马桑内酯所致癫痫发作大鼠红细胞免疫粘附功能的研究

作者用红细胞Ｃ＿３ｂ受体花环试验和红细胞免疫复合物花环试验对马桑内酯所致癫痫发作大鼠红细胞免疫粘附功能的变化进行了观察，结果表明，癫痫组动物红细胞Ｃ＿３ｂ受体花环率明显低于对照组，而红细胞免疫复合物花环率相差不显著．提示癫痫发作可导致大鼠红细胞免疫粘附功能降低，因此在癫痫治疗中注意调整和增强患者的红细胞免疫功能具有重要意义。     

癫痫持续状态大鼠的蓝斑组织化学与图像分析研究

作者用马桑内酯致大鼠癫痫持续状态,取蓝斑用荧光组织化学方法显示去甲肾上腺素(NA),并用显微摄影自动曝光时间和图像分析两种方法测定荧光强度。结果:均显示大脑皮质包埋马桑内酯微粒的大鼠癫痫持续发作6小时后,蓝斑中NA荧光增强。用单胺氧化酶组化和图像分析法观察到该处酶活性增强。观察到在癫痫持续状态时NA起了一定的调控作用。     

大鼠马桑内酯急性局灶型癫痫大脑运动皮质的形态计量研究

用微量马桑内酯注入Ｗｉｓｔａｒ大鼠左侧前肢运动皮质，造成急性局灶型癫痫。用光镜、电镜和体视学方法研究其运动皮质第Ｖ层结构的改变。结果显示：癫痫大鼠运动皮质灶区、灶旁区的神经细胞数和胶质细胞数均分别比对照大鼠灶区和灶旁区显著减少；灶区神经毡中突触性终末数，显著减少；突触性终末的面积分数明显减少，而树突的面积分数无变化；神经胶质突起的面积分数增加。     

铜绿假单胞菌QS系统对大鼠皮肤溃疡面生物被膜形成的影响

目的 对比野生型铜绿假单胞菌及LasI和RhlI突变株铜绿假单胞菌感染大鼠皮肤溃疡创面后生物被膜形成的差异,探讨铜绿假单胞菌LasI及Rhll基凶在活体生物被膜形成中的作用.方法 制备大鼠皮肤溃疡模型,共60个创面,分成3组,前两组分别接种导人绿色荧光蛋白(GFP)质粒的野牛型铜绿假单胞菌及LasI和RhlI突变株铜绿假单胞菌,另一组不接种细菌作为空白对照组.分别于术后1、3 7 10 d切取标本,每个标本分成两等份,分别进行细菌学检测和光学显微镜及荧光显微镜观察二组上皮化及生物被膜形成情况.结果 除了第7天外,在第1、3、10天感染了野牛型铜绿假单胞菌创而组织内细菌数多于LasI及RhlI缺陷组的细菌数.空白对照组细菌数则更少,且野生组上皮化较慢,生物被膜较厚.结论 活体内LasI及RhlI基因缺损的铜绿假单胞菌生物被膜形成能力及组织感染能力均低于野生株.     

路路通内酯的化学结构

用红外,质谱,¹H,¹³CNMR和¹H-¹³CCOLOC等光谱解析,确定了新化合物路路通内酯的结构为3-羰基-11α,12α-环氧-13β-氧-齐墩果-28β-酸-13,28-γ-内酯,命名为路路通内酯。     

慢性癫痫大鼠海马内GABA_A受体γ_2亚单位的改变──原位杂交组织化学研究

将马桑内酯作腹腔注射诱发大鼠慢性癫痫动物模型。然后，对模型动物和对照动物海马组织进行ＧＡＢＡ_Ａ受体γ_２亚单位的原位杂交组织化学研究。结果表明，慢性癫痫动物海马回和齿状回内的ＧＡＢＡＡ受体γ_２亚单位ｍＲＮＡ较对照组明显减少。提示ＧＡＢＡＡ受体γ_２亚单位可能在癫痫发病机理中起一定作用。     

马桑内酯对培养的大脑皮层神经元单细胞游离钙的作用机制

目的：探讨马桑内酯致神经元损伤机制及与胞内游离钙的关系。方法：利用低密度培养的大鼠大脑皮层神经元和AR—CM—MIC离子检测系统，观察马桑内酯对神经元单细胞钙的作用及途径。结果：马桑内酯使大脑皮层神经元胞内游离钙升高，曲线可分为上升相和维持相，马桑内酯重复作用后神经元胞内高钙水平恢复到基础水平的时间延长，电压依赖性钙通道阻滞剂维拉帕米可明显阻断马桑内酯的升钙作用，而受体门控钙通道阻滞剂AP5的阻断作用不明显。结论：马桑内酯主要通过电压依赖性钙通道致神经元胞内游离钙升高，重复作用后胞内高钙水平的维持时间延长。     

银杏叶提取物及制剂萜类内酯薄层色谱荧光扫描定量测定研究

建立了采用优化条件展开的薄层色谱进行热化学衍生荧光,原位薄层定量,同板同时测定银杏内酯A,B,C及白果内酯,最低检出限分别为0.12～0.35μg。灵敏度分别为0.25～0.5μg,较HPLC示差折光检测器提高约10倍,分析时效比提高6倍以上,精密度同板RSD2%～3%,异板RSD2.3%～3.7%,回收率95.3%～98.8%。     

A continuous fluorometric assay for phospholipase A(2) activity in brain cytosol

Alterations in phospholipase A₂ (PLA₂) activity have been implicated in Alzheimer disease and other neurological disorders, although brain PLA₂ activity is currently measured using lengthy, non-continuous assays. We describe herein a rapid, continuous assay in which we measured PLA₂ activity in mouse brain cytosol (CB-57). Brains were homogenized in HEPES buffer (pH 7.5) and the cytosolic fraction was prepared by centrifugation at 25 000×g for 20 min, followed by centrifugation of the supernatant at 100 000×g for 60 min. Cytosolic protein content was determined using the Bradford assay. Pyrene labeled phosphatidylcholine was added to 50 μg of cytosolic protein in Tris buffer (pH 8.0) containing fatty acid free-bovine serum albumin for a final assay volume of 2 ml. Assay temperature was maintained at 30±1°C. The excitation wavelength was 345 nm and emission was measured at 377 nm. Fluorescence intensity was converted to molar concentrations using a standard curve. Under these conditions, bromoenol lactone inhibited up to 58% of the PLA₂ activity with an IC₅₀ of 0.5 μM. In a separate experiment, lack of appreciable alternative acylhydrolase activity was verified chromatographically. Using this method, brain PLA₂ activity can be measured in a continuous, rapid, and sensitive manner.     

大鼠马桑内酯癫痫点燃模型P-170的表达

目的：探索大鼠马桑内酯癫痫点燃模型脑部星形胶质细胞及毛细血管内皮细胞P-170的表达。方法：用发作级数评分观察马桑内酯点燃大鼠，免疫组化法测定P-170蛋白的表达。结果：点燃大鼠脑部广泛区域的P-170表达较未点燃大鼠和正常大鼠显著增强，P-170的表达与马桑内酯（CL）的剂量无相关性（P〉0．05）。结论：SD大鼠马桑内酯癫痫点燃模型可用于建立一种耐药性癫痫模型。