工频磁场对星形胶质细胞间隙连接通讯功能的影响

目的　探讨工频磁场 (PFMF)是否有促癌或协同促癌作用。方法　利用荧光光漂白后再恢复法观察漂白细胞荧光强度的恢复以判断经间隙连接的细胞间通讯 ,以相对荧光强度恢复速率(CFIRR)作为对细胞间隙连接通讯 (GJIC)作用的评价指标 ,研究不同磁场强度单独作用或协同佛波酯(TPA)对星形胶质细胞GJIC功能的影响。结果　 3ng/mlTPA作用 1h时CFIRR的中位数 (Md)值为4 .53 % /min ,空白对照组为 9.74% /min ,两组的差异有显著性 (H =1 2 .0 84,P <0 .0 0 5)。 0 .8或 1 .6mT磁场作用 2 4h时CFIRR的Md 分别 8.2 5、6 .68% /min ,与空白对照组比较 ,差异无显著性 (H =32 .61 7,P >0 .0 5)。 0 .8或 1 .6mT磁场作用 2 3h ,再与TPA共同作用 1h时CFIRR的Md 分别为 3 .32、2 .85% /min ,与TPA组比较 ,差异无显著性 (H =2 .589,P >0 .0 5)。结论　 0～ 1 .6mT的 50Hz磁场单独作用不能抑制星形胶质细胞GJIC功能 ;协同TPA ,不能增强TPA对星形胶质细胞GJIC的抑制作用 ;但是磁场对星形胶质细胞GJIC的抑制作用随着磁场强度增强呈递增趋势     

加热及增加细胞内氧自由基水平对恶性胶质瘤细胞生物学特性的影响

本文就加热及同时增加细胞内氧自由基水平对恶性胶质瘤细胞存活、增殖和细胞间隙连结通讯的影响做初步观察。用Ｍ．Ｔ．Ｔ法测定胶质瘤细胞存活率；用Ｋｉ－６７抗增殖细胞核抗原单克隆抗体，通过免疫组织化学ＡＢＣ染色分析胶质瘤细胞的增殖活性；用划痕染料示踪技术观察胶质瘤细胞的细胞间隙连结通讯。结果表明，Ｈ２Ｏ２和３ＡＴ能增强加热对胶质瘤细胞存活与增殖的抑制作用，促进胶质瘤细胞间隙连结通讯的改善，存在着明显的剂量和时间效应。实验结果提示，通过内外源性增加胶质瘤细胞内的氧自由基水平，将有助于强化加热治疗胶质瘤效果，并可以减少加热的剂且，降低副作用。     

间隙连接蛋白家族新成员Cx36

Cx36是哺乳动物间隙连接蛋白(connexin,Cx)家族γ亚类的第一个成员,它参与形成间隙连接,介导相邻细胞间的物质和信息的直接交换。间隙连接是神经系统构成电突触的结构基础,参与调控神经冲动信息的传递和复杂神经网络的整合,而Cx36是唯一一个在神经系统中优先表达的Cx,因此成为电生理研究领域的热点。就Cx36的发现过程、结构和定位进行了总结,并着重介绍它在神经系统中的功能和调节机制。     

Cx43及雌激素和孕激素受体在子宫内膜癌中的表达

子宫内膜癌是常见的妇科肿瘤之一，近年来，众多研究者认为子宫内膜癌有上升趋势，预计子宫内膜癌将会成为妇科肿瘤的研究重点之一。其发病机制目前仍未完全明确。近年来，学者们认识到子宫内膜癌的细胞分化程度、肌层浸润深度、淋巴结转移、宫颈浸润等是影响其预后的重要因素，     

Cx43在造血调控及重建中的作用

目的:采用条件性基因敲除技术构建造血系统间隙连接蛋白43(Cx43)基因敲除(Cx43~(-/-))小鼠模型,并探讨Cx43在维持造血细胞自我更新及功能稳定中的作用。方法:将引进的2对转基因小鼠Cx43 loxP/loxP和Lyz-Cre/+杂交,选取F1雌性子代Cx43 loxP/-_Lyz-Cre/+与雄性Cx43 loxP/loxP合笼回配,提取所获得子代小鼠鼠尾组织基因组DNA,采用PCR方法鉴定小鼠基因型,RT-PCR方法筛选Cx43~(-/-)小鼠,同时分析小鼠不同器官中Cx43基因的表达差异;该类小鼠经5-氟尿嘧啶(5-FU;125 mg/kg)处理,在化疗前及化疗后第5、10和15天经眼球取血分析其血象变化。Cx43~(-/-)及Cx43~(+/+)小鼠予7.5 Gy(~(60)Co-γ)的致死量照射,剂量率1 Gy/min,照射后6 h分别给予事先准备就序的骨髓细胞,每只3×10~6细胞于尾静脉注入,2周后处死小鼠检测造血是否重建:分离股骨切片后,收集骨髓细胞进行细胞表型分析(选用的单抗为CD45R、Gr-1、CD4、 CD8a、TCRαβ、Mac-1、抗sIgM、TER119、Sca-1及CD117);同时进行体外造血细胞集落实验观察造血细胞的体外增殖能力。结果:本研究通过2种转基因小鼠间杂交和回交,成功获得造血系统选择性Cx43基因敲除小鼠;该类小鼠骨髓及外周血细胞无Cx43表达,参与造血的组织,如肝脏和脾脏中Cx43表达也显著下调(P0.01),而心脏和肾脏的Cx43表达则无影响,小鼠成年后外周血象分析并无明显异常,但应急代偿能力下降,经5-FU处理后,其造血功能恢复显著减缓,处理15 d后,Cx43~(+/+)小鼠造血功能已接近正常水平,而Cx43~(-/-)小鼠仍无明显的恢复迹象,血红蛋白、白细胞及血小板仍处低位,2者差别有统计学显著性(P0.01);体外集落试验也证实Cx43~(-/-)小鼠造血干/祖细胞的增殖能力下降,其CFU-GM或CFU-E集落数均明显少于Cx43~(+/+)小鼠(P0.01),但流式细胞术结果显示,Cx43~(-/-)小鼠骨髓中Lin~-/c-Kit~+/Sca-1~+细胞亚群数量与Cx43~(+/+)小鼠相比差异并无统计学显著性;Cx43~(-/-)小鼠在化疗或移植后其骨髓造血功能重建均延迟,且化疗15 d后骨髓切片及涂片均证实其骨髓中造血细胞增生程度明显降低,脂肪组织显著增多,而且T、B细胞发育也有异常。此外,其外周血中CD4~+CD8~+细胞比例比野生型小鼠增多(P0.05),但CD4~+T细胞显著减少(P0.01),尤其是TCRαβ亚群细胞减少最为明显(P0.01)。同样,Cx43~(-/-)小鼠外周血中CD45R~+sIgM~-细胞亚群比例与野生型小鼠相比显著减少(P0.01)。结论:骨髓中Cx43基因表达在造血干/祖细胞发育(尤其是应急状态时)具重要作用,敲除Cx43基因后造血干/祖细胞增殖减缓,造血及免疫重建功能受损。     

肝硬变,病毒性肝炎及正常肝组织中间隙连接蛋白Cx32的表达

间隙连接（ｃｏｎｎｅｘｉｎ，Ｃｘ）是细胞间的蛋白通道结构，由相邻胞膜上的连接子（ｃｏｎｎｅｘｏｎ）相互衔接而成。通过Ｃｘ介导的细胞间连接通讯（ｇａｐｊｕｎｃｔｉｏｎｉｎｔｅｒｃｅｌｕｌａｒｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ，ＧＪＩＣ），对细胞的增殖、分化进行...     

心脏间隙连接研究现状

目的　探讨心脏间隙连接与心脏疾病的关系。方法　分析近年来有关心脏间隙连接资料和研究结果。结果　心脏间隙连接由连接蛋白组成 ,为心肌的同步收缩提供低电阻传导途径。在心肌质膜处形成紧密成束的聚合体 ,典型地存在于心肌闰盘处。目前已发现连接蛋白有 14种 ,心血管系统主要分布有 :Cx37、Cx40、Cx43、Cx45、和Cx46等。Cx43被认为是心脏特有的连接蛋白。心肌间隙连接的数目、分布和组成在不同动物、同种动物的不同组织及不同发育时期均表现出差异 ,并与各种心脏病的发生密切相关。结论　心脏间隙连接的结构、分布、功能以及心脏发育过程 ,和疾病状态下间隙连接的改变有关。     

脂蛋白对人血管内皮细胞间隙连接通讯功能的影响

用激光扫描共聚焦显微镜及荧光漂白后回复技术,观察HDL,LDL及维生素对培养的人血管内皮细胞间隙连接通讯功能的影响。结果：培养条件下的人血管内皮细胞之间可形成功能性的间隙连接。LDL组的荧光回复率分别为6．691±2．634,4．153±2．125,2.441±0.720,与对照组比较及两两比较,有显著性差异（P＜0.05）;HDL组及维生素C组的荧光回复率与对照组比较,无显著性差异;LDL＋HDL组的荧光回复率分别为3．500±0.890,4．339±1．126,5．243±1．278,与对照组比较及两两比较,有显著性差异（P＜0．05）;LDL＋维生素C组的荧光回复率分别为3．959±1．088,4．974±1．194,8．673±2．488,与对照组比较及两两比较,有显著性差异（P＜0．05）。以上结果提示：LDL对内皮细胞的间隙连接通讯功能具有明显的抑制作用,而HDL与维生素C可改善之。LDL致动脉粥样硬化的机理之一可能是抑制了内皮细胞的间隙连接通讯功能,但亦有可能这仅是内皮细胞对损伤的一种代偿反应。而HDL及维生素C对内皮细胞的保护作用可能是通过改善间隙连接的通讯功能来实现的。     

复方藤梨根制剂上调PG细胞间隙连接通讯功能的研究

目的：探讨复方藤梨根制剂对高转移性人肺癌细胞(PG)的生长及细胞间隙连接通讯功能的影响。方法：采用MTT法体外观察不同浓度复方藤梨根制剂对PG细胞的杀伤作用；应用激光共聚焦显微镜检测用药后细胞间隙连接通讯功能(GJIC)的变化。结果：4个浓度的复方藤梨根制剂对PG细胞均有杀伤作用，呈剂量依赖关系。与空白对照组相比，一定浓度的复方藤梨根制剂能上调GJIC。结论：复方藤梨根制对PG细胞具有生长抑制作用，其机制可能与上调细胞间隙连接通讯功能有关。     

激光扫描共聚焦显微镜监测细胞间隙连接通讯的方法

为建立肿瘤细胞学新的研究方法，本文应用培养的胰腺癌细胞通过细胞间隙连接通讯功能测定技术，将细胞以ＣＦＤＡ／ＡＭ染色后，在３７℃及５％ＣＯ２内孵育１０分钟，再经激光扫描共聚焦显微镜进行荧光测定。结果发现胰腺癌细胞的荧光恢复速率明显上升（０１５２±０１１７比９８±０２４７，Ｐ＜００１），表明细胞间隙连接通讯功能迅速增强，细胞增殖受到抑制。本研究提示新的监测方法为检测基因治疗效果提供一项重要指标，也为肿瘤细胞生物学的研究提供了新的手段。