西藏胡黄连中的环烯醚萜类化学成分

目的：对常用传统中药西藏胡黄连Picrorkiza scrophulariiflora Pennell根茎中环烯醚萜类化学成分进行研究、方法：采用色谱技术进行分离，通过^1H、^13CNMR等坡谱技术确定化合物的结构。结果：分离并鉴定了7个环烯醚萜类化合物，其中3个环戊烷单萜：rehmaglutinA（1）、rehmaglutinD（2）、3＇-methoxyspecionin（3），4个环烯醚萜苷：picrosideⅡ（4）、picrosideⅠ（5）、picrosideⅢ（6）、pikuroside（7）．结论：其中化合物1,2、3和7系首次从该植物中分离得到，3为新的天然产物.     

Reversal of thioacetamide induced cholestasis by picroliv in rodents

Thioacetamide (100 and 200 mg/kg s.c.) reduced the volume of bile secretion by 33.1–50.6% and this was accompanied by a reduction in bile acids (31–54%) and bile salts (60–61%) in conscious rats and anaesthetized guinea-pigs. A significant reversal of these effects was achieved by pretreatment with picroliv, the hepato-protective principle of Picrorhiza kurrooa, in a dose dependent manner against thioacetamide-induced cholestasis. Picroliv was found to be more active than silymarin in both experimental models of cholestasis.     

西藏胡黄连醇提取物延缓5/6肾切除大鼠肾脏病变进展

目的 研究西藏胡黄连醇提取物(ethanol extract of Picrorhiza scrophulariiflora, EPS)对5/6肾切除大鼠肾脏病变进展的影响及其机制.方法 选择SD大鼠行5/6肾切除制备慢性肾脏病模型,随机分成EPS处理组和手术对照组,另设假手术组为阴性对照.9周后测定各组大鼠血尿素氮、血肌酐和肌酐清除率、24h尿蛋白定量,取肾组织检测肾小球硬化、肾间质损害程度,以及血清和尿中氧化指标.结果 (1)与手术对照组比较,EPS处理组的尿蛋白排泄率、血清尿素氮、肌酐水平均明显降低(P均<0.01),内生肌酐清除率升高;(2)EPS处理组肾小球硬化和肾小管间质损害程度较手术对照组明显减轻(P均<0.01);(3)与假手术组比较,5/6肾切除大鼠血清硒谷胱甘肽过氧化物酶(SeGSHPx)活性显著降低,24小时尿丙二醛(MDA)含量和血清晚期氧化蛋白产物(AOPPs)、晚期糖基化终产物(AGEs)含量显著升高(P均<0.01).EPS处理能够明显提高5/6肾切除大鼠血清SeGSHPx活性,降低尿MDA排泄率,以及血清AOPPs和AGEs含量(P均<0.05).结论 EPS能明显延缓慢性肾脏病大鼠的肾脏病变和肾功能恶化,其机制可能与抑制慢性肾脏病的氧化应激有关.     

胡黄连总苷抑制乙型肝炎病毒复制作用的体外研究

目的 观察胡黄连总苷抑制HepG 2.2.15细胞内HBV共价闭合环状DNA(HBVeeeDNA)的作用效果及特点.方法 分别用50 mg/L胡黄连总苷或5 mg/L阿德福韦酯的细胞培养液作用于HepG 2.2.15细胞,加药后2 d、5 d收集细胞及培养上清液,实时荧光定量PCR方法检测上清液和细胞内HBV DNA、细胞内HBV cccDNA和前基因组RNA(pgRNA)水平,分别计算抑制率.均值比较用t检验.结果 胡黄连总苷作用2 d和5 d后,上清液HBV DNA抑制率为49.74%(t=4.723,P<0.05)和79.48%(t=7.512,P<0.05);细胞内HBV cccDNA抑制率为43.55%(t=5.216,P<0.05)和56.43%(t=7.262,P<0.05),总DNA抑制率为43.39%(t=4.137,P<0.05)和63.86%(t=7.861,P<0.05),pgRNA抑制率为54.72%(t=4.532,P<0.05)和56.08%(t=4.833,P<0.05).阿德福韦酯作用2 d和5 d后,上清液HBV DNA抑制率为25.56%(t=2.874,P<0.05)和92.44%(t=10.276,P<0.05);细胞内HBV cccDNA抑制率为18.54%(t=2.736,P<0.05)和47.19%(t=6.852,P<0.05),总DNA抑制率为21.20%(t=3.206,P<0.05)和71.47%(t=8.332,P<0.05),pgRNA抑制率为11.14%(t=1.761,P>0.05)和37.61%(t=3.632,P<0.05).结论 胡黄连总苷能明显抑制HepG 2.2.15细胞内HBV复制,尤其对cccDNA具有抑制作用,在作用时相上早于阿德福韦酯,可能存在不同的作用机制.     

缺氧复氧后肾小管上皮细胞肿瘤坏死因子α的表达及胡黄连提取物对其的作用

目的观察缺氧复氧后肾小管上皮细胞肿瘤坏死因子α（TNFα）的表达及胡黄连提取物对其的影响。方法建立人肾小管上皮细胞缺氧复氧损伤模型,分别用不同浓度胡黄连提取物（10μg／mL、100μg／mL、1000μg／mL）进行预处理,采用流式细胞术检测不同组细胞内氧化应激水平,ELISA法检测细胞上清TNFα蛋白表达、RT—PCR法测定细胞TNFα mRNA表达。结果缺氧复氧后肾小管上皮细胞内氧化应激水平提高,细胞TNFα蛋白和mRNA表达上调,且随缺氧时间的延长,细胞内氧化应激水平逐渐升高,TNFα表达逐渐增强;胡黄连提取物呈剂量关系抑制细胞内氧化应激水平,同时呈剂量关系抑制TNFα表达的上调。结论缺氧复氧导致肾小管上皮细胞内氧化应激增强,进而诱导TNFα表达上调;胡黄连提取物可以通过抑制细胞内氧化应激抑制TNFα的上调。     

胡黄连总苷的高效液相色谱特征图谱研究

目的 采用高效液相色谱法建立胡黄连总苷的特征图谱。方法 Luna C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈–0.5%冰醋酸水溶液（15.5∶84.5）,体积流量为1.0 mL/min,柱温为35 ℃,检测波长为275 nm,进样量为10 μL。结果 建立了胡黄连总苷的特征图谱及其技术参数,即供试品特征图谱中应有11个特征峰,参照物峰相应的峰为S峰,计算各特征峰与S峰的相对保留时间,其相对保留时间应在规定值的±5%之内。采用国家药典委员会《中药色谱指纹图谱相似度评价系2004A版》自动处理,10批胡黄连总苷的相似度均大于0.998。结论 本方法操作简便,准确可靠,可用于控制胡黄连总苷的内在质量。     

复方胡黄连对D-半乳糖致急性肝损伤的保护作用及机制

目的 探讨复方胡黄连对D-半乳糖致急性肝损伤的保护作用及机制.方法 昆明种小鼠60只,随机分为空白对照组,模型对照组,阳性对照药肝加欣组(545 mg/kg),复方胡黄连高(34 mg/kg)、中(17 mg/kg)、低(8.5 mg/kg)剂量组,每组10只,连续灌胃7 d,于第7天早6:00灌胃给药,2 h后造模,除空白对照组外,其余各组腹腔注射0.1%D-半乳糖,体积为0.3 mL/10 g,24 h后摘眼球取血,用全自动生化分析仪测定ALT、AST,取出肝脏组织,根据试剂盒的要求测定SOD、MDA的含量.结果 复方胡黄连对D-半乳糖致小鼠急性肝损伤的治疗,模型组与空白组比较,其血清ALT和AST均明显升高(P<0.01),肝组织中SOD显著降低,MDA含量显著升高.复方胡黄连各给药组与模型组比较,均能显著降低血清ALT和AST含量(P<0.01),升高肝组织中SOD活性,降低MDA含量(P<0.01),改善其损伤的病理结构.结论 复方胡黄连对D-半乳糖致小鼠急性肝损伤的治疗,能显著降低血清ALT、AST活性,升高肝组织中SOD含量,降低MDA含量.     

胡黄连浸渍法提取最佳工艺条件的筛选

目的 探讨浸渍法提取胡黄连的最佳工艺条件.方法 采用浸渍法提取胡黄连,用不同浓度乙醇进行试验,确定提取溶剂;以提取的粒度、料液比、时间、温度为主要影响因素,胡黄连浸膏量为评价指标,采用单因素实验及正交实验对提取工艺进行优化设计,确定浸渍法提取胡黄连的最佳工艺条件.结果 浸渍法提取胡黄连浸膏的最佳乙醇浓度为80%;对胡黄连浸膏量的影响程度依次为粒度>料液比>温度>时间,其中粒度、料液比、温度对浸膏量的影响具有统计学意义(P<0.05);提取条件为粒度20目、料液比1 ∶25、时间75 min、温度80℃时,浸膏量最高.结论 浸渍法提取胡黄连,方法简单合理,其最佳工艺条件为粒度20目、料液比1 ∶25、时间75 min、温度80℃.     

西藏胡黄连中1个新的裂环环烯醚萜苷类成分

目的 对西藏胡黄连Picrorhiza scrophulariiflora的化学成分进行研究。方法 采用多种色谱方法进行分离纯化,运用多种谱学方法鉴定化合物的结构。结果 从西藏胡黄连的90%乙醇提取物中分离得到4个化合物,分别鉴定为藏黄连环烯醚萜苷D（1）、獐芽菜苷（2）、龙胆苦苷（3）、甘露醇（4）。结论 4个化合物均为首次从该植物中分离得到,其中化合物1为新的环烯醚萜苷类化合物,命名为藏黄连环烯醚萜苷D。     

胡黄连总苷中胡黄连苷Ⅰ、Ⅱ质量分数测定

目的 建立胡黄连总苷中胡黄连苷Ⅰ、Ⅱ和胡黄连总苷的质量分数测定的方法.方法 采用HPLC法测定胡黄连总苷中胡黄连苷Ⅰ、Ⅱ的质量分数,流动相为乙腈-0.5％冰醋酸水溶液(15.5∶84.5),积体流量为1.2 mL/min,柱温为35℃,检测波长为275 nm.结果 胡黄连苷Ⅰ、胡黄连苷Ⅱ进样量分别在0.128 0～1.280 0μg(r=0.999 6)和0.250 6～2.506 0μg(r=0.999 6)范围内线性关系良好,平均回收率分别为98.59％,97.33％;RSD分别为1.57％,1.35％.结论 该方法灵敏,准确,专属性强,可用于胡黄连总苷的质量控制.