O-羧甲基N-半乳糖化壳聚糖衍生物的设计、合成和表征

目的：合成和表征O-羧甲基-N-半乳糖化壳聚糖衍生物作为潜在的肝靶向基因载体。方法：以天然聚合物壳聚糖为原料，首先制备得O-羧甲基壳聚糖，然后在其2-NH2上和乳糖酸反应，制得O-羧甲基-N-乳糖酰化壳聚糖；或与乳糖反应，用KB}14还原，制得O-羧甲基-N-乳糖胺化壳聚糖。结果与结论：分别用VF-IR、^1H NMR、^13C NMR和元素分析对其进行了表征。用粉末X-衍射、DSC、TG对其物理性质进行了分析。制得的O-羧甲基-N-乳糖酰化壳聚糖O-羧甲基-N-乳糖胺化壳聚糖有望作为潜在的肝靶向基因载体。     

N-亚甲基磷酸盐壳聚糖衍生物的设计、合成和表征

目的：合成和表征N-亚甲基磷酸盐壳聚糖衍生物作为潜在的肝靶向基因载体：方法：以天然聚合物壳聚糖为原料，与甲醛和磷酸反应，制得双取代的N-亚甲基磷酸壳聚糖，然后在其剩余的2-NH2和乳糖酸反应，制得N-亚甲基磷酸-N-乳糖酰化壳聚糖；与乳糖反应，用KBH4还原，制得N-亚甲基磷酸-N-乳糖胺化壳聚糖。结果与结论：分别用FTIR、1HNMR、13CNMR和元素分析对其进行了表征。用粉末X-衍射、DSC、TG对其物理性质进行了分析。制得的N-亚甲基磷酸壳聚糖、N-亚甲基磷酸-N-乳糖酰化壳聚糖和N-亚甲基磷酸-N-乳糖胺化壳聚糖的取代度分别为1．22，0．23和0．21，所制得的栽体有望作为潜在的肝靶向基因载体：     

新型肝靶向载体N-乳糖酰化壳聚糖的制备与表征

目的：将肝靶向基团半乳糖基引入到壳聚糖的结构中，制备N-乳糖酰化壳聚糖。方法：以天然聚合物壳聚糖为原料，在其2-NH2引入乳糖酸，制得酰化产物，用FTIR、^13CNMR,^1HNMR时其进行表征。用粉末X衍射、DSC、TG对其物理性质进行分析。结果与结论：制得了新型的取代度为20%的N-取代的乳糖酰化壳聚糖载体。     

肝靶向性纳米载体介导psiRNA对HepG2细胞HLA-E干扰效率的检测

目的：检测肝细胞靶向性Gal-PEG-PEI纳米基因载体介导psiRNA干扰HepG2细胞HLA-E表达的效率。方法：分别用Gal-PEG-PEI/psiRNA、裸psiRNA、PEG-PEI/psiRNA、Gal-PEG-PEI/NC-psiRNA、Lipofectamine 2000/psiRNA转染HepG2细胞,同时以未转染的HepG2细胞为空白对照组,以Gal-PEG/NC-psiRNA（无义siRNA质粒）转染为阴性对照组。48 h后,Real-time RT-PCR检测HLA-EmRNA表达水平,Western blot法检测HLA-E蛋白表达水平。结果：Gal-PEG-PEI组对HLA-E的干扰效率为55%（mRNA水平）和62%（蛋白水平）,显著高于Lipofectamine 2000组、PEG-PEI组、裸psiRNA组和阴性对照组（P〈0.01）。结论：Gal-PEG-PEI/psiRNA纳米粒具有良好的肝细胞靶向性,对HepG2细胞HLA-E有较高的干扰效率。     

新型融合多肽HTPP-MDC体外抑制HBV复制活性及亚细胞定位

 目的： 研究肝细胞靶向穿膜肽-家蝇天蚕素（HTPP-MDC）融合多肽体外对乙型肝炎病毒（HBV）的抑制作用及其在肝细胞中的定位。方法：不同浓度HTPP-MDC分别与HepG2.2.15细胞和Chang liver细胞共培养,用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测药物对细胞的毒性作用,应用ELISA和实时荧光定量 PCR技术定量研究HTPP-MDC对HepG2.2.15细胞系分泌HBsAg、HBeAg及HBV DNA复制的影响。应用激光共聚焦技术研究HTPP-MDC在肝细胞中的定位。结果：HTPP-MDC 在体外能有效抑制HepG2.2.15细胞系分泌HBsAg和HBeAg,对HBV DNA的复制亦有显著抑制作用。激光共聚焦显微镜观察显示HTPP-MDC进入细胞内部。结论：HTPP-MDC在体外对 HBV 复制有较强的抑制作用,并能快速透过细胞膜进入细胞内,有望用于临床治疗慢性乙型肝炎相关疾病。