通过抑制PI3K通路和GLUT2表达而诱导NSCLC细胞毒性

目的:研究二氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)诱导NSCLC细胞毒性的分子机制。方法:将不同浓度的DHA作用NSCLC细胞系A549和NCI-H1650细胞不同时间,运用MTT法、克隆形成实验、Annexin V染色和流式细胞术测定DHA对细胞活力、克隆形成能力和细胞凋亡的影响;同时测定DHA对细胞中葡萄糖水平、ATP和乳酸含量的影响;Western blot检测PI3K通路活性和GLUT2表达变化;通过细胞转染实现葡萄糖转运体2(GLUT2)和Rheb在A549和NCI-H1650细胞中高表达,测定和分析DHA作用下细胞活力、细胞凋亡、葡萄糖水平、ATP含量和PI3K通路活性的变化;分析葡萄糖缺乏对DHA诱导NSCLC细胞毒性的影响。结果:与对照组比较,DHA显著抑制A549和NCI-H1650细胞活力和克隆形成能力以及诱导细胞凋亡,同时降低ATP和乳酸含量以及抑制细胞对葡萄糖的摄取,具有时间和剂量依赖效应。Western blot结果显示,DHA能抑制PI3K通路活性和GLUT2的表达。上调GLUT2的表达和激活PI3K通路能减弱DHA对NSCLC细胞的毒性作用;葡萄糖缺乏能增强DHA对NSCLC细胞的毒性;相反,高浓度葡萄糖则抑制DHA对NSCLC细胞的毒性。结论:DHA能抑制NSCLC细胞活力和克隆形成,诱导细胞凋亡,该作用是通过降低PI3K活性和GLUT2的表达进而抑制细胞糖酵解代谢实现的。     

双氢青蒿素对人骨肉瘤细胞TE85细胞内尿激酶型纤溶酶原激活物和色素上皮衍生因子表达的影响

目的 观察双氢青蒿素(DHA)对人骨肉瘤细胞活性、转移能力以及细胞中尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)和色素上皮衍生因子(PEDF)表达的影响.方法 将不同浓度的DHA(5、10、20、40、80 μmol/L)作用于体外培养的正常人成骨细胞和人骨肉瘤细胞TE85 12、24、48 h后,噻唑蓝(MTT)法测定DHA对细胞活性的影响,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测细胞中uPA和PEDF mRNA水平的表达,Westen blot法检测uPA和PEDF蛋白水平的表达.结果 DHA对人成骨细胞活性无明显影响(P＞0.05).DHA能够明显抑制人骨肉瘤细胞TE85的活性(P＜0.05).不同作用时间下DHA对人骨肉瘤细胞TE85的半数抑制浓度(IC50)分别为(12 h)=(41.66±0.53) μmol/L、IC50(24 h)=(32.28 ±0.27)μmol/L和IC50 (48 h)=(22.53±1.26) μmol/L.DHA能够明显减少人骨肉瘤细胞的迁移和细胞中uPA的表达水平,同时细胞中PEDF表达升高(P＜0.05).结论 DHA对正常人体骨组织无害,能够有效抑制骨肉瘤细胞生长和转移.     

蒿甲醚联合复方双氢青蒿素片治疗维和任务区非重症疟疾的疗效

目的 评价蒿甲醚联合复方双氢青蒿素片对刚果（金）维和任务区非重症疟疾的临床疗效。方法 回顾性分析刚果（金）中国二级医院2018年9月—2019年9月收治的维和任务区56例非重症疟疾患者的临床资料。患者明确诊断后即予“蒿甲醚注射液”肌肉注射治疗,2~3 d后改为口服复方双氢青蒿素片。定期观察患者症状、体温、疟原虫密度和药物不良反应等指标。按WHO抗疟药物临床疗效分类综合评价治疗方案的疗效。结果 56例非重症疟疾患者中,单纯恶性疟41例,混合疟15例。全部患者均获得完全临床原虫治疗成功,无严重不良反应发生。平均退热时间单纯恶性疟患者为（28.5±7.6） h,混合疟患者为（26.4±6.5） h;平均疟原虫清除时间单纯恶性疟患者为（31.5±8.3） h,混合疟患者为（30.4±6.7） h;平均疟原虫清除半衰期单纯恶性疟为（2.54±0.55） h,混合疟患者为（2.42±0.43） h。两组患者退热时间、疟原虫清除时间及清除半衰期差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 蒿甲醚联合复方双氢青蒿素片可有效治疗刚果（金）维和任务区非重症疟疾,且安全性良好。     

3种青蒿素衍生物对日本血吸虫吡喹酮抗性株童虫的体内作用效果观察

目的观察3种青蒿素衍生物双氢青蒿素、青蒿琥酯和蒿甲醚对日本血吸虫吡喹酮抗性株童虫的体内作用效果。方法以经11轮亚治疗剂量吡喹酮筛选的日本血吸虫为吡喹酮抗性株,以未暴露于吡喹酮的日本血吸虫作为吡喹酮敏感株,收集2虫株尾蚴感染小鼠,以300mg/kg双氢青蒿素、青蒿琥酯和蒿甲醚对感染后7~8 d童虫分别进行2次灌服用药(总剂量600 mg/kg),所有小鼠于感染后45 d解剖,收集小鼠体内成虫并计数,计算减虫率和减雌率。结果 300 mg/kg双氢青蒿素、蒿甲醚和青蒿琥酯2日疗法(总剂量600 mg/kg)对日本血吸虫吡喹酮敏感株7~8 d童虫的减虫率为69.8%~71.0%,减雌率为75.4%~79.8%;对日本血吸虫吡喹酮抗性株7~8 d童虫的减虫率为64.6%~66.1%,减雌率为69.3%~71.1%,差异均无统计学意义(均p0.05)。结论 日本血吸虫吡喹酮抗性株对青蒿素类衍生物双氢青蒿素、青蒿琥酯和蒿甲醚依然敏感,青蒿素衍生物与吡喹酮在日本血吸虫中不存在交叉抗药性。     

双氢青蒿素对卡氏肺孢子虫肺炎大鼠脾细胞凋亡的影响

目的　检测双氢青蒿素对卡氏肺孢子虫肺炎 (PCP)大鼠脾细胞凋亡的影响。方法　以醋酸可的松皮下注射Wis tar大鼠建立PCP动物模型 ,用 60mg/kg双氢青蒿素治疗实验大鼠 ,杀鼠取肺 ,用胶原酶消化法分离其脾细胞 ,用PI和TUNEL染色法检测其凋亡 ,同时设有感染组和正常大鼠对照组。结果　感染组和治疗组大鼠脾细胞凋亡率显著高于正常对照组 ,治疗组大鼠脾细胞凋亡率明显低于感染组。结论　卡氏肺孢子虫感染引起大鼠脾细胞发生凋亡 ,而双氢青蒿素治疗后PCP大鼠脾细胞凋亡降低     

二氢青蒿素对结肠癌细胞系SW480增殖凋亡的影响

目的:研究二氢青蒿素(DHA)对结肠癌细胞系SW480的增殖、凋亡的作用,初步探讨其机制。方法:采用结肠癌细胞SW480为研究对象,观测不同浓度和作用时间的DHA对细胞作用,MTT噻唑蓝比色法检测对细胞的增殖抑制作用,普通光镜观察细胞形态的变化,分别PI单染及Annexin-V双染法流式细胞术分析细胞周期分布和早期凋亡率的变化,免疫细胞化学检测凋亡抑制蛋白Survivin及效应蛋白Caspase-3表达情况。结果:DHA对SW480细胞增殖有抑制作用且呈浓度和时间依赖性。普通光镜下观察SW480呈典型的凋亡形态学改变。流式细胞仪检测细胞阻滞于G0/G1期,随药物剂量增大G0/G1期比例而逐渐增高,S期比例降低,Annexin-V双染法示早期细胞凋亡率呈明显浓度依赖性升高。免疫细胞化学结果示DHA作用48 h后Survivin表达减弱,而Caspase-3表达增强,呈剂量依赖关系。结论:DHA能显著抑制结肠癌细胞生长,影响细胞周期,诱导细胞凋亡,可能与抑制Survivin蛋白表达,促使Caspase-3表达增强有关。     

双氢青蒿素软膏处方筛选及体外渗透性研究

目的筛选双氢青蒿素（DHA）软膏处方及促渗剂。方法建立体外经皮渗透试验方法，采用高效液相色谱法对DHA样品的体外透皮速率进行考察，并以DHA累积透过量作体外透皮曲线，与Higuchi方程进行拟合。结果透皮速率以卡波普水溶性软膏及促渗剂为氮酮的最高，达到27．262μg／（h·cm），Higuchi方程线性较好。结论最佳处方为卡波普水溶性基质的DHA软膏处方，最佳促渗剂为氮酮。     

青蒿琥酯和二氢青蒿素抑癌作用机理研究

【目的】基因芯片检测青蒿琥酯和二氢青蒿素作用于K562细胞后的基因表达情况,从基因水平上探讨青蒿琥酯和二氢青蒿素抑制K562增殖的作用机制。【方法】K562细胞经不同浓度青蒿琥酯和二氢青蒿素处理,倒置光显微镜和荧光显微镜观察细胞形态变化,流式细胞仪检测细胞周期,MTT检测细胞生长抑制率。提取总RNA,逆转录成cDNA与基因芯片杂交,检测杂交结果。【结果】倒置光显微镜：细胞出现不同程度的皱缩,核分裂相减少,细胞密度下降,漂浮细胞增多。荧光显微镜：染色质高度浓缩、边缘化,凝聚成明亮的团块。流式细胞仪：G2期细胞的比例增加。MTT检测两种药物对K562细胞生长有抑制作用。扫描杂交信号,分析数据,青蒿琥酯组10条基因表达有差异,表达上调的基因有：p21、chk1,表达下调的基因有：cyclinB1、cyclinE1、E2F1、DNA—PK、hTERT、bcl-2、jnk、VEGF;二氢青蒿素组13条基因表达有差异,表达上调的基因有chk1,表达下调的基因有：PCNA、cyclinB1、cyclinD1、cyclinE1、cdk4、cdk2、E2F1、DNA—PK、DNA—TopoⅠ、Mcl-1、ink、VEGF。【结论】青蒿琥酯和二氢青蒿素抑制K562细胞增殖,作用机制与改变细胞周期某些调控物质的基因表达、诱导K562细胞凋亡等有关。     

国产双氢青蒿素哌喹片治疗非洲恶性疟疾疗效观察

目的观察国产双氢青蒿素哌喹片治疗恶性疟疾的临床效果。方法在援尼日尔共和国工作期间采用随机分组的方法,将224例恶性疟疾患者分为治疗组和对照组,各112例,治疗组口服双氢青蒿素哌喹片（商品名为科泰复,每片含双氢青蒿素40mg、磷酸哌喹320mg）,首剂2片,8、24和32h分别服2片,一个疗程共8片;对照组用双氢青蒿素片（商品名为科泰新,每片60mg）,每天1片,首剂加倍,7d为1疗程,共8片。观察和记录病例的临床症状和药物的副作用。结果治疗组和对照组的临床治愈率为100％和96．4％,两组差异无统计学意义（P〉0．05）;平均退热时间为（36．16±13．32）和（40．42±15．63）h,两组差异有统计学意义（P〈．05）,治疗组短于对照组;复燃率为3．6％和13．4％。两组差异有统计学意义（P〈0．01）,治疗组低于对照组。结论国产双氢青蒿素哌喹片治疗非洲恶性疟疾效果明显。临床治愈率高,退热时间缩短,复燃率降低,无明显毒副作用,可作为治疗普通型恶性疟疾的首选药物。