Development of tyrosine hydroxylase-, dopamine- and dopamine β-hydroxylase-immunoreactive neurons in a teleost, the three-spined stickleback

The development of catecholaminergic neuronal systems in the brain of a teleost, the three-spined stickleback, was studied through embryonic to early larval stages by immunocytochemistry using specific antibodies against dopamine, tyrosine hydroxylase and dopamine β-hydroxylase. By analysing the spatiotemporal patterns of development for the catecholaminergic nuclei, possible homologies with nuclei in amniote brains have been identified.

The noradrenergic neurons in the isthmus region of the rostral rhombencephalon originate in the same manner as the A4–A7 + subcoeruleus group in mammals. Their developmental characteristics show the largest similarities with the subcoeruleus group of birds and mammals, although some features are shared with developing A6 (locus coeruleus) neurons.

Catecholaminergic neurons never appear during development in the ventral mesencephalon of the three-spined stickleback. A group of large dopaminergic neurons that accompany the cerebrospinal fluid (CSF)-contacting neurons follows the border between the hypothalamus and the ventral thalamus into the caudal hypothalamus, where they are continuous with the dopaminergic neurons in the posterior tuberculum. They are thus topologically comparable with the dopaminergic neurons of the zona incerta in mammals.

The dopaminergic CSF-contacting neurons that line the median, lateral and posterior recesses of the third ventricle do not contain tyrosine hydroxylase-immunoreactivity at any developmental stage. This indicates that they take up and accumulate exogenous dopamine or -dihydroxyphenylalanine, and do not synthesize dopamine from tyrosine at any developmental stage. Tyrosine hydroxylase-immunoreactive neurons appear in the pineal organ on the day of hatching (120 h post-fertilization). They were still observed in 240-h-old larvae, but are absent in the pineal organ of adult sticklebacks.

The initial appearance and subsequent differentiation of catecholaminergic neurons in the stickle-back embryo follow essentially the same spatial and temporal pattern as in amphibian, avian and mammalian embryos. This observation supports the hypothesis that morphologically, topologically and chemically similar monoaminergic neurons in different vertebrate classes are homologous.     

少药八角果实中的黄酮类成分研究

目的分离并鉴定少药八角Illicium oligandrum果实中的黄酮类成分。方法利用硅胶柱色谱、凝胶(Sephadex LH-20)柱色谱和ODS反相柱色谱等方法进行分离和纯化,应用核磁共振和质谱等现代波谱技术进行结构鉴定。结果从少药八角果实的95%乙醇提取物中分离得到11个黄酮类化合物,分别鉴定为:山柰酚(Ⅰ)、槲皮素(Ⅱ)、槲皮素-3-O-β-D-半乳吡喃糖苷(Ⅲ)、异=鼠李素-3-O-β-D-葡萄吡喃糖苷(Ⅳ)、槲皮素-3-O-α-L-阿拉伯吡喃糖苷(Ⅴ)、槲皮素-3-O-α-L-鼠李吡喃糖苷(Ⅵ)、二氢槲皮素-3-O-α-L-鼠李吡喃糖苷(Ⅶ)、二氢山柰酚-3-O-α-L-鼠李吡喃糖苷(Ⅷ)、槲皮素-3-O-(6″-O-α-L-鼠李吡喃糖基)-β-D-葡萄吡喃糖苷(Ⅸ)、山柰酚-3-O-(6″-O-α-L-鼠李吡喃糖基)-β-D-葡萄吡喃糖苷(Ⅹ)、异鼠李素-3-O-(6″-O-α-L-鼠李吡喃糖基)-β-D-葡萄吡喃糖苷(Ⅺ)。结论11个化合物均为首次从该植物中分离得到,其中,化合物Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅺ为首次从该属植物中分离得到。     

基于HPLC指纹图谱和网络药理学的石崖茶质量标志物（Q-Marker）预测

目的 基于 HPLC指纹图谱数据的化学模式识别方法和网络药理学技术 ,预测石崖茶潜在质量标志物 （Q-Marker）,为提升其药材质量标准提供参考。方法 建立10批次广西不同产地石崖茶HPLC指纹图谱,对其进行化学模式识别分析,筛选不同批次间差异的主要标志性成分,并进行成分质谱鉴定;通过网络药理学对筛选鉴定出的成分构建“成分-核心靶点-通路”网络,分析预测石崖茶的Q-Marker,基于可测性原则对Q-Marker进行定量测定。结果 不同批次石崖茶指纹图谱共标定出12个共有峰,经化学模式识别,筛选出批次间5个主要差异性成分,分别鉴定为山茶苷A、表儿茶素、儿茶素、槲皮苷、芹菜素。网络药理学分析提示5种差异成分直接相关靶点211个,其映射的KEGG信号通路显著富集在脂质与动脉粥样硬化、内分泌抵抗、甲状腺激素信号通路、人巨细胞病毒感染、卡波西肉瘤相关疱疹病毒感染、癌症的中心碳代谢等,映射的161个信号通路与石崖茶主要功效和现代药理作用密切相关。含量测定结果显示,不同批次石崖茶中山茶苷 A、表儿茶素、儿茶素、槲皮苷和芹菜素质量分数分别为 41.56～96.90、85.45～101.01、7.39～12.96、5.74～15.22、2.65～12.43 mg·g^-1。根据Q-Marker的五原则,初步预测山茶苷A、表儿茶素、儿茶素、槲皮苷、芹菜素为石崖茶的Q-Marker。结论 初步预测了石崖茶的Q-Marker,为其药材质量标准的提升提供参考。     

石柑子的显微鉴别

目的：对广西民间常用草药石柑子Pothos chinensis（Raf.）Merr．进行显微鉴别。方法：对石柑子茎、叶横切片及粉末进行显微观察。结果：描述了石柑子的主要显微鉴别特征。结论：石柑子显微特征明显，可为药材鉴别提供参考。     

鸦胆子茎节组培快繁体系的建立

目的：建立鸦胆子茎节组培快繁体系。方法：选用鸦胆子嫩枝为外植体,探讨基本培养基和外源激素对其离体再生的初代培养、继代增殖、生根培养的影响,并进行移栽试验。结果：鸦胆子的不定芽增殖、壮苗、生根的最佳培养基分别为MS＋6-BA1．0mg·L^-1＋IBA0.1mg·L^-1,1／2MS＋香蕉汁20g·L^-1;1／2NS＋IBA0．1mg·L^-1＋NAA0．1mg·L^-1。炼苗基质为细沙时,成活率最高。     

马桑寄生及马桑子中内酯成分分析方法的研究

生药乙醇提取液经聚酰胺柱净化,在硅胶G薄层上,环己烷—乙酸乙酯(1:1)为展开剂,分离了马桑毒素(A)、羟基马桑毒素(B)、马桑亭(C)及另一未知内酯(D),用香草醛—硫酸的乙醇溶液显色后,薄层光密度法测定。本法显色灵敏、稳定,A,B,C在生药中的回收率分别为96.3±5.1,97.7±4.7和97.4±4.6％。用本法测定了马桑寄生叶、马桑子及其注射液以及马桑叶中所含以上内酯成分。     

钩枝藤总生物碱对非小细胞肺癌细胞系表达谱及免疫微环境的影响

目的 研究钩枝藤总生物碱对非小细胞肺癌细胞系表达谱的影响,筛选出差异表达基因（differentially expressed genes,DEGs）并对功能基因进行分析和挖掘,以期为钩枝藤抗肺癌的分子机制提供理论依据。方法 将非小细胞肺癌NCI-H1975细胞分为对照组和钩枝藤总生物碱处理组,使用RNA-Seq技术开展全转录组测序,获取DEGs;对DEGs进行基因本体（gene ontology,GO）功能及京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）通路富集分析;筛选差异基因核心模块并分析其影响功能,进一步分析关键基因对非小细胞肺癌生存期的影响;通过分析钩枝藤总生物碱对非小细胞肺癌免疫细胞肿瘤浸润的情况,确定关键基因表达与免疫浸润水平的相关性。结果 对照组和药物组共检测到2976个DEGs,其中药物组664个DEGs上调,2312个DEGs下调。钩枝藤总生物碱对铁死亡、氧化磷酸化、线粒体、溶酶体、细胞间隙连接、核苷酸结合寡聚化结构域（nucleotide binding oligomerization domain,NOD）样受体等介导的信号通路产生重要影响。在DEGs核心模块中,白细胞介素11（interleukin 11,IL11）的高表达可显著影响非小细胞肺癌患者的生存期,是非小细胞肺癌患者不良预后的关键因素之一;角形四肽重复干扰素诱导蛋白3（interferon induced protein with tetratricopeptide repeats 3,IFIT3）、白细胞介素7受体（interleukin 7 receptor,IL7R）、2'',5''-寡腺苷酸合成酶2（2'',5''-oligoadenylate synthetase 2,OAS2）、S-腺苷甲硫氨酸基结构域蛋白2（radicalS-adenosyl methionine domain containing 2,RSAD2）、受体转运蛋白4（receptor transporter protein 4,RTP4）、不育α基序结构域9样（sterile alpha motif domain containing 9-like gene,SAMD9L）、X染色体连锁凋亡抑制蛋白相关因子1（X-linked inhibitor of apoptosis associated factor 1,XAF1）的表达水平影响了非小细胞肺癌组织的纯度和免疫细胞浸润的类型,可能改变非小细胞肺癌的免疫微环境。结论 钩枝藤总生物碱能够影响非小细胞肺癌细胞的转录谱,具有潜在的抗非小细胞肺癌活性作用。     

南蛇藤提取物对Hepa1-6荷瘤小鼠肝癌移植瘤及血管生成的影响

目的观察南蛇藤乙酸乙酯提取物对Hepa1-6细胞荷瘤小鼠肝癌移植瘤及血管生成的影响。方法将C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、顺铂组及南蛇藤高、中、低剂量组,每组10只。除正常组外,其他各组于左前肢腋部皮下接种小鼠肝癌细胞株Hepa1-6(1×106)0.1ml/只。接种后2周,顺铂组腹腔注射顺铂1mg/kg,南蛇藤低、中、高剂量组分别灌胃,药液浓度为10、20、40mg/kg,连续给药28d,末次给药24h后,检测肿瘤重量、移植瘤组织内肿瘤细胞的凋亡,检测移植瘤组织内血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果与模型组相比,南蛇藤提取物高、中、低剂量组平均瘤重均有所减少(P<0.05或P<0.01);南蛇藤中、高剂量组移植瘤内凋亡的肿瘤细胞较模型组明显增多,同时VEGF的表达较模型组明显减少。结论一定浓度的南蛇藤乙酸乙酯提取物有抑制肿瘤生长的作用,其机制可能与促进肿瘤细胞凋亡及抑制肿瘤血管生成有关。     

南蛇藤总萜对Hepal-6荷瘤小鼠VEGF、CECs的影响

目的 观察南蛇藤总萜对Hepal-6荷瘤小鼠外周血VEGF、CECs的影响.方法 采用常规无菌接种技术制作小鼠肝癌Hepal-6移植性肿瘤模型,观察南蛇藤总萜高、中、低剂量(40 mg/kg、20 mg/kg、10 mg/kg)对Hepal-6荷瘤小鼠外周血VEGF、CECs表达的影响.结果 南蛇藤总萜在20 mg/kg时,外周血VEGF (45.24±21.36) pg/ml、CECs (0.83±0.10)％表达明显降低,与阴性对照组(0.9％生理盐水)比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 南蛇藤总萜可明显降低VEGF、CECs表达,这一作用可能与南蛇藤总萜抑制肝癌血管生成有关.     

菊叶三七生物碱成分的研究

从菊科蒂叶三七植物中分离出六个生物碱,对其中四个进行了鉴定。光谱数据证明:生物碱Ⅰ和Ⅱ分别为已知的千里光碱(senecionine,Ⅰ)和千里光菲灵碱(seneciphylline,Ⅱ),生物碱Ⅲ和Ⅳ为新成分,分别命名为菊三七碱甲(sineciphyllinine,Ⅲ)和菊三七碱乙[(E)-seneciphylline,Ⅳ]。