同种异体红细胞对PBMC穿孔素溶血活性影响的实验研究

目的 观察正常的同种异体人红细胞对外周血单个核细胞(PBMC)穿孔素(PFP)溶血活性的影响。方法 在测定PBMC的PFP溶血活性反应系统中，加入正常人O型红细胞，效靶比为5：1～50：1。5％CO2，37℃环境反应16小时，利用上清液中靶细胞被PFP裂解后释出的Hb的过氧化物酶样作用，以OPD-H2O2为底物显色，根据显色A值大小，反应上清中Hb的多少，从而测知PFP的活性。观察人红细胞对PFP溶血活性的影响。结果在效靶比为5～20：1时，红细胞对PBMC的PFP溶血活性表现出明显的增强作用，50：1时，红细胞作用组的PFP溶血率较对照组明显降低。结论 同种异体红细胞对人PBMC的PFP溶血活性有明显的调控作用，且随效靶比的变化而变化。低效靶比时为增强作用，高效靶比则表现为抑制作用。     

参白注射液对病毒性心肌炎穿孔素表达的影响

观察了参白注射液对VMC感染模型——体外培养大鼠心肌细胞感染柯萨奇B3(CVB3)穿孔素表达的影响，通过分析其表达水平，旨在探讨参白注射液的作用机制，为临床治疗VMC提供实验依据。     

中国HIV感染者细胞毒性淋巴细胞与CD4~+CD25~+调节性T细胞相关性研究

目的：对中国HIV感染者NK细胞、CD8^＋T细胞及胞内穿孔素、颗粒酶-B表达与CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞水平的相关性进行研究,探讨调节性T细胞在HIV感染中的作用机制。方法：选取73名HIV/AIDS患者（长期不进展组、无症状HIV组、AIDS组）,应用流式细胞仪胞内染色技术检测NK细胞、CD8^＋T细胞数量及胞内穿孔素、颗粒酶-B表达水平,分析其与CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞水平的相关性。结果：CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞百分率与NK细胞、CD8^＋T淋巴细胞数量呈明显负相关（P〈0.01）,与CD8^＋T细胞内穿孔素、颗粒酶-B表达百分率呈明显正相关（P〈0.05）,与NK细胞内穿孔素、颗粒酶-B表达水平绝对值负相关（P〈0.01）,与CD8＋T细胞内颗粒酶-B表达绝对值呈明显负相关（P〈0.01）,与CD8^＋T细胞内穿孔素表达绝对值无明显相关性（P〉0.05）。CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞绝对值与CD8^＋T细胞内穿孔素、颗粒酶-B表达百分率呈明显负相关（P〈0.05）。结论：中国HIV感染者细胞毒性淋巴细胞数量功能的变化与调节性T细胞显著相关,提示高水平的调节性T细胞可能与细胞毒性淋巴细胞耗竭相关,可能为导致疾病进展的原因之一。     

Weel基因修饰细胞抗CTL诱导的凋亡效应

目的 研究Weel转基因细胞抗CTL介导的凋亡效应及抗穿孔素抗体的对此抗凋亡效应的影响。方法 采用DNA转染技术将重组体Weel Hu／GFP导入哺乳动物细胞NIT(鼠胰岛细胞瘤细胞)；以转染重组体前、后的NIT为靶细胞，采用ELISA凋亡试剂盒检测CTL介导的凋亡效应。结果 转染Weel及加入抗穿孔素抗体的NIT组发生凋亡的细胞数最少。结论 Weel基因转染靶细胞在一定程度上可抵抗CTL介导的细胞凋亡，而穿孔素抗体可协同增强此抗凋亡效应。     

穿孔素对不同肿瘤细胞的杀伤作用

目的：研究穿孔素对不同肿瘤细胞株的杀伤作用是否一致,以确定肿瘤细胞对穿孔素的杀伤是否有抵抗作用。方法：大量培养LAK细胞,制备含穿孔素毒性颗粒的LAK细胞裂解物,用红细胞裂解试验证实LAK细胞裂解物的杀伤活性,培养穿孔素敏感的K562肿瘤细胞株和穿孔素不敏感的Hela,MGC80-3肿瘤细胞株,用流式细胞计数的方法研究LAK细胞裂解物对3种不同肿瘤细胞的杀伤作用。结果：红细胞裂解试验证实,LAK细胞裂解物具有杀伤活性;抗人穿孔素（Human perforin HP)McAbs可封闭LAK细胞裂解物对不同肿瘤细胞株的细胞毒作用,LAK细胞裂解物对K562细胞的杀伤是通过穿孔素依赖途径的。结论：穿孔素对K562,Hela和MGC80－3肿瘤细胞的杀伤明显不同,说明肿瘤细胞存在对穿孔素的抵抗机制。     

穿孔素介导的溶细胞作用的研究进展

穿孔素是一种功能和结构均类似补体Ｃ９的蛋白质，主要存在于ＣＴＬ和ＮＫ细胞的胞浆颗粒中。业已证明，它是细胞介导的细胞毒作用（ＣＭＣ）的主要溶细胞效应分子。本文概述了穿孔素在ＣＭＣ中的作用及其机理、特点、意义。     

穿孔素的免疫调节作用

穿孔素 (Perforin)是存在于CTL、NK细胞杀伤颗粒中的细胞毒性蛋白 ,在保护机体抗胞内病原体如细菌、病毒、寄生虫感染、抗肿瘤和同种排斥应答中起重要作用 ,是免疫系统重要的效应分子。近年来随着FHL病因的阐明 ,逐渐发现穿孔素也是一种重要的免疫调节分子。本文综述了穿孔素在病毒感染、肿瘤免疫、自身免疫病及GVHD中的调节作用 ,以及穿孔素免疫调节的作用机制。     

CTL细胞毒作用的颗粒依赖性途径

管孝鞠 (1 970 - ) ,女 ,安徽省马鞍山市人 ,博士 ,讲师 ,主要从事药学方面的研究 ,发表论文 2 0篇。电话 :(0 2 3) 68752 2 36细胞毒Ｔ淋巴细胞 (ＣＴＬ)是机体防御细胞内感染的主要成员之一 ,分为ＣＤ8+ＣＴＬｓ、ＣＤ4+ＣＴＬｓ和双阴性ＣＤ4-ＣＤ8-ＣＴＬｓ(ＤＮＣＴＬｓ)几个亚群。ＣＴＬ细胞毒性通过两条接触依赖性途径杀伤靶细胞 :Ｆａｓ配基 (ＦａｓＬ) Ｆａｓ介导的细胞凋亡作用和颗粒 胞吐途径介导的溶细胞作用。研究表明 ,在ＣＴＬ中起主要作用的ＣＤ8+ＣＴＬｓ通过颗粒依赖性途径识别和杀伤靶细胞和病原体 ,并可通过分泌细胞…     

人穿孔素cDNA的克隆与序列分析

引言穿孔素（ｐｅｒｆｏｒｉｎ）又称成孔蛋白（ｐｏｒｅｆｏｒｍｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ,ＰＦＰ）,是一种主要由激活的细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）和自然杀伤（ＮＫ）细胞所产生的溶细胞蛋白,贮存于细胞的杀伤颗粒中,在细胞介导的杀伤过程中起非常关键的作用［１］。...     

慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞穿孔素的表达

目的：了解慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞（PBL）穿孔素（PFP）的表达情况及其与疾病的关系。方法：用抗人PFP单克隆抗体，采用免疫组化染色法，观察慢性乙型肝炎患者PBL中总的PFP阳性细胞的百分率，结果：慢性乙型肝炎PBL中PFP表达与正常对照组之间存在明显差异，结论：乙型肝炎病毒感染慢性化与机体PBL中PFP的表达水平低下密切相关。