Sry监测体外扩增造血细胞植入效果的实验研究

目的：探讨Y染色体性别决定基因(Sry)作为评价和追踪造血细胞移植后植入状态检测指标的可行性。方法：根据Sry DNA序列设计引物及制备探针，然后进行PCR检测、斑点杂交和原位杂交．动态追踪经不同条件下体外扩增的纯系雄性小鼠BMMNC回输至雌性小鼠后的植入状态。结果：PCR结果显示在各移植组小鼠的骨髓有核细胞、脾细胞及外周血白细胞中均有Y染色体特异性序列的存在；斑点杂交结果显示在各回输组间并无明显差别，但用脾脏组织作原位杂交的结果则发现基质细胞支持扩增回输组的阳性颗粒数目与输注新鲜细胞组相似，但略少于雄性小鼠；而输注细胞因子扩增细胞实验组小鼠则明显少于雄性动物的阳性对照标本和基质细胞支持扩增回输组。结论：(1)经重复检测表明上述方法的重复性好，结果可信．可作为检测性别不同时造血干细胞移植效果的一种检测手段；(2)证实基质细胞支持下的体外扩增的造血细胞具有较好的植入能力。     

金针菇子实体多糖提取物对人肝癌SMMC—7721细胞的抑增殖作用

金针菇子实体经热水提取，乙醇沉淀，胰蛋白酶水解，Ｓｅｖａｇ法去除蛋白质，乙醇分级沉淀等处理得金针菇子实体多糖。研究了该多糖对人肝部ＳＭＭＣ－７７２１细胞生长曲线，有丝分裂指数及线粒体活性的影响。结果表明该多糖对体外培养的人肝癌ＳＭＭＣ－７７２１细胞具一定抑制作用。     

Sustained Axial Loading Lengthens Arteries in Organ Culture

Although it has been recognized for many years that arteries in vivo exist under significant axial strain, studies of the adaptation of arteries to elevated axial strain have only recently been conducted. To determine the effects of sustained elevation of axial loading on arterial structure and function, axial stresses of 250 kPa or greater were applied to porcine common carotid arteries maintained in a perfusion organ culture system for 7 days at physiologic pressure and flow conditions. Our results demonstrated that axial stretch could lead to an increase in unloaded length that was proportional to the axial stretch ratio (stretched length divided by unloaded length) when the axial stretch ratio was above a threshold value of 2.14. Below this threshold, no significant length change occurred. Above this threshold, a significant increase in unloaded length (13 ± %,) and the number of smooth muscle cell nuclei (20 ± 7%) was observed. Permanent length change was associated with a significant decrease in axial stiffness, and the maximum elongation achieved was limited by rupture of the arterial wall. All tested arteries demonstrated good viability and strong vasomotor responses. These results show that arteries in organ culture can elongate under sustained axial loading.     

成人骨髓间充质干细胞对造血干细胞体外增殖的影响

目的研究骨髓间充质干细胞（MSC）对脐带血（CB）CD34^＋细胞体外增殖和造血重建能力的影响。方法取人骨髓单个核细胞贴壁培养．梭形细胞完全融合后传代，用流式细胞仪检测免疫表型；将CBCD34^＋细胞接种到MSC或其他培养液中．比较不同培养条件对造血干细胞扩增能力、集落形成能力及黏附分子表达的影响。结果在加入IL-3的培养体系中．在MSC和细胞因子作用下，CD34^＋细胞扩增7d和14d后，有核细胞（NC）、CD34^＋细胞和CDl33^＋细胞数，实验组均显著多于对照组。CD34＋细胞在未加入IL-3的培养体系中培养8d后，实验组NC、CD34^＋细胞、CD34^＋CD38-细胞和造血祖细胞集落扩增倍数均显著高于对照组。扩增后CD34^＋细胞的ALCAM、VLA-α4、VLA-α5、VLA-β1、HCAM、PECAM和LFA-1表达较扩增前无显著变化。结论MSC可为造血干细胞（HSC）体外扩增提供适宜的微环境，有助于CD34^＋细胞体外增殖并抑制HSC分化，保持其造血重建潜能和归巢能力。     

雪山芪的化学成分研究

目的 研究雪山芪He dysaram sikkimense Benth．ex Baker．var．rigidum Hand、-Mass．的化学成分。方法 采用反复硅胶柱层析分离纯化,通过理化常数测定和光谱分析鉴定化合物的结构。结果 从雪山芪干燥根中分离得到9个化合物。根据波谱分析和理化数据,鉴定出其中8个化合物分别为：羽扇豆醇(lupeol,1)、4′-羟基-7-甲氧基异黄酮(isoformononetein,Ⅱ)、4′-羟基-6,7-二甲氧基异黄酮(3-[4-hydroxyphenyl-6,7-dimetoxy-4H-1-benzopyran-4-one],Ⅲ)、熊果酸(ursolic acid,Ⅳ)、山嵛酸-α-单甘油酯(docosanooic acid-2,3-d．hydroxypropyl ester,Ⅴ)、二十四烷酸(lignoceric acid,Ⅵ)、β-谷甾醇(β-sitosterol,Ⅶ)及蔗糖。结论 以上化合物均为首次从该植物中分得。     

细胞因子组合对小鼠骨髓单核细胞的体外扩增作用

目的　了解细胞因子组合对小鼠骨髓单个核细胞的体外扩增作用。方法　采用SCF、IL 3、IL 6、GM CSF、G CSF和EPO等 6种细胞因子组合在体外扩增培养小鼠骨髓单个核细胞 5d后 ,收集培养细胞作体外半固体培养计数各不同阶段祖细胞数 ,并计数细胞总数 ,与未经扩增培养的细胞作比较以判断其扩增情况。结果　有核细胞总数扩增不显著 ,为 (1 .3 60± 0 .1 2 6)倍 ,但造血祖细胞却获得了明显扩增 ,其中CFU E达培养扩增前的 (7.0 4± 1 .2 6)倍 ,BFU E为 (4 .74± 1 .0 4)倍 ,CFU GM和CFU Cs则分别为 (1 .78± 0 .47)和 (1 .74± 0 .48)倍。由此可见 ,在此培养体系中以红系祖细胞的扩增最为显著。结论　小鼠骨髓单个核细胞在单纯细胞因子存在的扩增体系中具有一定的扩增其细胞总数和集落形成祖细胞数的能力 ,为进一步作体内实验判断其造血重建的功能奠定了理论基础。     

铁皮石斛培养的产业化研究

目的　筛选适宜的铁皮石斛不定芽增殖与生根培养基 ,选择适合继代扩繁的不定芽高度。方法　在相同培养条件下 ,不同高度的不定芽在不同的增殖与生根培养基中生长 ,对结果所产生的不同生长状况 ,进行显著性差异检验及综合分析。结果　不同高度的不定芽之间有显著差异 ,不同的增殖与生根培养基之间有显著差异。结论　铁皮石斛继代以 (1.2± 0 .1) cm高的不定芽为宜 ,增殖培养基以 MS添加 BA1.0 m g/ L、NAA0 .2 mg/ L 为佳 ,生根培养基以 1/ 2 MS添加 NAA 0 .2 mg/ L为佳。     

头花蓼种子发芽生物学特性研究

目的研究头花蓼PolygonumcapitatumBuch.-Ham.exD.Don种子发芽的生物学特性。方法通过不同温度和黑暗条件下的发芽试验以及浸种处理发芽试验,观察统计其发芽所需时间、发芽持续时间、发芽势、发芽率。结果头花蓼种子在10～35℃下都能发芽;10～30℃下都能发芽完全;20℃、25℃时,观察的4项指标都无显著差异,并出现最短的发芽时间(4d)和最高发芽率(93.3%)。光照能使发芽时间缩短4天,发芽势提高50.6%,但不影响发芽率。浸种处理会降低头花蓼种子的发芽势和发芽率,特别是温水浸种达到极显著水平。结论20～25℃是头花蓼种子发芽的最适温度。发芽期间给予光照能极显著缩短发芽时间和提高发芽势。浸种处理对头花蓼种子的萌发没有促进作用。     

千里光过氧化物酶基因的SSR标记及序列分析

目的研究千里光过氧化物酶(peroxidase,POD)基因结构特征和功能的关系,并根据其核苷酸序列设计SSR引物,进一步验证其在多个千里光地方种中的多态性。方法从千里光全长c DNA文库中分离到POD全长序列,运用系列生物信息学软件进行核苷酸与氨基酸的序列特征分析,分析序列中的SSR位点并对多个千里光品系进行PAGE检测和验证。结果基因具有典型的POD结构特征,表现出高度的保守性。PAGE电泳显示该引物在不同地方品系的千里光中扩增稳定,且存在明显多态性。结论研究结果拓展了对千里光POD基因序列和功能的认识,新开发标记能有效应用于POD基因的检测和育种鉴定,同时也可为其他物种的POD研究提供参考。     

虎眼万年青通过抑制CYP2E1和HIF-1α保护对乙酰氨基酚诱导的急性肝损伤(英文)

目的:通过对乙酰氨基酚体内体外实验建立急性肝损伤模型,观察虎眼万年青总皂苷的肝保护作用。方法:体内实验,小鼠预先口服给予虎眼万年青总皂苷(300,200,100mg·kg-1)或N-乙酰-L-半胱氨酸(300mg·kg-1)3次,每次间隔24小时,末次给药后2小时腹腔注射对乙酰氨基酚。体外实验,张氏肝细胞培养在含有虎眼万年青(50,100,200mg·mL-1)或N-乙酰-L-半胱氨酸(10mmol·L-1)的培养基中,同时加入对乙酰氨基酚(10mmol·L-1)培养24小时。结果:虎眼万年青总皂苷在对乙酰氨基酚诱导肝损伤12小时后具有较强的肝保护作用,抑制了血清中谷草转氨酶和谷丙转氨酶的活性,减少了脂质过氧化物的生成,提高了过氧化氢酶、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活性,抑制了细胞凋亡蛋白酶caspase-3和缺氧诱导因子-1α的表达。体外实验结果显示虎眼万年青总皂苷显著减少了对乙酰氨基酚代谢过程中关键酶细胞色素P4502E1的活性及环氧化酶2的表达。结论:虎眼万年青总皂苷对对乙酰氨基酚诱导的肝损伤具有保护作用其肝保护作用机制可能与抗氧化,抑制细胞色素P4502E1的活性和减少缺氧诱导因子1α的生成有关。