脱水长春碱合成新工艺

目的：合成抗肿瘤新药脱水长春碱.方法：以长春质碱和文多灵为原料经2步反应合成脱水长春碱.结果：脱水长春碱结晶物收率为34.29%,目标产物经紫外光谱、红外光谱、质谱、核磁共振氢谱得到确证.结论：新的合成方法工艺简单,操作安全,适合生产.     

反相高效液相色谱法测定长春花组织培养物中吲哚生物碱含量

目的:定量测定长春花组织培养物中的吲哚生物碱含量。方法:用反相高效液相色谱法和紫外检测器测定了长春花组织培养物中吲哚生物碱的含量。分析柱:Nucleosil5C18柱,流动相:甲醇—乙腈—0.025mol·L^-1乙酸铵—三乙胺(15∶40∶45∶0.1),检测波长:280nm,流速:1mL·min^-1。结果:色胺、蛇根碱、阿吗碱、文多灵和长春质碱的回收率分别是94.5%,95.9%,96.0%,97.0%和98.2%;平均日内精密度RSD均小于2%,日间精密度RSD均小于3%。结论:此法可有效分离和测定长春花组织培养物中吲哚生物碱含量,为进行细胞工程生产长春花生物碱提供了准确、灵敏、可靠的分析方法。     

长春花中长春质碱含量与农艺性状的分析

目的:对国内外长春花主栽品种的长春质碱含量和农艺性状进行了分析.方法:记录长春花盛花期的农艺性状,反相高效认相色谱仪测定长春质碱含量.结果:发现不同品种的长春质碱含量和农艺性状均存在很大差异,太平洋系列(Pacifica)品种Polka Dot(PPD)中长春质碱质量分数最高,达到叶片干重的3.79 mg·g~(-1);清凉系列(cooler)品种Pink(CP)中长春质碱质量分数最低,仅为叶片干重的0.9 mg·g~(-1).长春花中长春质碱含量与农艺性状之间存在一定程度的相关性.通径分析表明,长春花主要农艺性状中,节间距对长春质碱含量的正影响达到了显著水平(P<0.05),通径系数为1.473.结论:本研究对高含量长春质碱长春花引种和育种具有参考价值.     

不同长春花中3种生物碱的含量测定

目的:建立快速准确的长春花内生物碱含量测定方法,为寻找高含量品种提供方法和依据。方法:采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC),对收集到的10个长春花品种中的文多灵、长春质碱、长春碱含量进行了测定,色谱柱:Dikma Diamonsil-C18(4.6mm×250mm,5μm);流动相为A∶0.7%二乙胺(磷酸调整p H至7.2);B:乙腈:甲醇=25:40。A∶B=35∶65;流速1ml/min。柱温35℃。检测波长:280nm。结果:文多灵:Y=2.00×106X+5.46×104,r=0.9999,线性范围:0.2~4μg;长春质碱:Y=2.28×106X+8.31×104,r=0.9999,线性范围:0.2~4μg;长春碱:Y=1.76×106X-7.17×104,r=0.9999,线性范围:0.2~4μg。文多灵含量最高的是1号品种,长春质碱含量最高的是3号品种,长春碱含量最高的是2号品种,三种生物碱总和最高的是3号品种。结论:该方法简便、快速,分析准确,适合对长春花内主要生物碱做高通量的筛选。综合考虑总碱的含量和最重要的长春碱的含量,1号品种适合作为代谢调控的本体。     

真菌诱导子对长春花愈伤组织中吲哚生物碱积累的影响

目的 研究分别来源于镰刀菌Fusarium solani和黑曲霉Aspergillum niger的真菌诱导子(fungal elicitors)对长春花愈伤组织中吲哚生物碱积累的影响。方法 用真菌诱导子对长春花愈伤组织进行诱导处理后提取吲哚总碱，并用RP—HPLC法测定其中阿玛碱和长春质碱含量。结果 两种真菌诱导子对吲哚总碱及其中阿玛碱和长春质碱的积累均有较明显的正向调节作用，并且确立了真菌诱导子最佳处理时间。结论 这两种真菌诱导子对长春花愈伤组织中吲哚生物碱的积累有显著影响。     

酒石酸长春瑞滨的合成

长春质碱经间氯过氧苯甲酸氧化、三氟乙酐处理后,再与文多灵反应得到关键中间体脱水长春碱,其9'-位经1氯代苯并三唑氯代、四氟硼酸银处理缩环后,与酒石酸成盐,制得抗肿瘤药酒石酸长春瑞滨,总收率约12%.     

真菌诱导子对长春花愈伤组织中吲哚生物碱积累的影响

目的 研究分别来源于镰刀菌Fusarium solani和黑曲霉Aspergillum niger的真菌诱导子(fungal elicitors)对长春花愈伤组织中吲哚生物碱积累的影响。方法 用真菌诱导子对长春花愈伤组织进行诱导处理后提取吲哚总碱，并用RP—HPLC法测定其中阿玛碱和长春质碱含量。结果 两种真菌诱导子对吲哚总碱及其中阿玛碱和长春质碱的积累均有较明显的正向调节作用，并且确立了真菌诱导子最佳处理时间。结论 这两种真菌诱导子对长春花愈伤组织中吲哚生物碱的积累有显著影响。     

人工培植长春花中文多灵、长春质碱和长春碱的分布和积累动态

目的:研究田间栽培长春花不同发育阶段各器官文多灵、长春质碱和长春碱的含量动态以及不同器官的生物量动态,以确定人工种植长春花的最佳采收期。方法:以人工培植长春花为实验材料,采用高效液相色谱法对生长季内长春花根、茎、叶、花和果实中的文多灵、长春质碱和长春碱的含量进行动态检测。结果:这些生物碱含量受季节和组织部位的影响,叶片中文多灵和长春质碱含量最高,根中没有文多灵,花中长春碱含量最高;8-9月文多灵和长春质碱含量最高,9月以后长春碱含量最高;生物量9月初最高。结论:9月初为长春花最佳采收期。     

From the Cover: Vinca drug components accumulate exclusively in leaf exudates of Madagascar periwinkle

The monoterpenoid indole alkaloids (MIAs) of Madagascar periwinkle (Catharanthus roseus) continue to be the most important source of natural drugs in chemotherapy treatments for a range of human cancers. These anticancer drugs are derived from the coupling of catharanthine and vindoline to yield powerful dimeric MIAs that prevent cell division. However the precise mechanisms for their assembly within plants remain obscure. Here we report that the complex development-, environment-, organ-, and cell-specific controls involved in expression of MIA pathways are coupled to secretory mechanisms that keep catharanthine and vindoline separated from each other in living plants. Although the entire production of catharanthine and vindoline occurs in young developing leaves, catharanthine accumulates in leaf wax exudates of leaves, whereas vindoline is found within leaf cells. The spatial separation of these two MIAs provides a biological explanation for the low levels of dimeric anticancer drugs found in the plant that result in their high cost of commercial production. The ability of catharanthine to inhibit the growth of fungal zoospores at physiological concentrations found on the leaf surface of Catharanthus leaves, as well as its insect toxicity, provide an additional biological role for its secretion. We anticipate that this discovery will trigger a broad search for plants that secrete alkaloids, the biological mechanisms involved in their secretion to the plant surface, and the ecological roles played by them.     

长春花突变细胞生理特征的研究

目的研究以秋水仙碱处理的长春花突变细胞在继代培养过程中的生长规律、吲哚生物碱积累的规律及营养成分的适宜浓度等方面的特征,期望得到适于工业化细胞培养的理想材料。方法将突变细胞培养于MS固体培养基上,定期称取其鲜质量,用有机溶剂萃取吲哚生物碱,应用RP-HPLC法检测药用成分阿玛碱和长春质碱。结果突变细胞培养至第30代时,生长速度和吲哚总碱积累得最快,培养至第45代时,两者均明显下降。而药用成分的量于第20代达到最高;在培养基中添加适量的色氨酸能提高药用成分的量;培养基中Ca2 和Zn2 的质量浓度分别为1760和12.6mg/L时,明显促进了药用成分的积累。结论长春花突变细胞可能是一种适于工业化细胞培养的理想材料。