Synthesis of two biologically active fluorescent probes of thymopentin

This study reports on the synthesis of two fluorescent analogues of thymopentin (TP-5; Arg-Lys-Asp-Val-Tyr). A fluorescein isothiocyanate labeled analogue (FITC-TP-5) and a stilbene isothiocyanate labeled analogue (SITS-TP-5) were extensively purified by ion-exchange and gel filtration chromatography. Characterization of the coupling site through amino acid analysis, dansylation and N-terminal cleavage of the fluorescent amino acid yielded results which indicated that both were mono-labeled analogues derivatized at the N-terminal. These analogues were shown to be TP-5-like in nature by their ability to induce the expression of the Thy 1.2 surface marker on nude mouse prothymocytes in both in vivo and in vitro assays. In addition, these analogues were able to inhibit the specific binding of radiolabeled TP-5 to human lymphocytes. Initial studies describing the interaction of FITC-TP-5 with human lymphocytes are shown.     

基于谱效相关的何首乌抗血小板聚集药效物质研究

应用体外抗血小板聚集生物活性检测方法,并结合化学指纹图谱进行谱效相关分析,探索何首乌抗血小板聚集的活性物质。采用体外抗血小板聚集法进行检测,何首乌50%乙醇提取物的抗血小板聚集作用强于10%或90%的乙醇提取物,超声提取优于回流提取。对正交试验的不同提取物进行抗血小板聚集活性评价,抑制率在32.03%~74.56%。谱效相关分析结果表明,反式二苯乙烯苷、顺式二苯乙烯苷、儿茶素与抗血小板聚集活性的相关系数较高且具有统计学意义,分别为0.963(P0.01),0.902(P0.01)和0.656(P0.05);进一步对上述3种与活性相关系数较高化合物的单体进行活性验证,均有较好的抗血小板聚集活性;最后根据3种单体化合物在何首乌中的含量差异计算相对活性贡献度可知,反式二苯乙烯苷是何首乌体外抗血小板聚集的主要活性物质。     

桑白皮水提物中化学成分的研究

目的研究桑白皮(Cortex Mori)水提物中的化学成分。方法采用聚酰胺柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、开放ODS柱色谱、HPLC等手段从桑白皮水提物中分离得到10个化合物,利用理化性质和波谱学分析,鉴定它们的化学结构。结果分离得到10个化合物,包括5个二苯乙烯苷类化合物、2个芳基苯并呋喃类化合物及3个香豆素类化合物,分别鉴定为mulberroside A(1)、cis-mulberroside A(2)、oxyresveratrol-2-O--βD-glu-copyranoside(3)、oxyresveratrol-3′-O--βD-glucopyranoside(4)、resveratrol-4,3-′di-O--βD-glucopyranoside(5)、moracin M-3′-O--βD-glucopyranoside(6)、moracin M-6,3-′di-O--βD-glucopyranoside(7)、7-hydroxycoumarin-6-O--αL-rhamnopyranosyl-(1→6)-O--βD-glucopyranoside(8)、scopoletin(9)、6-hydroxycoumarin-7-O--βD-glucopyra-noside(10)。结论化合物3、5、8为首次从该属植物中分得的已知化和物,化合物6为首次从该种植物中分离得到的已知化合物。     

2种藜芦属植物化学成分及其抗真菌活性研究

目的采用活性指导分离的方法研究百合科藜芦属植物Veratrum virid和藜芦V. nigrum干燥根及根茎的抗真菌活性成分。方法利用多种色谱技术进行分离纯化。通过现代波谱技术对单体化合物进行结构鉴定。结果从V.virid的甲醇提取物中分离得到10个化合物,分别鉴定为rubivirine-3-O-β-glucopyranoside(1)、veratrosine(2)、veratramine(3)、pseudojervine(4)、rubivirine(5)、resveratrol 3,4′-O,O′-di-β-D-glucopyranoside(6)、mulberroside A(7)、resveratrol 4′-O-β-D-glucopyranoside(8)、resveratrol 3-O-β-D-glucopyranoside(9)、oxyresveratrol-2-O-β-D-glucopyranoside(10);从藜芦的甲醇提取物中分离得到9个化合物,分别鉴定为veratrosine(2)、veratramine(3)、pseudojervine(4)、rubivirine(5)、verussurinine(11)、veralosidine(12)、jervine(13)、γ-chaconine(14)、germidine(15)。结论其中化合物1～5、11～15为甾体生物碱类化合物,6～10为二苯乙烯苷类化合物。化合物1为新的甾体生物碱类化合物;化合物5～10、14为首次从该属植物中分离得到。采用纸片扩散法评价化合物的抑真菌活性,结果显示化合物14对新生隐球菌和克柔念珠菌都具有较好的抑制活性,半数抑制浓度(IC50)分别为4.1、19.8μg/mL。并且化合物14在100μmol/L浓度下对4株人肿瘤细胞都不具有抑制活性。     

Tetrahydroxy Stilbene Glucoside Alleviates High Glucose-Induced MPC5 Podocytes Injury Through Suppression of NLRP3 Inflammasome

Background

Tetrahydroxy stilbene glucoside (TSG) is an active ingredient of Heshouwu and is an antioxidant. The underlying mechanisms of the renoprotective effect of TSG in diabetic nephropathy have not been previously reported. In this study, we investigated the mechanisms of TSG in preventing podocytes injury in high glucose (HG) condition.

二苯乙烯苷和远志总皂苷配伍对Aβ25-35诱导PC12细胞损伤的影响

目的探讨二苯乙烯苷(tetrahydroxy stilbene glycoside,TSG)和远志总皂苷(Tenuigenin,TEN)配伍对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤的影响。方法PC12细胞除空白组外运用Aβ25-35诱导建立阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)模型,被随机分成模型组、TSG(200 mmol/L)组、TEN组(100 mg/L)、TSG-TEN配伍组(TSG200 mmol/L+TEN100 mg/L)、多奈哌齐组(10μmol/L)。采用MTT比色法检测各组细胞存活率;取细胞上清液分别测各组的乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)含量及乙酰胆碱酯酶(AchE)、超氧化物歧化酶(SOD)活力;统计各组的细胞分化率。结果(1)细胞存活率的高低为:TSG-TEN组>TSG组>多奈哌齐组>TEN组(P<0.01);TSG组、TEN组、多奈哌齐组均低于TSG-TEN配伍组(P<0.01,P<0.05);(2)与模型组比较,TSG组、TEN组、TSG-TEN配伍组可降低LDH含量、MDA含量、抑制AchE活力及增强SOD活力(P<0.05)。且TSG-TEN配伍组对降低LDH含量、MDA含量、抑制AchE活力及增强SOD活力效应比TSG或TEN单用组效应更好(P<0.01);(3)PC12细胞的分化率高低为:TSG-TEN组>多奈哌齐组>TSG组>TEN组(P<0.01,P<0.05);TSG组、TEN组、多奈哌齐组均低于TSG-TEN配伍组(P<0.01,P<0.05)。结论TSG和TEN配伍对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤具有显著的协同保护作用,其作用机制可能与改善胆碱能系统、抗氧化应激、降低突触可塑性损伤有关,且TSG优于TEN。     

买麻藤中1个新的含氮芪类化合物

目的 研究买麻藤Gnetum montanum藤茎的化学成分。方法 利用正相硅胶、Sephadex LH-20凝胶、中压制备液相色谱和半制备HPLC等多种柱色谱技术进行分离纯化,并综合运用ESI-MS、HR-ESI-MS、¹H-NMR、¹³C-NMR、DEPT、¹H-¹H COSY、HSQC、HMBC等方法鉴定化合物的结构。结果 从买麻藤藤茎的95%乙醇提取物中分离得到14个化合物,分别鉴定为（Z）-5-（2,4-二羟基-6-（4-羟基-3-甲氧基苯乙烯基）苯基）吡咯烷-2-酮（1）、银松素单甲醚（2）、3-羟基-5,4''-二甲氧基芪（3）、银松素（4）、买麻藤醇（5）、刚果买麻藤素F（6）、异丹叶大黄素（7）、闭苞买麻藤素（8）、白藜芦醇（9）、顺式-ε-葡萄素（10）、ε-葡萄素（11）、双异食用大黄苷元A（12）、顺式-射干素B（13）和小叶买麻藤素A（14）。结论 化合物1为新化合物,命名为顺式买麻藤内酰胺（cis-gnetumamide）,化合物3、10、13和14为首次从该植物中分离得到。     

制何首乌的炮制方法探索

目的:考察黑豆汁炖制时间对制何首乌外观性状及各类有效成分含量变化规律的影响。方法:采用HPLC同时测定不同炮制时间制何首乌样品中二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-葡萄糖苷的含量,选择Agilent ZORBAX Extend-C_(18)色谱柱(4. 6 mm×250 mm,5μm),甲醇(A)-水(B)为流动相梯度洗脱(0～30 min,5%～100%A; 30～40 min,100%A),流速1. 0 mL·min~(-1),柱温35℃,检测波长280 nm。结果:随炖制时间的增加,二苯乙烯苷含量逐渐降低,与8 h时相比,至64 h时含量降低76%;大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷和大黄素甲醚-8-O-葡萄糖苷2种蒽醌苷含量先上升后下降,至24 h时达最高值,炖制40 h时降至与8 h近似的水平,之后略有波动;大黄素、大黄素甲醚2种蒽醌苷元含量先上升后下降,炖制32 h时达最大值,之后缓慢降低并趋于稳定。结论:炖制时间对制何首乌中各类成分含量的影响显著,且变化趋势不尽相同,应规范制何首乌饮片的炮制时间;同时,仅以二苯乙烯苷及蒽醌类成分作为制何首乌的指标性成分依据不够充分,应考虑增加多糖类等质量控制指标。     

RP-HPLC法同时测定乙肝舒康胶囊中虎杖苷和二苯乙烯苷含量

目的:建立同时测定乙肝舒康胶囊中虎杖苷和二苯乙烯苷的高效液相色谱法。方法:采用 Hypersil C_(18)色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm),以乙情-水(20:80,v/v)为流动相,流速为1.0 mL·min~(-1),检测波长为320 nm。结果:虎杖苷和二苯乙烯苷的线性范围分别为1.5～30μg·mL~(-1)。(r=0.9993)和5～100μg·mL~(-1)(r=0.9999),平均回收率(n=9)分别为96.5%和100.9%。结论:本法简便,准确,重现性好。     

酶化学发光法测定何首乌中四羟基二苯乙烯葡萄糖甙的含量

报道一种新的何首乌中二苯乙烯甙含量的测定方法──酶化学发光法。该方法对二苯乙烯甙的检测限量为２．５×１０－７ｍｏｌ／Ｌ标准偏差小于２％，标准回收率在９６％～１０４％之间，线性范围为５．０×１０－７～１．０×１０－４ｍｏｌ／Ｌ。测定结果与紫外分光光度法基本一致。本法灵敏度较高，稳定性好，可用于中草药何首乌中二苯乙烯甙含量的测定。