貂心线粒体mtDNA鉴定及特征分析

 目的探讨貂心肌线粒体DNA(mtDNA)的特征,建立中药利心丸中貂心的分子遗传学鉴定方法。方法从新鲜的貂心组织提取mtDNA,采用DNA限制性内切酶片段长度多态性(mtDNA-RFLP)分析技术和聚合酶链反应(PCR)扩增细胞色素b基因部分序列片段。结果新鲜的貂心组织可提取完整的mtDNA,并能扩增出310 bp大小的Cytb基因,与鸡心脏mtDNA限制性内切酶酶切图谱有差异。结论2种方法可以作为利心丸中貂心物种的区分提供方便有效的分子标记。     

貂心与其伪品的脱氧核糖核酸指纹特征研究

目的 探讨貂心脱氧核糖核酸(DNA)指纹特征鉴定方法.方法采用碱裂解法提取新鲜貂心与伪品动物组织中线粒体DNA,设计特异性引物,进行PCR扩增.结果 从新鲜貂心及鸡心、鸭心、鹅心、兔心等伪品动物组织中提取出相同大小的16.8 Kb线粒体DNA,只有貂心DNA可扩增出1 100 bp大小的片段.结论 貂心DNA具有特异性指纹特征,所得貂心DNA指纹特征图谱可用于与其伪品动物心脏的鉴定及分析,且方法简便,结果可靠.     

貂心及其易混品种中微量元素的测定

目的：研究貂心与其易混品种鸡心中的人体必需微量元素的种类及其含量差异,为貂心与易混品种鸡心的鉴定提供一种科学的方法。方法：应用电感耦合等离子体原子发射光谱（ICP-AES）法测定经消化后的貂心和鸡心中的微量元素。[JP3]结果：貂心中含有8种微量元素,其中镁(Mg)含量(干重)最高,为685.31 mg/kg[JP];鸡心中含有9种微量元素,其中钾(K)含量（干重）最高,为11 829.7 mg/g。 各种微量元素的检测线为0.4～12.1 μg/L,回收率为92.0%～111.9%,相对标准偏差为0.5%～3.8%,各种微量元素的标准曲线均为R≥0.9 999。结论：貂心与鸡心中所含微量元素的种类、含量及各种元素含量间的比例相差悬殊,可
利用ICP-AES法对二者进行微量元素检测比较和鉴定。     

ICP—AES法测定貂心的金属元素

目的:研究貂心中金属元素的种类及含量。方法:样品湿法消化后应用ICP-AES法同时测定多种金属元素。结果:检出限为0.0004 ppm~0.0121 ppm,加样回收率为96.1%~104.3%,RSD为0.5%~2.4%。结论:ICP-AES法测得貂心中含有多种金属元素,其中Fe、Mg、Zn元素含量较为丰富。     

貂组织线粒体DNA及细胞色素b鉴定及特征

目的:探讨貂组织线粒体DNA（mtDNA）及细胞色素b(Cytb)的特征。方法:采用碱变性方法提取新鲜的貂心及肝组织中mtDNA,PCR技术扩增细胞色素b(Cytb)基因部分序列片段并直接测序。结果:新鲜的貂心和肝组织提取出16 800 bp的mtDNA,并能扩增出310 bp大小的Cytb基因,测序结果显示貂心Cytb基因与美洲貂(GenBank AB026109.1)同源性为99%。 结论:貂组织含有完整的mtDNA,Cytb部分基因可以作为貂心物种鉴定及检测的分子标记。