羟基红花黄色素(HSYA)纯化条件的影响

目的探讨纯化羟基红花黄色素A（HSYA）的影响因素。方法用HPLC法测定，以HSYA百分舍量为指标，考查醇沉浓度．药液浓度及pH值对HSYA纯化的影响。结果醇沉浓度对HSYA的纯化影响较大，其次为药液浓度和pH值，而且先调pH值后醇沉得到的HSYA舍量更高。结论80％的乙醇沉淀．药液浓度为料液比2：1，pH值为6．5，是最佳工艺条件。     

羟基红花黄色素A在急性脊髓损伤中对细胞凋亡的影响

目的：观察羟基红花黄色素A(HSYA) 在急性脊髓损伤（ASCI）中的治疗作用及潜在机制。方法：SD 大鼠随机分为空白对照组、损伤对照组和HSYA治疗组，采用ALLEN’S打击法建立急性脊髓损伤模型，各组分别于术后1、7、14d观察其行为学评分，14d通过免疫组化的方法观察脊髓损伤部位神经细胞凋亡(caspase-3p20、Bcl-2与Bax)。结果：（1）行为学观察评分：HSYA治疗组与损伤对照组下肢功能均有恢复(P＜0.05），且HSYA治疗组恢复更明显(P＜0.05）；（2）免疫组化检测：caspsase-3阳性细胞数HSYA治疗组表达较损伤对照组少(P＜0.05）；Bcl-2阳性细胞HSYA治疗组的表达较损伤对照组多(P＜0.05）；Bax阳性的细胞HSYA治疗组的表达较损伤对照组少(P＜0.05）。结论：HSYA在急性脊髓损伤中具有抑制神经细胞凋亡，减少了脊髓损伤部位的继发性损伤，从而促进功能的恢复的作用，因此HSYA有可能成为治疗脊髓损伤的药物之一。     

羟基红花黄色素A和三七总皂苷对高脂血症的影响与机制研究

目的: 研究比较羟基红花黄色素A(HSYA)和三七总皂苷(PNS)对高脂血症大鼠的血脂及动脉粥样硬化相关炎症因子的作用和机制。方法：以高脂血症大鼠为模型,辛伐他汀为阳性对照药品,分别给予实验组大鼠不同剂量的HSYA和PNS,给药期满后取血测定大鼠血脂及CRP、IL-10和IL-6。结果：HSYA高剂量组可显著降低TC、TG,升高HDL-C,但大鼠死亡率最高;低剂量组则可显著降低CRP、IL-6,升高IL-10;PNS高、中剂量组可显著降低TC、TG和LDL-C,各剂量组对IL-6、IL-10和CRP的作用不明显,大鼠死亡率低。结论：HSYA低剂量给药具有抗炎作用,同时安全性高,临床应用建议以低剂量抗炎作用为主。治疗剂量下PNS的降血脂与抗炎作用均不优于辛伐他汀和HSYA,可认为其用于动脉粥样硬化的作用位点与HSYA不同,在临床应用时也应当考虑其适应症区别。     

羟基红花黄色素A冻干粉针剂对血小板活化因子致大鼠脑皮质线粒体损伤的保护作用

目的观察羟基红花黄色素A冻干粉针剂对血小板活化因子（PAF）引起的线粒体损伤的保护作用。方法采用PAF诱导剂,对分离的大鼠脑线粒体进行体外损伤试验。损伤后线粒体给予羟基红花黄色素A（HSYA）冻干粉针剂温育,观察试验前后线粒体膜流动性、肿胀度和超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量的变化。结果PAF可降低线粒体膜流动性、增加线粒体的肿胀度、减少SOD含量、增加MDA含量;给予不同剂量的HSYA冻干粉针剂后,线粒体膜流动性增强、膜肿胀度降低、SOD含量上升、MDA含量下降。结论PAF可使大鼠脑皮质线粒体结构和功能受损,而羟基红花黄色素A冻干粉针剂对其有明显的保护作用。     

羟基红花黄色素A缓解大鼠心肌细胞凋亡作用的研究

目的 以整体和离体实验观察羟基红花黄色素A (HSYA) 缓解心肌细胞凋亡的作用。方法 以异丙肾上腺素 (ISO) 造成大鼠急性心肌缺血,以 TUNEL 法检测心肌组织细胞凋亡,免疫组化法和 RT-PCR 法观察心肌组织中 bax、bcl-2 基因表达的变化;用缺糖缺氧/再复氧模型诱导原代培养心肌细胞凋亡,以 PI 流式细胞法观察凋亡情况,以 Rhodamine 123 荧光法考察线粒体膜电位的变化。结果 60、120、240 mg/kg HSYA ip 给药可以减轻心肌缺血大鼠的线粒体肿胀、核凝集及固缩,降低心肌细胞凋亡率 (P＜0.01),下调心肌组织 Bax 蛋白 (P＜0.05) 及 bax mRNA 的表达 (P＜0.01)。0.64、1.3、2.5 mmol/L HSYA 可减少缺氧/再复氧造成的细胞凋亡 (P＜0.05),且可缓解该损伤造成的心肌线粒体膜电位下降 (P＜0.05)。结论 抑制心肌细胞凋亡是 HSYA 缓解心肌缺血的重要机制。     

大孔树脂柱色谱法制备红花黄色素和羟基红花黄色素A

目的 建立简便有效的制备红花有效部位红花黄色素(safflor yellow，SY)及有效成分羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A，HSYA)的方法。方法 室温水提减压浓缩所得红花水提液上D-4020型非极性大孔树脂柱，水洗脱糖类等杂质，以30％和10％乙醇洗脱分别得SY和HSYA；采用分光光度法和HPLC法分析水洗脱除糖过程中SY和HSYA的损失率及醇洗脱SY和HSYA的回收率。结果 聚酰胺薄膜色谱结果显示SY和HSYA洗脱液分别可见4～5个和1个黄色荧光斑点。HPLC分析结果表明，两洗脱液中所含SY和HSYA纯度分别为92．4％和83．0％。在水洗除杂质和稀醇洗脱过程中，损失率和回收率分别为SY：7．5％和80．6％，HSYA：1．64％和77．3％。结论 本法适于大规模制备SY和HSYA。     

羟基红花黄色素A人工抗原的制备

目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)的偶联方法,获得具有免疫原性的羟基红花黄色素A人工抗原。方法通过偶联物透析液的颜色变化、紫外图谱、红外扫描图谱及动物免疫试验来鉴定制备的人工抗原。结果HSYA-BSA人工抗原在紫外扫描中表现出HSYA和BSA的特征吸收峰;在红外扫描中HSYA-BSA具有HSYA特征官能团的吸收峰和氨基酸的特征吸收峰;间接ELISA检测结果显示产生抗HSYA的特异性抗体,血清效价可达1∶3 200;标准曲线方程计算得BSA和HSYA的结合率是1∶50。结论通过直接偶联法成功制备出具有免疫原性的羟基红花黄色素A人工抗原。     

羟基红花黄色素A注射剂对家兔血小板聚集、超微结构及血浆GMP-140含量的影响

目的:观察羟基红花黄色素A(HSYA)注射剂对家兔血小板聚集功能及超微结构的影响。方法:采用体内实验法,观察三种剂量的羟基红花黄色素A注射剂(10mg/kg、5mg/kg和2.5mg/kg)对由花生四烯酸(AA,0.35mmol/L)、二磷酸腺苷(ADP,300μmol/L)和血小板活化因子(PAF,3.6nmol/L)诱导的家兔血小板聚集作用的影响,以及血小板超微结构的变化;并单独研究了以PAF为诱导剂的情况下,血浆GMP-140的含量。结果:各剂量HSYA注射剂(10mg/kg、5mg/kg和2.5mg/kg)能抑制AA、PAF诱导的家兔血小板聚集;扫描电镜显示,各剂量HSYA注射剂能减少AA和PAF诱导后的聚集型血小板数量并使树突型血小板突起变少变短;另外,各剂量HSYA注射剂还能降低GMP-140的含量。结论:羟基红花黄色素A注射剂具有显著的抗PAF诱导的血小板聚集作用,抑制血小板的活化,从而为临床抗血小板聚集药物的使用提供更多选择。     

羟基红花黄色素A对卵巢癌细胞PI3K/Akt信号通路的影响

目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)对人顺铂耐药的卵巢癌A2780/DDP细胞株顺铂耐药性的逆转作用及具体机制。方法培养A2780/DDP细胞,接种至20只BALB/C雌性裸鼠,按随机数字表法分为对照组、红花组、顺铂组和联合组,每组5只,均采用腹腔注射给药的方式,对照组予0.9%氯化钠溶液,顺铂组按3mg/kg剂量给予顺铂,红花组按1.1g/kg给予HSYA,联合组予HSYA(1.1g/kg)联合顺铂(3mg/kg),每3天给药1次,连续给药4周。第5周后处死小鼠,解剖取瘤记录瘤重并计算抑瘤率,HE染色观察各组肿瘤的病理改变,Western blot检测Akt、p-Akt蛋白表达。结果对照组瘤重(4.71±0.17)g,顺铂组瘤重(3.53±0.28)g,抑瘤率25.08%,红花组瘤重(4.54±0.25)g,抑瘤率3.61%,联合组瘤重(2.76±0.17)g,抑瘤率41.36%。与对照组和顺铂组相比,联合组的肿瘤质量下降(P0.05),抑瘤率明显增加(P0.05);HE染色显示,与顺铂组比较联合组肿瘤坏死程度更高;Western blot结果示,对照组Akt蛋白相对表达水平为(0.61±0.11),顺铂组为(0.62±0.09),红花组为(0.42±0.10),联合组为(0.44±0.07)。与对照组比较,顺铂组Akt、p-Akt蛋白表达无统计学差异(P0.05),与对照组与顺铂组比较,红花组与联合组的Akt、p-Akt蛋白表达较低,差异有统计学意义(P0.05)。结论 HSYA可能通过下调PI3K/AKT通路的关键组分Akt、p-Akt蛋白,来增强A2780/DDP对顺铂的化疗敏感性,逆转顺铂耐药。     

羟基红花黄色素A磷脂复合物的制备及理化性质研究

目的:确定羟基红花黄色素A与大豆磷脂形成复合物的最佳工艺,并对其理化性质进行研究.方法:以羟基红花黄色素A与大豆磷脂的复合率为评估标准,采用单因素考察进行系统研究,对所制得的复合物进行UV、DSC、IR等分析,并考察其在正辛醇中的溶解性能.结果:该制备方法的复合率达98.7%,研究表明羟基红花黄色素A磷脂复合物是以非共价键结合;羟基红花黄色素A磷脂复合物明显改善羟基红花黄色素A在正辛醇中的溶解性能.结论:羟基红花黄色素A磷脂复合物的形成受反应溶剂和反应物料比例的影响较大;复合物的脂溶性有较大提高.