正交试验设计结合熵权TOPSIS优选阿胶珠炮制工艺

目的 优选阿胶珠的炮制工艺。方法 采用L₉（3⁴）正交试验设计,以外观性状、水分、总灰分、特征多肽及氨基酸含量为指标,以炮制时间、炮制温度、每锅辅料用量为考察因素,结合直观分析、方差分析和熵权逼近理想解排序法（TOPSIS）对正交试验结果进行评价,优选阿胶珠炮制工艺,并进行炮制工艺验证。结果 优选的阿胶珠炮制工艺参数为炮制时间5 min、炮制温度190 ℃、蛤粉-阿胶为30∶1;验证实验中3批样品各指标的RSD为2.09%~4.91%。结论 优选的阿胶珠炮制工艺合理可行,可为阿胶珠工业化炮制生产提供参考。     

阿胶酶解物抗氧化肽的分离与质谱分析

采用阴离子交换纤维及Sephadex G-25柱色谱法对阿胶酶解物进行分离纯化,以DPPH,ABTS法对阿胶酶解物及其不同部位进行体外抗氧化能力测定,从阿胶酶解物中筛选出体外抗氧化活性最强的部位,命名为GFC-1.GFC-1质量浓度为2.0g·L-1时对DPPH清除率为47.95％,0.40 g· L-1时对ABTS清除率为97.20％;利用LC-ESI-MS/MS结合TurboSEQUEST检索软件及Swiss-Prot数据库从GFC-1中鉴定出9个小分子肽,并从中识别出高重复核心序列GPAGPP* GPP*(P*为羟脯氨酸).     

Collagen derived species-specific peptides for distinguishing donkey-hide gelatin (Asini Corii Colla)

Objective: As an important food therapy product with traditional Chinese medicine (TCM) applications, donkey-hide gelatin (Asini Corii Colla, ACC) has been used for thousands of years. However, till now no effective strategy had been proposed to distinguish ACC from other animal hide gelatins, especially closely related horse- and mule-hide gelatins, which was an embarrassment of ACC quality control. Methods: Combined mass spectrometry and bioinformatic methods have been applied to identify and verify two ACC-specific peptides (Pep-1 and Pep-2) capable of distinguishing ACC from other closely related animal gelatins with high selectivity. Results: It confirmed that these two peptides could be not only used for distinguishing ACC from highly homologous horse-hide and mule-hide gelatins as well as other animal hide gelatins. Conclusion: The present study provides a simple method for species-specific peptides discovery, which can be used for assessing the quality of animal gelatin products, and ensure they are authenticable and traceable.     

小分子阿胶对小鼠免疫功能的影响

目的 研究小分子阿胶对小鼠免疫功能的调节作用。方法 将ICR小鼠随机分为对照组、模型组、生血丸3.00 g/kg组和小分子阿胶3.00、1.50、0.75 g/kg组,ig给药14 d,ip环磷酰胺或氢化可的松建立免疫低下模型,用鸡红细胞诱导小鼠溶血素,测定小鼠血清溶血素水平,观察小分子阿胶对体液免疫的影响;采用二硝基氯苯诱导小鼠耳廓肿胀,检测小鼠耳廓肿胀度,观察小分子阿胶对细胞免疫的影响;利用流式细胞术对小鼠淋巴细胞亚群进行分析,观察小分子阿胶对小鼠淋巴细胞分型的影响。结果 与模型组比较,小分子阿胶3.00、1.50、0.75 g/kg显著提高免疫功能低下小鼠血清溶血素含量（P<0.01）;3.00、1.50 g/kg显著提高小鼠耳廓肿胀度（P<0.01、0.05）;3.00 g/kg显著提高小鼠T淋巴细胞（CD3⁺）、辅助性T细胞和迟发超敏性T细胞（CD3⁺CD4⁺）占淋巴细胞的比例（P<0.01）。结论 小分子阿胶能提高小鼠体液免疫和细胞免疫功能,对免疫功能有正向调节作用。     

阿胶对围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞凋亡及Bcl-2和Bax表达的影响

目的：探讨阿胶对围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞凋亡及其相关基因Bcl-2和Bax表达的影响。方法：选用4月龄雌性大鼠为正常对照组,14月龄阴道细胞学表现为动情期延长的雌性大鼠为衰老大鼠模型。模型动物随机分别给阿胶或戊酸雌二醇片治疗。采用原位末端核苷酸标记法（TUNEL）检测卵巢细胞凋亡,免疫组化法检测细胞凋亡相关因子Bcl-2,Bax。结果：阿胶高、中、低剂量组卵巢细胞凋亡阳性表达与模型组比较有显著性差异,同时可使卵巢凋亡基因Blc-2表达增强,促凋亡基因Bax表达减弱,Bcl-2/Bax比例增加。结论：阿胶通过抑制Bax蛋白的表达,上调Bcl-2蛋白表达,抑制卵巢颗粒细胞凋亡,进而改善卵巢功能。     

UHPLC-MS/MS同时测定鳖甲煎丸中鳖甲胶和阿胶的特征肽含量

目的 建立同时测定鳖甲煎丸中鳖甲胶和阿胶特征肽含量的分析方法,为鳖甲煎丸的质量控制提供技术支持。方法 采用胰蛋白酶对鳖甲煎丸提取溶液进行酶解,利用超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS),在电喷雾电离(ESI)正离子模式下采用多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM),用外标法对鳖甲胶和阿胶的特征多肽进行含量测定。结果 方法学研究表明,该方法具有较好的专属性、精密度、稳定性、重复性。鳖甲特征肽A、驴源多肽A₁、驴源多肽A₂在线性范围内线性关系良好,相关系数均>0.999。3种特征多肽的平均回收率为97.08%~105.10%。结论 所建立的方法可用于鳖甲煎丸中鳖甲胶和阿胶的质量控制。鳖甲煎丸中鳖甲胶、阿胶的特征多肽含量低于拟定限度,应引起有关单位的重视。     

基于nano LC-MS/MS法的黄明胶胶原蛋白鉴定研究

目的 基于shotgun混合蛋白鉴定技术,系统研究黄明胶中胶原类物质组成,探讨其胶原蛋白的修饰。方法 采用胰蛋白酶酶切黄明胶样品,纳升液相串联质谱（nano-LC Q Exactive Orbitrap MS）技术,对黄明胶酶解液进行分析获得MS/MS图谱,利用PEAKS软件对获得的MS/MS图谱搜索牛科蛋白质库,以鉴定其中蛋白质组成。结果 从2个批次的黄明胶酶解液样品中鉴定了1 378个肽段,共鉴定了30蛋白质,胶原I蛋白α1链、α2链,胶原Ⅲ蛋白α1链为黄明胶的主要物质基础,研究发现黄明胶中蛋白主要有4种修饰形式:羟基化（Hydroxylation）、脱酰胺化（Deamidation）、N-端酰胺化（Acetylation）及氧化（Oxidation）修饰。结论 黄明胶的主要物质基础源于胶原Ⅰ蛋白和胶原Ⅲ蛋白,胶原蛋白经熬制后,变性、溶出、修饰获得的产物共同构成了黄明胶的物质基础。      

阿胶对免疫低下模型小鼠免疫功能的影响

目的 研究阿胶对免疫低下小鼠免疫功能的影响。方法 小鼠ip环磷酰胺或氢化可的松建立免疫低下模型,高、中、低（3.00、1.50、0.75 g/kg）剂量阿胶ig给予小鼠14 d后,测定血清溶血素水平,观察阿胶对体液免疫的影响;进行二硝基氯苯诱导的小鼠耳廓肿胀实验,检测小鼠耳廓肿胀度,观察阿胶对细胞免疫的影响;流式细胞术检测阿胶对淋巴细胞亚群的影响;进行碳廓清实验,检测廓清指数K和吞噬指数α,观察阿胶对非特异性免疫的影响。结果 与模型组比较,阿胶3.0、1.5、0.75 g/kg均可显著提高免疫功能低下小鼠血清溶血素含量（P<0.001）;3.0、1.5 g/kg能明显提高小鼠耳廓肿胀度（P<0.01、0.001）;3 g/kg能显著提高小鼠CD3⁺（T淋巴细胞）、CD3⁺CD4⁺（辅助性和迟发超敏性T细胞）占淋巴细胞百分比（P<0.05）;阿胶对小鼠的碳粒廓清指数K和吞噬指数α无显著影响。结论 阿胶能显著提高免疫低下小鼠的体液免疫和细胞免疫,提高CD3⁺、CD3⁺CD4⁺阳性细胞比例,对非特异性免疫无明显影响。     

补血益母颗粒质量标准研究

目的研究补血益母颗粒中阿胶及黄芪的测定方法,为建立其质量标准提供数据依据。方法采用薄层色谱鉴别颗粒中的阿胶及黄芪,并以高效液相色谱法（HPLC）测定黄芪甲苷的含量。结果在薄层色谱中能清晰鉴别出阿胶及黄芪,HPLC法测定黄芪甲苷在1．01-50．10μg时线性关系良好（R2=O．9999）。结论薄层色谱法鉴别补血益母颗粒中阿胶及黄芪以及HPLC法测定黄芪甲苷的含量,方法简便准确,重现性好,专属性强,可作为补血益母颗粒的质量控制方法。     

阿胶药理研究进展

通过查阅近年来阿胶药理研究的论文,从阿胶补血、增强免疫力、抗肿瘤等几个方面对文献分类总结,并做一综述,为阿胶药理研究的发展提供文献支持。