EUSA试剂“花板”问题的出现与分析

我们在使用ELISA试剂进行血液HBeAg-HCV-HIV及梅毒等各项检验的过程中，经常发现空白和阴性，阳性对照以及室内质控孔(卫生部临检中心提供，HBsAg 0．5mg 1ng-HCV-HIV梅毒均为2NCU)结果正常，而血液标本孔的OD值却比较高(大多数OD值≥0．070)。标本的阳性率很高，每板除对照孔外，有时阳性高达10孔之多，而大多数真阳性标本都出现弱阳性结果。这就是试验中所说的“花板”问题。这种现象对检验结果的正常判断造成了很大的影响。我们在试验中，针对这种“花板”现象进行了认真的分析及判断。总结如下。     

HIV抗体检测弱阳性结果分析

了解掌握HIV感染情况,关键是实验室检测结果的确定.但实际检测过程中,有时样本出现弱阳性,因此,进一步确认十分重要.2004年9月,本溪市疾病预防控制中心人类免疫缺陷病毒（HIV）抗体检测初筛中心实验室接到1份样品,在其他实验室初筛阴性,我们检测A值均高出临界值0.02的弱阳性,最后报辽宁省省疾病预防控制中心确认为阳性.检测情况报告如下.     

弱阳性HBsAg的ELISA假阴性原因分析

ＥＬＩＳＡ检测肝炎病毒是目前最常见方法之一。但影响因素也较多 ,特别是低浓度样本易导致假阴性。本文通过加样时间、试剂平衡时间和溶血程度方面进行实验 ,以进一步探讨低浓度ＨＢｓＡｇ的干扰因素。1　试剂上海科华生产的ＨＢｓＡｇ试剂盒 ,卫生部临检中心提供的低值ＨＢｓＡｇ质控品。2　方法和结果方法 1是用 1ｎｇ/ｍｌＨＢｓＡｇ作样本 ,分别在 2 5℃加入反应板后放置 0ｍｉｎ、15ｍｉｎ、30ｍｉｎ、45ｍｉｎ和 6 0ｍｉｎ ,后按说明书操作。结果Ａ值分别为 0 .132、0 .148、0 .16 2、0 .188、0 .191,立即加样与 30ｍｉｎ以上比较差…     

母婴血型不合HDN患儿致敏红细胞的抗体特异性

目的:调查母婴血型不合新生儿溶血病(HDN)患儿致敏红细胞的抗体特异性,比较不同抗体致敏新生儿红细胞所致HDN的血型血清学特征.方法:对黄疸新生儿,鉴定母婴血型,做新生儿红细胞直接抗球蛋白试验(DAT),检测母婴血浆及新生儿红细胞放散液中可致敏新生儿红细胞的血型抗体以诊断HDN.结果:血型血清学诊断为HDN的252例患儿中,致敏红细胞的抗体分别为:抗-A 40例、抗-B 40例、抗-A 抗-AB 92例、抗-B 抗-AB 65例、抗-AB 4例、抗-A 抗-M 1例、抗-M 3例、抗-c 1例、抗-cE 1例、抗-E3例、抗-D 2例;由ABO血型抗体及抗-M所致HDN者DAT多为阴性或弱阳性,由Rh血型抗体致HDN者DAT均为强阳性,ABO、Rh血型抗体及抗-M致HDN患儿红细胞热放散液中致敏红细胞的抗体效价均高于血浆游离抗体.结论:被调查的HDN患儿绝大多数由来自O型母亲的IgG抗-A、抗-B及抗-AB所致,其次为抗-M及抗-E,由抗-D引起的HDN呈逐步减少的趋势.     

双对数曲线在制备抗-HIV弱阳性外部对照质控血清中的应用

目的 应用双对数曲线制备ELISA试验中抗-HIV弱阳性外部质控血清.方法 用抗-HIV阴性的血清倍比稀释试剂盒中抗-HIV阳性对照血清,用ELISA法检测并计算各稀释度血清的S/CO值.以稀释倍数的对数为横坐标,以相应S/CO值的对数为纵坐标进行线性回归,制作双对数曲线.结果 由所得双对数曲线可反推出所需S/CO值弱阳性质控血清的稀释倍数,可按此稀释倍数配制所需质控血清.结论 与单一倍比稀释法相比,将双对数曲线应用到抗-HIV弱阳性质控血清的制备中,可更加快速、简便、可靠地制备出所需弱阳性质控血清.     

时间分辨荧光免疫分析法检测HBsAg的假阳性和解决方法

目的避免时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)检测HBsAg假阳性的发生。方法对TRFIA法检测HBsAg结果为弱阳性的30份标本,全部用ELISA复核检测,复查ELISA为阳性的发阳性报告;ELISA法检测结果阴性者,用PCR法再次复查,阴性者发阴性报告。结果TRFIA法检测HBsAg的假阳性占总检测标本的百分比为0.191%(16/8372),而用PCR法再次复查后假阳性占总检测标本百分比降至0.179%(15/8372)。结论TRFIA法检测HBsAg假阳性偶有发生,绝大多数可以通过用ELISA法复检加以纠正。     

cTnT快速检测早期诊断心肌梗死的临床应用研究

目的：探讨急性心肌梗死（AMI）早期快速诊断方法。方法：将研究对象分为：AMI组,共150例（男108例,女42例,年龄30-75岁）;对照组,共120例（男84例,女36例,年龄38-76岁）。采用固相层析技术检测人血标本中的肌钙蛋白T（cTnT）。AMI组入院后每小时检测cTnT一次,连续2次阳性停止检测。对照组入院后随机检测cTnT二次。结果：AMI组发病2 h cTnT即开始出现阳性,4 h阳性率已达82.8%,到8 h阳性率达100%。对照组120例,118例为阴性,占98.3%,2例为弱阳性,占1.7%。结论：cTnT快速检测方法可用于AMI的早期诊断。     

脆性组氨酸三联体基因蛋白（Fhit）表达与皮肤蕈样肉芽肿的临床关系

目的 探讨脆性组氨三联体基因蛋白（Fhit）在皮肤蕈样肉芽肿中的表达状况及其预后价值。方法 应用免疫组化技术SP法检测Fhit在48例皮肤蕈样肉芽肿中的表达状况。结果 48例蕈样肉芽肿中30例显示Fhit蛋白缺失，且有表达者都为弱阳性；Fhit缺失与肿瘤的分期、转移与否无相关性。结论 Fhit缺失在皮肤蕈样肉芽肿组织中是频发事件；Fhit在皮肤蕈样肉芽肿中缺乏及其与预后的关系，尚须做进一步的研究阐明。     

乙型肝炎表面抗原弱阳性结果探讨

目的探讨乙肝表面抗原(HBsAg)弱阳性的临床意义。方法用酶联免疫吸附法(ELISA)和时间分辨荧光免疫分析系统(TRFIA)分别对40例乙肝表面抗原(HBsAg)弱阳性标本进行检测。结果ELISA法测定40例弱阳性标本,经TRFIA法定量检测均为阳性。结论当检测HBsAg为弱阳性时,应进行复查确认。     

卵巢子宫内膜异位组织中胎盘蛋白14表达的研究

目的 探讨胎盘蛋白14(PP14)在卵巢巧克力囊肿异位子宫内膜组织中与在位子宫内膜中表达的差别.方法 2005年6月至2006年10月对上海市长宁区妇幼保健院和上海交通大学医学院附属第九人民医院妇科临床手术中证实为卵巢巧克力囊肿患者70例(卵泡期35例,黄体期35例),采用免疫组织化学方法 测定卵巢巧克力囊肿壁内子宫内膜异位组织细胞中PP14的表达情况,并与患者自身在位子宫内膜中PP14表达进行比较.结果 在位子宫内膜PP14的表达在卵泡期呈中度阳性和弱阳性,在黄体期主要呈强阳性表达;卵巢巧克力囊肿壁内子宫内膜异位组织细胞的PP14多数呈强阳性表达,并且基本不受卵巢周期激素变化的影响,呈基本相同的表达状态.结论 PP14在卵巢巧克力囊肿的异位子宫内膜组织中表达活跃,并且基本不受月经周期中卵巢激素的影响,这表明异位子宫内膜在PP14表达方面与在位子宫内膜不同,具有相对的自主性.