朝鲜淫羊藿酸性多糖的理化特性及对HepG2细胞脂质堆积的改善作用＊

目的 对比研究朝鲜淫羊藿酸性多糖酯化还原前后的理化特性，并探讨其改善油酸诱导的肝癌HepG2细胞脂质堆积活性的差异。方法 采用高效凝胶渗透色谱法测定朝鲜淫羊藿酸性多糖（EFPA）的均一性和分子量，高效液相色谱法测定EFPA和酯化还原后朝鲜淫羊藿酸性多糖（EFPA-R）的单糖组成；采用油酸（OA）处理HepG2细胞诱导建立脂质蓄积模型，不同浓度EFPA与EFPA-R（10、30、100、300 μg·mL^-1）分别和OA共同作用于细胞24 h，采用CCK-8试剂盒测定细胞存活率，油红O染色观察细胞内脂滴蓄积情况，并采用试剂盒测定细胞内总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）含量。结果 EFPA为成分均一的多糖组分，分子量为125.8 kDa，由甘露糖、葡萄糖、半乳糖、葡萄糖醛酸和阿拉伯糖组成，摩尔比为1.7∶7.4∶1.4∶1.8∶1.0，葡萄糖占比最大，EFPA-R由甘露糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成，摩尔比为0.8∶10.6∶2.1∶1.0；在10-300 μg·mL^-1范围内，EFPA和EFPA-R对HepG2细胞的抑制作用较弱，作为给药浓度；与空白组相比，模型组细胞中TC、TG含量显著升高（P < 0.01），细胞内红色脂滴显著增多，与模型组相比，EFPA可显著降低细胞中TC、TG含量（P < 0.01），明显减少细胞内红色脂滴（P < 0.05或P < 0.01），EFPA-R干预后细胞则无明显变化。结论 EFPA可明显改善HepG2细胞脂质堆积情况，且呈现剂量依赖性，而半乳糖醛酸（GalA）的存在可能是其抑制HepG2细胞脂质蓄积的关键因素。     

贯众提取液对革兰氏阳性球菌的抑菌作用

目的：了解贯众(Dryopteris crossirhizomz)不同提取液对革兰氏阳性球菌的抑菌作用。方法：分别用水以及3种不同pH值的70％乙醇为溶媒提取贯众干品以制备贯众提取液，利用打孔法和试管稀释法测定提取液对13种微生物的抑制效果。结果：每1ml含生药1g的贯众醇提液、水提液对革兰氏阳性菌有较强的抑制作用，尤其是革兰氏阳性球菌如金黄色葡萄球菌和甲型溶血性链球菌等。对革兰氏阴性菌和真菌的抑制作用较弱，但对普通变形杆菌则有较强的抑制作用。不同pH值的抽提溶剂对药物的有效抑菌成份的提出效果不同，抽提溶剂pH越小，有效成份的提出效果越好。结论：贯众醇提液、水提液对革兰氏阳性菌有较强的抑制作用，尤其是对革兰氏阳性球菌，而对革兰氏阴性菌和真菌的抑制作用则较弱。贯众的抗菌成份易溶于水，抽提效果随pH减小而增加。     

鳞毛蕨属植物化学成分研究进展

目的：对鳞毛蕨属植物化学成分的研究进展进行综述。方法：总结有关鳞毛蕨属植物化学成分的研究文献，综述鳞毛蕨属植物所合化学成分的种类、数量、结构、提取分离方法及结构鉴定。结果：到目前为止已从鳞毛蕨属植物中分离出间苯三酚类化合物58种，菇类化合物13种，黄酮类化合物4种，而且该属植物具有多种生理活性。结论：我国鳞毛蕨属植物资源丰富，应将化学成分的研究与药理活性的研究紧密结合，从而更好地开发利用该属的植物资源。     

大孔吸附树脂分离肿节风中总黄酮的研究

目的考察11种大孔吸附树脂对肿节风总黄酮的吸附分离性能。方法采用静态吸附分离法确定适合的大孔吸附树脂;采用动态吸附分离法确定分离条件。以总黄酮吸附量、总黄酮质量分数和回收率为考察指标,采用紫外分光光度法测定总黄酮。结果HPD 400大孔吸附树脂对肿节风总黄酮有良好的吸附分离性能,其分离肿节风总黄酮的工艺条件为:肿节风总黄酮上样质量浓度为10 m g/mL,肿节风总黄酮最大吸附量为9.5 m g/mL,吸附体积流量为2.5 mL/m in,洗脱剂为70%乙醇,洗脱剂用量为3倍柱体积,树脂可重复使用3次。结论采用HPD 400大孔吸附树脂吸附分离肿节风总黄酮简便有效,总黄酮回收率为85%左右。     

高乌头炮制品的HPLC指纹图谱研究及其2种生物碱成分含量测定

目的 建立不同产区高乌头炮制品的HPLC指纹图谱,并测定2种生物碱成分的含量,为高乌头制品质量控制提供参考依据。方法 通过HPLC梯度洗脱建立高乌头炮制品的指纹图谱,并采用中药指纹图谱相似度评价系统(2012版)、主成分分析(PCA)和聚类分析(CA)对指纹图谱进行分析。结果 建立了高乌头炮制品指纹图谱,10批高乌头制品的相似度均大于0.90,标定共有峰18个,并对其中2主要成分(高乌甲素、冉乌头碱)进行含量测定;聚类分析(CA)将所有批次高乌头制品分为4类,反映了10批不同产区高乌头制品的质量特征;主成分分析(PCA)筛选出累计贡献率达到88.824%的4个主成分,得到决定高乌头药材质量7个化学成分。结论 该方法重现性好、特征性强可用于高乌头炮制品全面质量评价。     

Effects of Ixeris Chinensis (Thunb.) Nakai Boiling Water Extract on Hepatitis B Viral Activity and Hepatocellular Carcinoma

Background

Hepatitis B virus (HBV) infection and hepatocellular carcinoma are major diseases that affect the Taiwanese population. Therefore, the development of an alternative herbal medicine that can effectively treat these diseases is a research target. In this study, we tested Ixeris Chinensis (Thunb.) Nakai boiling water extract (ICTN BWE) in vitro and analysed its effects on the HBV and liver cancer.

Materials and Methods

We used a human liver cancer cell line (Hep3B, a cell line that continuously secretes HBV particles into a medium) as an experimental model for the screening of various ICTN BWE concentrations and their effects on the HBV in vitro.

Results

Our results showed that 75 µg/mL ICTN BWE downregulated the relative expression of the hepatitis B virus surface antigens (HBsAg) to 77.1%. Using the human liver cancer cell lines HuH-7 and HepG2, and 3-(4,5-dimethylthiazol-zyl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) and tumour clonogenic assays, we then showed that ICTN BWE inhibits hepatocellular carcinoma growth.

Conclusion

Fluorescent microscopy of DAPI(4′,6-Diamidino-2-phenylindole)-stained nuclei and DNA fragmentation assays confirmed the inhibitory effects of ICTN BWE on liver tumour cell growth through induction of apoptosis.     

HPLC法测定草珊瑚中富马酸含量的方法学研究

目的:建立高效液相色谱测定草珊瑚中富马酸含量的方法。方法:采用高效液相色谱法,固定相为Dia-monsil C18柱(5μm,250×4.6mm),以乙腈-水-磷酸(2:98:0.05)作为流动相,检测波长为208nm。结果:富马酸在54.35~434.8μg范围内线性关系良好,r2=0.9999,平均回收率为99.95%,RSD=1.33%。结论:该方法操作简单、准确,重复性好,可适用于草珊瑚药材的质量控制。     

夏枯草属药材指纹特征聚类分析评价

目的:采用HPLC方法建立不同产地夏枯草属药材指纹图谱,并对其进行聚类分析评价。方法:建立高效液相指纹图谱分析方法,色谱柱为Alltima C18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为甲醇-0.5%冰醋酸溶液梯度洗脱;流速为1.0ml/min;检测波长:280nm;进样量20μl;柱温为30℃。测定了3个品种不同产地的夏枯草属药材指纹图谱,并对其聚类分析。结果:不同产地药材指纹图谱特征有明显差异,湖北、安徽、江西、贵州、广西、四川产地药材归为1类;河南、江苏、浙江3个产地夏枯草归为1类。结论:建立的指纹图谱能明显的反应出各个产地药材的特征,且聚类分析有效的区分药材的归属性。     

香鳞毛蕨有效部位对红色毛癣菌体外抗真菌的作用

目的 采用试管稀释法和CLSI M38-A2微量液基稀释法研究香鳞毛蕨有效部位(简称DF)对红色毛癣菌的体外抗真菌作用,并比较两种方法的一致性.方法 利用两种方法测定DF对红色毛癣菌标准株(6株)和临床分离菌株(7株)的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MFC).结果 试管稀释法测定DF对13株红色毛癣菌的MIC范围为生药0.469～ 15.0 mg/mL;MFC范围为生药0.938～ 15.0 mg/mL.其中DF对标准菌株MIC范围为生药0.469 ～ 7.5 mg/mL,几何均值为2.652 mg/mL,MFC范围为生药0.938～ 15.0 mg/mL,几何均值为3.750 mg/mL.微量稀释法测定DF对红色毛癣菌标准菌株的MIC范围为生药0.312 5～5.0 mg/mL,几何均值为1.25 mg/mL;其MFC范围为生药1.25 ～ 20.0 mg/mL,几何均值为5.0 mg/mL.结论 香鳞毛蕨有效部位对红色毛癣菌有抑菌作用和杀菌作用,两种方法的测定结果有较好的一致性.     

连钱草提取物对炎症递质的影响

目的 研究连钱草提取物对炎症递质（PGE2、组胺、5 羟色胺等）的影响，探讨连钱草提取物的抗炎作用机制。方法分别制作二甲苯所致小鼠耳肿胀、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加、角叉菜胶致小鼠足肿胀、蛋清致小鼠足组织炎症等模型，考察连钱草水提物（1 g·mL^-1）和醇提物（1 g·mL^-1）对模型小鼠组织中炎症递质的影响，测定炎症组织中PGE2、5-羟色胺和组胺相对含量。结果连钱草水提物与醇提物对二甲苯致小鼠耳肿胀均有显著的抑制效果；对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性亦有显著抑制效果；连钱草醇提取物对角叉菜胶所致小鼠肿胀足组织中PGE2释放无抑制作用，而水提物则有明显的抑制作用；连钱草水提物对蛋清所致小鼠肿胀足组织中组胺的释放有明显抑制作用，但连钱草醇提物无该作用；连钱草水提物对蛋清所致小鼠肿胀足组织中5 羟色胺的释放有明显抑制作用（P＜0.05），连钱草醇提物作用较水提物小。结论 连钱草提取物通过抑制内源性炎症递质5 羟色胺和组胺的释放而发挥抗炎作用，水提物抗炎作用较醇提物明显。