吉九里香碱体外诱导HCT-15细胞凋亡的研究

目的:探讨中药单体吉九里香碱是否通过诱导 HCT-15细胞凋亡而发挥其抑制肿瘤细胞增殖的作用。方法:采用 MTT法检测细胞增殖抑制作用;采用透射电子显微镜观察细胞凋亡的形态学变化;库尔特全自动颗粒粒度分析药物引起 HCT-15细胞体积大小分布的变化;琼脂糖凝胶电泳测定 DNA ladder 的发生;通过流式细胞仪应用 Annexin V-FITC 和 Rhodamine123检测磷脂酰丝氨酸(PS)及线粒体跨膜电位(△ψm)。结果:MTT 结果显示吉九里香碱以浓度和时间依赖方式抑制 HCT-15细胞的增殖,抑制率依赖于吉九里香碱的浓度和作用时间;50 μmol·L~(-1)吉九里香碱处理 HCT-15细胞24 h 时,细胞出现凋亡典型的形态学特征;50 μmol·L~(-1)吉九里香碱分别处理 HCT-15细胞6,12,24 h 及不同浓度吉九里香碱处理 HCT-15细胞24 h 时,能够使细胞产生明显的 DNA ladder 和体积大小变化,呈一定的量效和时效关系;细胞 PS 外翻随作用时间的延长而增加,分别为15.34%(6 h),20.20%(12 h),39.37%(24 h);50 μmol·L~(-1)吉九里香碱处理 HCT-15细胞导致线粒体△ψm以时间依赖方式下降。结论:吉九里香碱通过诱导 HCT-15细胞凋亡而发挥其抗 HCT-15细胞增殖的作用,致凋亡机理可能与线粒体△ψm快速下降有关。     

细叶黄皮各器官挥发油的化学成分

目的:分析研究细叶黄皮植物挥发油的化学成分。方法:采用水蒸气蒸馏法从细叶黄皮各器官中提取挥发油,用气相色谱-质谱联用技术对挥发油化学成分进行分析。结果:细叶黄皮茎、根、叶、果实及花挥发油的共有化合物为4-甲氧基-6-(2-丙烯基)-1,3-苯并二恶茂,质量分数分别为32.89%,38.09%,28.97%,58.40%,100.00%。化合物的主要类型为芳香类、烯类、烷烃类及酸类。结论:研究了细叶黄皮各器官挥发油的化学成分,为合理开发和利用细叶黄皮资源提供了依据。     

N-甲基-N-顺式-苯乙烯基-桂皮酰胺对青霉素 致痫大鼠痫样放电的影响

 【目的】 探讨黄皮核提取物N-甲基-N-顺式-苯乙烯基-桂皮酰胺对青霉素(PNC)诱发大鼠癫痫的影响&#65377;【方法】 32只SD大鼠随机分成正常对照组 (20 mL/L吐温80 + 生理盐水)&#65380;模型对照组 (20 mL/L吐温80 + PNC)&#65380;低剂量桂皮酰胺组(桂皮酰胺75 mg/kg + PNC)&#65380;高剂量桂皮酰胺组(桂皮酰胺150 mg/kg + PNC),每组8只&#65377;建立大鼠皮层定位注射青霉素诱发惊厥模型,观察并分析两剂量的桂皮酰胺腹腔注射前处理给药对造模后大鼠惊厥发作程度和皮层脑电图的影响&#65377;【结果】 两种剂量的N-甲基-N-顺式-苯乙烯基-桂皮酰胺均可减轻大鼠癫痫发作程度,延长痫样放电的潜伏期,减少痫波持续时间,在发作后期减少痫波发放频率,与模型对照组比较,差异明显(P < 0.05或P < 0.01)&#65377;然而,对于棘波最高和最低波幅的影响,桂皮酰胺组与模型对照组比较差异无统计学意义(P > 0.05)&#65377;【结论】 天然产物黄皮核提取物N-甲基-N-顺式-苯乙烯基-桂皮酰胺对大鼠皮层定位注射青霉素诱发的惊厥发作和痫样放电具有明显的抑制作用,该天然产物具有一定的抗惊活性&#65377;     

Inhibitory effect of oxycoumarins isolated from the Thai medicinal plant <Emphasis Type="Italic">Clausena guillauminii</Emphasis> on the inflammation mediators,iNOS, TNF-α, and COX-2 expression in mouse macrophage RAW 264.7

In the present study, we investigated the inhibitory effect of the known oxycoumarins poncitrin (3), osthol (4), and xanthoxyletin (5), newly isolated from Clausena guillauminii (Rutaceae), together with the known carbazoles heptaphylline (1) and 7-methoxyheptaphylline (2) on inducible-nitric oxide synthase (iNOS) expression induced by lipopolysaccharide (LPS) and the NO generation in RAW 264.7 mouse macrophages. Isolation of active oxycoumarins was guided by Western blot analysis of iNOS protein expression. These oxycoumarins showed an inhibitory effect on iNOS protein expression at 10 μM. Further examination of the inhibitory effects of these compounds on inflammation mediators revealed that the synthesis of nitric oxide (NO) and the protein expression of tumor necrosis factor-α (TNF-α) and cyclooxygenase-2 (COX-2) were inhibited by 5. It was expected that these compounds show anti-inflammatory activities.     

Carbazole alkaloids from the stems of Clausena excavata

A new carbazole alkaloid, sansoakamine (8), together with 11 known compounds, was isolated from the stems of Clausena excavata. All structures were elucidated by spectroscopic methods. Compound 7 showed moderate anti-malarial activity against Plasmodium falciparum with a MIC value of 6.74 μg/ml.     

RP-HPLC测定桑寄生及其寄主植物黄皮树盐酸小檗碱的含量

目的:测定桑寄生及其寄主植物中盐酸小檗碱的含量,研究寄主植物对桑寄生药材质量的影响。方法:采用甲醇-盐酸(100∶1)溶液超声提取样品中的盐酸小檗碱,并采用RP-HPLC法进行含量测定,选用Agilent C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈:水:磷酸:三乙胺(72∶28∶0.01∶0.05),流速:1.0 mL.min-1,柱温:室温,检测波长:284 nm。结果:不同寄主植物黄皮树及其桑寄生中盐酸小檗碱含量范围分别为0.14~7.58 mg.g-1和0.11~1.35 mg.g-1,桑寄生盐酸小檗碱含量最高可达到其寄主植物黄皮树盐酸小檗碱含量的132.10%。结论:寄主植物是影响桑寄生药材质量的关键,寄主植物不同桑寄生药材化学成分含量也不同。     

HS-SPME-GC-MS法分析海南产黄皮不同部位的挥发性成分

目的采用顶空固相微萃取(HS-SPME)结合气相色谱质谱法(GC-MS)分析检测海南产黄皮不同部位的挥发油成分。方法在对5种不同性质的萃取头考察优化后,选用L_(16)(4~5)正交表进行正交试验优化其他5个影响HS-SPME萃取的因素(水的体积、萃取温度、平衡时间、萃取时间、NaCl添加量),最终采用GC-MS相似度检索结合保留指数对黄皮叶、果皮和种子中的挥发性成分进行分析与鉴定。结果最终确定的萃取条件为采用50/30μm DVB/CAR/PDMS萃取头,取样品粉末10.0 mg于20 mL顶空瓶中,加水2.0 mL和NaCl 0.2 g,萃取温度80℃,平衡时间30 min,萃取时间60 min。在此条件下从海南产黄皮叶、果皮和种子中分别鉴定出83、96和106种挥发性成分,分别占挥发油总量的95.24%、92.15%和95.92%,含量较高的均为倍半萜类成分,其成分和含量在不同部位中差异较大。结论 HS-SPME-GC-MS法灵敏度高,样品用量少,操作简便,无需有机溶剂,谱库相似度检索结合保留指数提高了分析鉴定的准确性,为海南产黄皮的进一步研究提供了科学依据。该方法能对中药中高沸点及微量成分进行富集分析,更全面、科学地对中药的质量进行表征及评估。     

小叶臭黄皮咔唑生物碱化学成分及其抗肿瘤活性研究

目的研究小叶臭黄皮Clausena excavate根的化学成分及抗肿瘤活性。方法采用硅胶、RP-18和HPLC等色谱技术分离纯化,根据理化常数和波谱数据鉴定化合物的结构,采用SRB法测定化合物1、2、7、8、10的细胞毒活性。结果从小叶臭黄皮根的甲醇提取物中分离得到13个咔唑生物碱,分别鉴定为2,3-二甲氧基-3-羧基咔唑生物碱(1)、1-羟基-3-甲酸甲酯咔唑生物碱(2)、7-羟基-3-醛基咔唑生物碱(3)、2,7-二甲氧基-3-甲酸甲酯咔唑生物碱(4)、7-羟基-3-甲酸甲酯咔唑生物碱(5)、2-羟基-3-醛基咔唑生物碱(6)、1-羟基-3-醛基咔唑生物碱(7)、2,3-二羟基-3-醛基咔唑生物碱(8)、3-醛基咔唑生物碱(9)、6-甲氧基-3-醛基咔唑生物碱(10)、7-甲氧基-3-甲酸甲酯咔唑生物碱(11)、2-甲氧基-3-羧基咔唑生物碱(12)、1,6-二羟基-3-醛基咔唑生物碱(13)。结论化合物9、10、12为首次从该植物中分离得到。化合物1、2、7、8、10对3种人体肿瘤细胞(A549、He La和BGC-823)均有不同程度的杀伤作用,IC50为8.53~19.87μg/m L。     

黄皮茎枝的化学成分研究

目的：研究黄皮属植物黄皮茎枝 Clausena lansium （Lour．）Skeels 的化学成分。方法采用大孔吸附树脂、MCI 吸附树脂、硅胶柱色谱、反相柱色谱、凝胶柱色谱以及制备高效液相色谱等方法进行分离纯化,运用紫外光谱、质谱和核磁共振谱等方法鉴定化合物的结构。结果从黄皮茎枝的95％乙醇提取物的水萃取部位分离得到10个化合物,分别鉴定为β－腺苷（1）、伞形花内酯－7－O －α－L －鼠李糖基－（1″－6′）－β－D －葡萄糖苷（2）、Haploperoside A （3）、伞形花内酯－7－O －β－D －芹糖基－（1″－6′）－β－D －葡萄糖苷（4）、Marmesinin（5）、苯甲基－O －β－D －芹糖基－（1″－6′）－β－D －葡萄糖苷（6）、苯甲基－O －β－D －吡喃葡萄糖苷（7）、对羟基苯丙酸（8）、β－hydroxypropiovanillone （9）,反式对羟基桂皮酸（10）。结论化合物1～6、8～9为首次从该属植物中分离得到。化合物1对脂多糖诱导的 BV2细胞产生一氧化氮具有一定的抑制活性,其 IC50为4．39μmoL·L －1。     

黑果黄皮Clausena dunniana Levl.中一个新的咔唑类生物碱

从黑果黄皮Clusena dunniana Levl.中分到一个新的咔唑类生物碱1,并通过谱学手段确定了1的化学结构为3－methoxymethylcarbazole。