基于HPLC指纹图谱结合化学计量学的白及与黄花白及辨识研究

目的 通过指纹图谱结合化学计量学方法对白及Bletilla striata与黄花白及Bletilla ochracea进行辨识研究。方法 采用Shim-pack GIST C18-AQ(250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,流动相为0.1%磷酸水溶液-乙腈梯度洗脱,检测波长280nm;体积流量1.0 m L/min;柱温30℃;进样量10μL。采用Chem Pattern TM软件对白及、黄花白及的指纹图谱数据进行分析,并对其进行相似度评价;采用SIMCA14.1软件进行主成分分析（principal component analysis,PCA）、偏最小二乘判别分析（partial least squares discriminant analysis,PLS-DA）,对二者进行定性辨识研究。结果 在相似度分析中,45批白及的相似度为0.74～0.97,相似度较好,29批黄花白及的相似度为0.44～0.83,部分黄花白及与白及较为相似;聚类分析与PCA分析结果较为一致,部分样品可分为2类;PLS-DA分析分类效果显著,模型参数Q2为0.80,R2Y为0.85,完全能将两者区分开...     

正交试验优选白芨多糖硫酸酯化工艺的研究

目的优选白芨多糖硫酸酯化的最佳工艺。方法采用氯磺酸-吡啶法合成白芨多糖硫酸酯。以取代度和产物量为指标,采用L9(34)正交设计对试剂比例、反应温度和反应时间进行优选。结果吡啶和氯磺酸比例6∶1,反应温度85℃,反应时间2h为比较适宜的工艺条件。结论白芨多糖硫酸酯化优化的工艺条件方法可行,为进一步扩大试验提供了有价值的参数。     

天然高分子白及溶胶的制备及质量控制

目的制备高分子白及溶胶,制定质量控制方法。方法用水提醇沉法提取,0.1%活性炭脱色,所得多糖干燥、粉碎、加纯化水制备成溶胶;从性状、鉴别、含量测定方面控制质量。结果所制得白及溶胶为浅棕色半流动状,质地均匀,细腻,具有粘性,鉴别呈正反应,溶胶中含白及多糖为4.0%(±5),含量测定多糖在1.88~33.75μg.m L-1范围内线性关系良好,y=0.034X-0.0069(r=0.9998),回收率为98.6%,RSD=1.12%(n=9)。结论该方法制备的白及溶胶均匀、细腻,质量可控。     

基于液质联用法对白及中2-异丁基苹果酸葡萄糖氧基苄酯类成分的定性定量分析

目的： 建立白及中2-异丁基苹果酸葡萄糖氧基苄酯类成分的UPLC-ESI-Q/TOF-MS快速识别鉴定方法,以及主成分militarine的UPLC测定方法。方法： 液质联用方法采用Waters Acquity UPLC BEH C₁₈（1.7 μm,2.1 mm×100 mm）色谱柱,乙腈-0.1%甲酸溶液梯度洗脱,检测器为高分辨四极杆飞行时间质谱,ESI离子源,MS^E（^E代表碰撞能量）采集方式,采集质量数范围m/z 100~1 000。含量测定采用UPLC法,以乙腈-0.1%磷酸溶液（22：78）为流动相;检测波长为223 nm;柱温：35℃;流速：0.2 mL·min^-1。结果： 利用建立的白及化学成分数据库,结合2-异丁基苹果酸葡萄糖氧基苄酯类成分的诊断离子、准确分子量、质谱碎片及对照品信息,快速分析鉴定21个目标化合物。主成分militarine在19.059 0~381.180 8 μg·mL^-1范围内线性关系良好（r=0.998 6）。加样回收率为100.9%,RSD为1.5%。36批白及中militarine的含量范围是1.5%~4.6%。结论： UPLC-Q/TOF-MS法能快速、准确地鉴定白及中的化学成分,为其药效物质基础研究提供科学依据。建立的UPLC含量测定方法操作简便、准确可靠,可用于白及的质量控制。     

生物黏附性三七总皂苷-白及多糖-海藻酸钠复合微球的制备及表征

目的利用白及多糖(BSP)的生物黏附性,与海藻酸钠(SA)混合作为复合载体,以具有缓释特性的三七总皂苷(PNS)分散体作为包封药物,制备具有生物黏附性的PNS-BSP-SA复合微球。方法采用离子交联法制备微球,通过单因素试验和正交设计考察并优化处方工艺。通过扫描电镜(SEM)、粒径分布、差示扫描量热法(DSC)分析、溶胀性能测定、体外黏附性能评价、体外释放研究对微球进行表征。结果 PNS-BSP-SA复合微球圆整度较好,表面粗糙不平有褶皱,粒径分布较窄,PNS原料药以无定形状态均匀分散于微球中。最佳处方工艺制备的微球工艺稳定,重现性较好,与直接加入PNS原料药制备的微球相比,PNS分散体微球的载药量、包封率和得率均明显增加,分别为10.34%、51.25%、82.21%,而PNS原料药微球的载药量、包封率、得率分别为4.04%、12.16%、61.35%。BSP的加入增加了SA微球的溶胀性能,明显增加了其在大鼠胃部的滞留率。PNS-BSP-SA复合微球中人参皂苷Rg1的释放较PNS原料药缓慢。结论 BSP增加了微球的生物黏附性,将PNS制备为分散体,提高了微球的载药量、包封率和得率,并使微球具有一定的缓释性能。     

白及幼根组织培养技术研究

目的：为白及组培快繁寻求最佳部位及最佳培养基配比。方法：研究不同激素浓度和配比对白及不同外植体诱导分化、增殖及生根的影响。结果：幼根最容易诱导出丛生芽,其最佳培养基为1/2MS＋1.0 mg·L-16-BA＋2.0 mg·L-1 NAA;丛生芽增殖最佳培养基为MS＋1.0 mg·L-16-BA＋0.05 mg·L-1 NAA;生根培养基以1/2MS＋0.5 mg·L-1 NAA为最佳。结论：建立了白及组培快繁体系。     

白及花与块茎石油醚部位成分分析及其生物活性的比较研究

目的 分析白及花和块茎石油醚部位成分及生物活性。方法 以石油醚（60~90℃）为提取溶剂,采用索氏提取法提取白及花和块茎脂溶性成分,采用GC-MS分析其化学成分,通过滤纸片扩散法、CCK8法和分光光度法分别对其进行抑菌、抗肿瘤和α-淀粉酶抑制作用研究,通过检测DPPH自由基、ABTS自由基和羟自由基的清除率考察其体外抗氧化活性。结果 白及花和块茎中共鉴定出20种石油醚部位成分,其中花11种,块茎19种,共有成分10种,α-乙酰基-γ-丁内酯（15.20%,21.84%）和苄醇（12.07%,24.10%）为主要成分。白及花中石油醚部位成分的抑菌活性高于块茎,对枯草芽孢杆菌效果最好,最小抑菌浓度和最小杀菌浓度分别为0.41,0.51 g·L^-1和0.53,0.66 g·L^-1。当质量浓度为5.0 mg·mL^-1时,白及块茎石油醚部位成分对A₅₄₉细胞的抑制率为29.451%,高于花中石油醚部位成分27.621%的抑制率,前者对α-淀粉酶的IC₅₀为1.819 mg·mL^-1,后者的IC₅₀为2.028 mg·mL^-1。两者对DPPH自由基、ABTS自由基和羟自由基的清除率均随质量浓度的增大而增大,当浓度达到1.0 mg·mL^-1时,前者对ABTS自由基和羟自由基的清除率分别为99.67%和92.22%,高于后者90.07%和38.11%的清除率,后者对DPPH自由基的清除率为31.23%,高于前者18.94%的清除率,两者均低于Vc的清除率。结论 白及花和块茎中石油醚部位成分主要为酯类和醇类,2种石油醚部位成分均具有一定的生物活性,具有潜在的药用价值,并可为白及花的资源开发提供参考。     

白芨多糖对大鼠血小板聚集、疑血功能及TXB2、6-keto-PGF1α表达的影响

目的：观察白芨多糖对大鼠血小板聚集、凝血功能及血浆血栓素B2（TXB2）、6-酮-前列腺素F1α（6-keto-PGF1α）水平的影响,探讨白芨多糖的止血机制.方法：健康SD大鼠60只,随机分为正常对照组（生理盐水）、白芨多糖高剂量组（12 g/kg）、白芨多糖中剂量组（6 g/kg）、白芨多糖低剂量组（3 g/kg）、云南白药组（0.4g/kg）,连续给药14 d;股动脉采血,测定各组大鼠血小板聚集率、凝血酶原时间（PT）、凝血酶时间（TT）、部分凝血活酶时间（APTT）、纤维蛋白原（FIB）、TXB2和6-keto-PGF1α水平.结果：与空白对照组比较,白芨多糖中、高剂量能增加大鼠血小板聚集率,缩短PT、APTT和TT,显著增加FIB、TXB2含量和降低6-keto-PGF1α含量（P＜0.05或P＜0.01）.结论：白芨多糖可能通过激活内源性,外源性凝血系统,促进血小板聚集和调节TXB2、6-ke-to-PGF1α的水平,发挥止血功能.     

白芨多糖对小鼠溃疡性结肠炎的治疗作用

从天然药物白芨块茎中分离纯化得到的白芨多糖,探究其对唑酮诱导的小鼠溃疡性结肠炎的疗效和可能的作用机制。动物实验结果表明,在唑酮诱导的小鼠溃疡性结肠炎模型中,白芨多糖可通过促进结肠黏膜损伤修复和抑制相关免疫反应抑制小鼠结肠炎的发展,对溃疡性结肠炎具有显著的疗效。细胞实验结果进一步表明白芨多糖对巨噬细胞有一定的免疫调节能力,可通过抑制巨噬细胞活性从而影响淋巴细胞的活化及相关细胞因子的分泌,能缓解噁唑酮诱导的小鼠结肠炎的疾病症状。     

白及多糖提取工艺的研究

目的对从白及块茎中提取多糖的工艺进行改进,为白及多糖的开发提供理论依据。方法采用煎煮前浸泡24 h及加入一定量ZTC1 1(Ⅱ)型天然澄清剂等新工艺,运用苯酚-硫酸法测定多糖含量及转移率。结果在提取液中,加入澄清剂4%的B组分、2%的A组分,且B∶A=2∶1,共澄清4 h,白及多糖含量及转移率均明显提高,且提取效果最好。结论白及多糖提取新工艺值得推广。