黄花倒水莲化学成分研究

目的：对民族药黄花倒水莲(Polygala fallax HemsI．)的化学成分进行研究。方法：采用MeOH提取，经EtOAc萃取，用柱色谱分离纯化，通过波谱方法鉴定化合物结构。结果：鉴定了8个化合物：1-羟基-2,4-二甲氧基Shan酮(I)，1，2，3-三甲氧基Shan酮(Ⅱ)，1-甲氧基-2，3-亚甲二氧基Shan酮(Ⅲ)，1，7-二羟基-2，3-亚甲二氧基Shan酮(Ⅳ)，6-羟基-1-甲氧基-2，3-亚甲二氧基Shan酮(V)，常春藤皂苷元(Ⅵ)，豆甾醇(Ⅶ)，β-谷甾醇(Ⅷ)。结论：化合物I是新天然产物，化合物V是新化合物，鉴定的8个化合物均为首次从黄花倒水莲中获得。     

远志的化学成分研究Ⅲ

目的：研究远志益智安神的有效成分，为开发治疗老年痴呆症的新药及远志的质量控制奠定基础。方法：采用硅胶柱层析和Sephadex LH-20进行纯化，通过各种光谱数据进行结构鉴定。结果：从远志根皮95％乙醇提取物的石油醚萃取物和氯仿萃取物中分离得到了9个化合物，分别鉴定为α-菠甾醇葡萄糖苷(I)，α-菠甾醇葡萄糖苷-6’-0-棕榈酸酯(Ⅱ)，豆甾醇(Ⅲ)，(28Z)-三十四碳烯酸(Ⅳ)，1，7-dimethoxy-2，3-methylenedioxyxanthone(V)，1，2，3，6，7-pentamethoxyxanthone(VI)，1，2，3，7-tetramethoxyxanthone(Ⅶ)，1，3，7-trihydroxyxanthone(Ⅷ)和1，6，7-trihydroxy-2，3-dimethoxyxanthone(IX)。结论：化合物Ⅳ新化合物，化合物I、Ⅱ和Ⅷ为首次从远志属植物中分离得到，化合物Ⅲ和Ⅸ为首次从远志植物中分离得到。     

梓白皮化学成分研究

目的 研宄梓白皮Catalpa Ovata G．Don的化学成分。方法 采用硅胶柱、Sephadex LH-20柱色谱分离纯化，通过理化常数和光谱分析鉴定化合物的结构。结果 从梓白皮分离得到7个化合物。根据波谱分析和理化数据，鉴定出其中的5个化合物分别为：梓苷(catalposide，I)、香草酸(vanillic acid，Ⅱ)、β-胡萝卜苷(β-daucosterol,Ⅲ)、十六碳酸(palmitic acid，Ⅳ)、β-谷甾醇(β-sitosterol,V)。结论 化合物I为首次从梓白皮中分离得到。     

妊娠期高血压疾病患者血清LXRα、SREBP-1c的表达和意义

目的探讨妊娠期高血压疾病患者血清肝X受体α(LXRα)、胆固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)的表达水平和意义。方法选择2017年2月至2019年8月收治的80例妊娠期高血压疾病患者纳入研究,包括妊娠期高血压组31例、轻度子痫前期组25例、重度子痫前期24例,并选择同期接受产检的60例正常妊娠孕妇作为对照组。比较4组研究对象一般资料、血脂水平、血清LXRα、SREBP-1c蛋白的表达水平。结果 4组研究对象年龄、采血孕周、孕前体质指数(BMI)比较差异无统计学意义(P>0.05)。随着疾病严重程度的增加,患者收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、24 h尿蛋白含量、TC、TG、LDL-C水平逐渐升高,HDL-C水平逐渐降低(P<0.01),血清LXRα、SREBP-1c的水平也逐渐升高(P<0.01),组间两两比较差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,血清LXRα、SREBP-1c与TC、TG、LDL-C均呈正相关关系,与HDL-C呈负相关关系(P<0.01),且血清LXRα和SREBP-1c之间呈正相关关系(r=0.576,P<0.05)。结论 LXRα、SREBP-1c在妊娠期高血压疾病患者中呈明显高表达,且和疾病严重程度密切相关,两者可能是通过调控脂质代谢等途径,参与疾病的发生和发展。     

有氧运动对非酒精性脂肪肝大鼠肝组织雷帕霉素靶蛋白、核糖体蛋白S6激酶1和固醇调节元件结合蛋白1c表达的影响

目的 观察有氧运动对非酒精性脂肪肝大鼠肝组织雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、核糖体蛋白S6激酶1（S6K1）、固醇调节元件结合蛋白1c（SREBP-1c）表达的影响。 方法 选取健康雄性SD大鼠30只,按随机数字表法分为正常组、模型组和运动组。正常组喂食基础饲料,模型组和运动组均喂食高脂饲料,运动组大鼠进行12周跑台训练。3组大鼠均于实验12周后取材,肝脏称重,并进行肝组织苏木精-伊红(HE)染色观察和肝组织炎症活动度评分,同时测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)、谷草转氨酶(AST)和谷丙转苷酶(ALT)含量的变化,采用免疫印迹方法检测肝组织mTOR、S6K1、SREBP-1c蛋白的表达。 结果 正常组大鼠肝脏组织形态学基本正常,肝索排列整齐,肝小叶结构完整清晰,未见脂肪变性及炎症细胞浸润;模型组大鼠可见弥漫性肝细胞脂肪变性,肝索紊乱,炎性细胞浸润;运动组大鼠肝索排列较模型组整齐,肝细胞脂滴明显减少,炎症细胞浸润减轻。运动组大鼠肝组织炎症活动度评分显著低于模型组(P<0.01);模型组大鼠血清TC、TG、FFA、ALT、AST水平均显著高于正常组(P<0.01);运动组大鼠血清TC、TG、FFA、ALT、AST水平均显著低于模型组(P<0.01)。模型组大鼠肝组织mTOR、S6K1、SREBP-1c的蛋白表达分别(1.12±0.24)、(1.34±0.35)、(0.84±0.12),均显著高于正常组(P<0.01);运动组大鼠肝组织mTOR、S6K1、SREBP-1c的蛋白表达分别为(0.54±0.18)、(0.61±0.21)、(0.41±0.15),均显著低于模型组(P<0.01)。 结论 有氧运动可以发挥防治非酒精性脂肪肝的作用,其机制可能与mTOR/S6K1/SREBP-1c信号通路的抑制相关。     

固醇调节元件结合蛋白1c对骨骼肌细胞胰岛素受体底物1表达调控的影响

目的 探讨固醇调节元件结合蛋白1c（SREBP-1c）对大鼠骨骼肌细胞胰岛素受体底物1（IRS-1）表达调控的影响.方法 采用酶联合消化法取2～3 d SPF级雄性SD大鼠原代骨骼肌细胞,将原代细胞分为对照组（C）、对照＋胰岛素组（C＋I）、高脂组（PA）及高脂＋胰岛素组（PA＋I）.将表达SREBP-1c腺病毒转染L6细胞,根据感染复数（MOI）分为含绿色荧光蛋白阴性载体（GFP）组、MOI值为5、50、100、200组.将靶基因为SREBP-1c的干扰RNA （siRNA）转染L6细胞,并分为空白对照组、阴性siRNA组及SREBP-1c siRNA组.Western blotting和实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测SREBP-1c、IRS-1、蛋白激酶B（Akt）基因及蛋白表达,油红O染色法检测细胞内脂质沉积情况.多组资料比较采用方差分析,两两比较采用最小显著差异法.结果 与C组相比,PA组SREBP-1c基因和蛋白水平升高（分别为2.72±0.08比1.00±0.18,3.02 ±0.19比1.00±0.05,t=15.240、18.289,均P＜0.05）,IRS-1基因和蛋白水平降低（分别为0.71 ±0.04比1.00 ±0.05,0.82 ±0.04比1.00±0.04,t=-7.960、-6.052,均P＜0.05）,丝氨酸磷酸化IRS-1蛋白表达升高,丝氨酸磷酸化Akt（p-Akt）蛋白表达下降（t=20.987、-5.869,均P＜0.05）.与GFP组相比,MOI值为50、100和200组的SREBP-1c基因和蛋白表达呈剂量依赖性上升（均P＜0.05）,IRS-1基因和蛋白表达水平呈剂量依赖性下降（均P＜0.05）.与空白对照组和阴性siRNA组相比,SREBP-1c siRNA组SREBP-1c基因和蛋白水平降低,IRS-1蛋白表达升高（均P＜0.05）.结论 SREBP-1c可抑制骨骼肌IRS-1胰岛素信号通路,参与肌细胞胰岛素抵抗的发生.     

T0901317对apoE基因敲除小鼠肝脂质蓄积及肝固醇调节元件结合蛋白-1c表达的影响

目的本文研究肝X受体(LXR)激动剂T0901317对apoE基因敲除小鼠肝脏脂质蓄积及肝脏固醇调节元件结合蛋白1-c(SREBP-1c)表达的影响。方法52只雄性apoE基因敲除小鼠被随机分成4组:基础组(n=10)对照组(n=14)、LXR激动剂治疗组(n=14)、d.LXR激动剂预防组(n=14)。各组小鼠均被给予高脂/高胆固醇饲料喂养;基础组小鼠被赋形剂灌胃处理8周;对照组小鼠被赋形剂灌胃处理14周;LXR激动剂治疗组小鼠在前8周被赋形剂灌胃处理,后6周被T0901317灌胃处理;LXR激动剂预防组小鼠被T0901317灌胃处理14周。使用HE和油红O染色方法观察小鼠肝脏脂质蓄积情况;采用实时定量PCR和蛋白质印迹方法分别检测肝脏SREBP-1cmRNA和蛋白质的表达。结果实验结果显示LXR激动剂治疗组和预防组小鼠肝脏脂质滴较对照组明显增多,组织结构排列逐渐紊乱(P<0.05);LXR激动剂治疗组和预防组小鼠肝脏SREBP-1cmRNA和蛋白质表达上调(P<0.05)。结论LXR激动剂T0901317能增加高脂高胆固醇饲料喂养的apoE基因敲除小鼠肝脏脂质蓄积并上调SREBP-1c表达。     

脂肪分化相关蛋白反义寡核苷酸降低乙酰辅酶A:胆固醇酰基转移酶活性

目的：已经发现随着细胞内胆固醇酯的积聚，脂肪分化相关蛋白的表达明显增加。本文进一步探讨脂肪分化相关蛋白干预细胞内胆固醇代谢的作用位点。 方法： Ox-LDL组为80 mg/L 氧化低密度脂蛋白与C57BL/6J小鼠腹腔巨噬细胞共同孵育，Ox-LDL+antisense组另加1 mmol/L脂肪分化相关蛋白反义寡核苷酸，在不同的时点取样，共观察4 d。使用荧光分光光度计观察细胞内胆固醇酯的改变；使用脂肪分化相关蛋白抗体间标法结合流式细胞术，观察脂肪分化相关蛋白表达量的变化；使用Ox-r［CL-3H］LDL和液体闪烁计数器观察细胞对氧化低密度脂蛋白摄入量的变化，并同时测定乙酰辅酶A:胆固醇酰基转移酶的活性。 结果： 72 h后，Ox-LDL+antisense组细胞内胆固醇酯（19.9±1.9）mg/g protein显著低于Ox-LDL组（46.6±3.4）mg/g protein。4 d观察期间，脂肪分化相关蛋白蛋白的表达量两组细胞都增加，从12 h时点开始，Ox-LDL组大于Ox-LDL+antisense组，在4 d时点，Ox-LDL组明显高于Ox-LDL+antisense组。两组细胞摄入Ox-r［CL-3H］LDL的量逐渐增加，但是，Ox-LDL+antisense组摄入量从1 d后明显低于Ox-LDL组，在2 d和4 d时点，两组差别仍有显著性。乙酰辅酶A:胆固醇酰基转移酶相对活性从6 h到2 d表现为增加，在2 d时点，两组比较差别显著，Ox-LDL+antisense组的活性明显低于Ox-LDL组。但从2 d到4 d，乙酰辅酶A:胆固醇酰基转移酶相对活性稳定。ACAT的活性与脂肪分化相关蛋白蛋白的表达量相关分析表明，Ox-LDL组R2＝0.6176 （P＜0.05），Ox-LDL+antisense组R2＝0.8212（P＜0.05）。 结论： 抑制脂肪分化相关蛋白表达能引起细胞摄入外源性脂蛋白减少和乙酰辅酶A:胆固醇酰基转移酶的活性降低，提示脂肪分化相关蛋白与脂滴的代谢功能密切相关，且乙酰辅酶A:胆固醇酰基转移酶有可能是其潜在的位点。     

甾醇调节因子结合蛋白裂解激活蛋白基因异亮氨酸796缬氨酸多态性与血脂水平关系的研究

目的：研究湖北地区健康人群甾醇调节因子结合蛋白裂解激活蛋白（SCAP）基因的异亮氨酸（Ile)796缬氨酸（Val)多态性,并分析该多态性与冠心病、高血压的关联性,及其与脂质代谢之间的关系。方法：采用聚和酶链反应－限制性片段长度多态性的分析方法。检测100名体检健康者和66例冠心病患者、57例高血压患者的Ile796Val的等位基因频率。结果：体检健康者和冠心病患者、高血压患者等位基因A的频率分别为0．32、0．45、0．42,等位基因G的频率分别为0．68、0．55、0．58,对照组冠心病组之间的基因型和等位基因的频率差异均有显著意义（P＜0．05）,总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白－胆固醇（LDL－C）、载脂蛋白B(ApoB)水平差异亦存在显著性（P＜0．01,P＜0．01,P＜0．05）,冠心病组的不同基因型的TC水平差异有显著性（P＜0．05）;高血压组虽然存在基因型的差异,A／G等位基因的频率和血脂水平差异均无显著意义,但是高血压组内不同基因型的TC、LDL－C、ApoB水平差异有意义（P＜0．05）。结论：SCAP基因的Ile796Val多态性可能引起血脂水平和组织中脂质代谢物紊乱,对于细胞内脂质代谢紊乱和高脂血症的遗传学研究具有重要意义。     

法尼醇X受体对L02细胞脂肪代谢的调节作用

目的 观察法尼醇X受体(FXR)对人肝细胞株L02细胞脂肪代谢的调节作用.方法 油酸钠建立L02细胞脂肪变模型(脂肪变组),油酸钠及鹅去氧胆酸钠建立干预模型(干预组),设对照组(培养基中不加药物),3组均设立24、48、72 h时间点.油红O染色,细胞内甘油三酯含量测定,检测肝细胞脂肪变程度;Westem blot和RT-PCR方法检测核受体FXR及固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP-1c)的表达变化.结果 脂肪变组随着肝细胞脂肪变性的发生发展,FXR表达呈逐渐降低趋势,但差异无统计学意义.SREBP-lc mRNA的表达明显升高,24、48,72 h图像半定量分析结果分别为0.495±0.062、0.579±0.064、0.612±0.067,SREBP-1c蛋白表达分别为0.394±0.044、0.488±0.066、0.543±0.064,均明显高于干预组和对照组,差异有统计学意义.干预组FXR mRNA表达明显上调,24、48,72 h分别为0.253±0.041、0.298±0.042、0.334±0.051,FXR蛋白分别为0.221±-0.022、0.313±0.041,0.341±0.046,与脂肪变组比较,,值为6.41～50.93,Jp值均<0.05或0.01,差异有统计学意义.脂变组甘油三酯含量各时间段均明显增加,干预组甘油三酯含量各时间段均明显降低.差异有统计学意义.结论 FXR表达下调与肝细胞脂肪沉积密切相关;刺激FXR表达增加可能通过抑制其靶基因SREBP-1c表达而改善L02细胞脂肪变性.