阴道毛滴虫Rab11鸟苷三磷酸酶eDNA克隆和序列分析

目的 近年研究表明Rab11鸟苷三磷酸酶在调节各种真核细胞的膜转运通道中发挥着重要作用。但是，对于原生动物毛滴虫膜转运系统的研究仍甚少。本研究旨在克隆和分析阴道毛滴虫Rabll鸟苷三磷酸酶基因，以便进一步探讨其功能。方法 使用SMART cDNA文库构建试剂盒构建阴道毛滴虫cDNA表达文库，用生物信息学进行TvRab11同源分析，鉴定TvRab11基因，用PCR方法扩增基因组DNA，TA克隆TvRab11 cDNA、测序及序列分析。结果 在分离出的cDNA克隆中发现一个Rab11鸟苷三磷酸酶同源基因。该cDNA序列长710bp，读码框含636bp，推测蛋白质序列具211个氨基酸。序列分析表明该基因系Rab11亚家族的同源基因，其推测肽链与拟南芥Rab11c的同源性晟高（一致性60％，相似性79％），与人类Rab11b次之（一致性58％，相似性78％）。该氨基酸序列拥有Rab鸟苷三磷酸酶家族的所有保守结构域和特异性Rab结构域（RabF1-5）。进化树分析也表明该基因系Rab11的同源基因。序列分析还显示该基因的基因组DNA序列与cDNA序列完全一致．提示该基因无内含子。结论分析表明该基因是阴道毛滴虫Rab11鸟苷三磷酸酶同源基因，其功能有待进一步研究。     

糖尿病肾病患者血清TRPM7、Sirtuin-1与钙磷代谢、颈动脉钙化的相关性

目的 探讨糖尿病肾病（DN）患者血清瞬时受体电位通道7(TRPM7)、沉默调节蛋白-1(Sirtuin-1)与钙磷代谢、颈动脉钙化的相关性。方法 选取2020年12月—2022年11月成都大学附属医院收治的97例DN患者作为DN组,另取同期在该院就诊的120例2型糖尿病患者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测血清TRPM7的表达,酶联免疫吸附试验检测血清Sirtuin-1水平。采用Pearson法分析DN患者血清TRPM7、Sirtuin-1水平与钙磷代谢的相关性,并通过多因素Logistic逐步回归模型分析DN患者颈动脉钙化的危险因素。结果 DN组血肌酐、尿素氮、血清TRPM7、血磷、颈动脉钙化率高于对照组（P <0.05）。DN组Sirtuin-1、血钙低于对照组（P <0.05）。Pearson相关性分析结果显示,DN患者血清TRPM7与血钙呈负相关（r=-0.247,P=0.000）,与血磷呈正相关（r=0.415,P=0.000）;DN患者血清Sirtuin-1与血钙呈正相关（r=0.367,P=0.000）,与血磷呈负相关（r=-0.505,P=0.00...     

Ras homolog gene family H (RhoH) deficiency induces psoriasis-like chronic dermatitis by promoting TH17 cell polarization

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人脑星形细胞瘤PTEN基因的突变

目的 探讨phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten (PTEN)基因突变在人星形细胞瘤发生和恶性进展中的作用。方法 应用聚合酶链反应－单链构象多态性结合银染技术检测星形细胞瘤PTEN基因第5外显子区域的突变情况。结果 10例正常脑组织和10例良性脑膜瘤均无点突变发生,62例星形细胞瘤中7例（11．29％）有点突变发生,并且点突变发生与星形细胞瘤病理分级明显相关（P＜0．05）,其中高恶性度星形细胞瘤（Ⅲ－Ⅳ级）突变率（18．91％）明显高于低恶性度（Ⅰ－Ⅱ级）星形细胞瘤（P＜0．05）。结论 PTEN基因突变与星形细胞瘤病理分级关系密切,属于星形细胞瘤恶性进展的后期事件。     

抑癌基因PTEN在口腔涎腺腺样囊性癌组织中的表达

目的　从蛋白水平研究抑癌基因 10号染色体缺失的磷酸酯酶及张力蛋白同源物 (PTEN ) ,在口腔涎腺腺样囊性癌中表达及其意义。方法　采用免疫组织化学方法检测 3 4例腺样囊性癌 (其中筛孔型 14例 ,管状型 11例 ,实体型 9例 )组织中PTEN的表达。结果　 3 4例腺样囊性癌PTEN蛋白表达阴性率为 17.6% ( 6/ 3 4) ,筛孔型、管状型、实体型表达阳性率分别为 14 .3 % ( 2 /14 ) ,18.2 % ( 2 / 11)和 2 2 .2 % ( 2 / 9) ,各型之间阳性率无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论　涎腺腺样囊性癌组织中存在抑癌基因PTEN表达缺失 ,PTEN在部分腺样囊性癌病变发展中起作用 ,PTEN表达异常与腺样囊性癌分型以及临床病理特征无关     

hASH1在肺神经内分泌肿瘤中的表达及其临床意义

背景与目的hASH1(human achaete-scute homolog1)基因在中枢神经系统、自主神经系统、肾上腺嗜铬细胞、甲状腺C细胞以及肺的神经内分泌细胞的早期发育中发挥重要作用。本研究旨在明确正常肺组织和各型肺肿瘤中hASH1基因的表达情况,分析其表达与肺神经内分泌标志物表达的相关性,初步探讨hASH1作为临床病理诊断肺神经内分泌肿瘤标志物的可能性。方法采用免疫组化的方法检测正常肺组织、肺炎性假瘤、肺神经内分泌癌(典型类癌、非典型类癌、大细胞神经内分泌癌、小细胞癌)和肺非神经内分泌癌(鳞癌、腺癌、大细胞癌)中hASH1和神经内分泌标志物(Chromogranin A、Synaptophysin、CD56)的表达情况。采用Western blot和RT-PCR的方法检测肺鳞癌、腺癌和小细胞癌组织中hASH1的表达情况。结果hASH1在正常肺组织、肺炎性假瘤、鳞癌、腺癌和大细胞癌中不表达;hASH1在典型类癌中的表达阳性率为12.5%(2/16),在非典型类癌中的表达阳性率为75%(15/20),差别有统计学意义(P<0.01);在大细胞神经内分泌癌中的表达阳性率为60%(6/10),在小细胞癌中的表...     

lncRNA XIST 通过miR-32-5p/EZH2 分子轴调控结直肠癌HCT-8细胞的恶性生物学行为

目的：探讨lncRNA XIST 通过miR-32-5p/果蝇Zeste 基因增强子同源物2（enhancer of zeste homolog 2,EZH2）分子轴调控结直肠癌HCT-8 细胞的恶性生物学行为。方法：收集2014 年7 月至2018 年8 月中南大学湘雅医院直肠肛门外科资料完整的结直肠癌患者28 例癌组织和配对的癌旁组织标本,采用qPCR检测结直肠癌组织及细胞系中lncRNA XIST 和miR-32-5p 的表达水平,双荧光素酶报告基因验证lncRNA XIST、miR-32-5p 和EZH2 的靶向关系,并进一步通过WB检测EZH2 的表达水平。CCK-8、Transwell 及Annexin V-FITC/PI 染色流式细胞术检测HCT-8 细胞增殖、迁移及凋亡情况。结果：lncRNA XIST 在结直肠癌组织及细胞系中高表达,且在HCT-8 细胞中表达最高（P<0.05 或P<0.01）。双荧光素酶报告基因证实,lncRNA XIST 靶向负调控miR-32-5p（P<0.05）,且EZH2 是miR-32-5p 的靶基因。敲降lncRNA XIST 抑制HCT-8 细胞增殖和迁移并诱导其凋亡（P<0.05或P<0.01）;进一步实验证明,敲降lncRNA XIST 上调miR-32-5p 的表达水平,从而下调EZH2 表达水平,进而抑制HCT-8 细胞增殖和迁移并诱导其凋亡。结论：lncRNA XIST通过miR-32-5p/EZH2 分子轴促进HCT-8 细胞增殖、迁移并抑制细胞凋亡。     

SHH和GL11在早期宫颈癌组织中的表达及意义

目的探讨SHH及神经胶质瘤相关基因同源蛋白1（GL11）在宫颈癌前病变、早期宫颈癌组织中的表达及意义。方法选取早期宫颈癌患者36例、CINHI级28例、正常宫颈20例,使用免疫组化S-P法检测上述组织标本中SHH及GLll的表达。结果SHH蛋白阳性表达率分别为正常宫颈组织20．0％（4／20）、宫颈CINIII60．7％（17／28）、早期宫颈癌69．4％（25／36）,两两比较差异有统计学意义（P均〈0．05）。GL11蛋白阳性表达率分别为正常宫颈组织25．0％（5／20）、宫颈CINⅢ53．6％（15／28）、早期宫颈癌58．3％（21／36）,两两比较差异有统计学意义（P均〈0．05）。结论SHH、GL11过度表达可能参与了宫颈癌的发生发展,其检测有助于宫颈癌的早期诊断。     

Chinese herbal medicine-derived compounds for cancer therapy: A focus on hepatocellular carcinoma

Ethnopharmacological relevance

Hepatocellular carcinoma (HCC) as the major histological subtype of primary liver cancer remains one of the most common malignancies worldwide. Due to the complicated molecular pathogenesis of HCC, the option for effective systemic treatment is quite limited. There exists a critical need to explore and evaluate possible alternative strategies for effective control of HCC. With a long history of clinical use, Chinese herbal medicine (CHM) is emerging as a noticeable choice for its multi-level, multi-target and coordinated intervention effects against HCC. With the aids of phytochemistry and molecular biological approaches, in the past decades many CHM-derived compounds have been carefully studied through both preclinical and clinical researches and have shown great potential in novel anti-HCC natural product development. The present review aimed at providing the most recent developments on anti-HCC compounds derived from CHM, especially their underlying pharmacological mechanisms.

Materials and methods

A systematic search of anti-HCC compounds from CHM was carried out focusing on literatures published both in English (PubMed, Scopus, Web of Science and Medline) and in Chinese academic databases (Wanfang and CNKI database).

Results

In this review, we tried to give a timely and comprehensive update about the anti-HCC effects and targets of several representative CHM-derived compounds, namely curcumin, resveratrol, silibinin, berberine, quercetin, tanshinone II-A and celastrol. Their mechanisms of anti-HCC behaviors, potential side effects or toxicity and future research directions were discussed.

Conclusion

Herbal compounds derived from CHM are of much significance in devising new drugs and providing unique ideas for the war against HCC. We propose that these breakthrough findings may have important implications for targeted-HCC therapy and modernization of CHM.     

利用酵母双杂交系统筛选NKD1结合蛋白质

目的:酵母双杂交技术筛选结肠癌细胞中与裸角质层同源蛋白1(naked cuticle homolog 1,NKD1)相互结合的蛋白质,从而进一步了解NKD1.方法:以结肠癌细胞SW480的cDNA为模板,克隆NKD1基因,并将其成功构建在pGBKT7诱饵载体上.利用酵母双杂交技术从结肠癌SW480细胞文库进行筛选.结果...