茅莓对铅染毒大鼠血清SOD活性及肝组织MDA含量的影响

观察茅莓对铅中毒大鼠体内超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(M DA)含量的影响。方法:采用SD大鼠分成4组,以醋酸铅(20m g/kg)灌胃染毒,隔天1次,连续6次,给予依地酸钙钠(0.1g/kg)及茅莓提取物(1g/kg,0.5g/kg),用试剂盒法检测血清SOD活性及肝脏M DA含量。结果:茅莓能显著升高铅中毒大鼠SOD活性(P<0.05)和降低M DA含量(P<0.05)。结论:茅莓能对抗大鼠铅中毒引起SOD活性降低和M DA含量升高。     

茅莓总皂苷对大鼠海马神经元细胞缺氧损伤后胞内钙超载的影响

目的研究茅莓总皂苷对原代培养大鼠海马神经元缺血损伤后胞内钙超载的影响。方法大鼠海马神经元培养后,用Fluo-2/AM负载培养的神经细胞,氧糖剥夺30min,在激光共聚焦显微镜下监测加入茅莓总皂苷后海马神经元的[Ca2+]i的变化。结果茅莓总皂苷10-5,10-4,10-3g·L-1和Nim10-5mol·L-1组能不同程度地降低大鼠海马神经元细胞内[Ca2+]i。结论茅莓总皂苷可通过减轻细胞内的钙超载来对缺血神经元进行保护。     

茅莓总皂苷和高三尖杉酯碱、阿糖胞苷体外协同诱导白血病细胞凋亡的机制研究

目的:探讨茅莓总皂苷(TSRP)抑制K562和人原代白血病细胞及分别与化疗药高三尖杉酯碱(Hom)、阿糖胞苷(Ara-c)的协同作用,并探讨其协同作用的可能机制。方法:MTT法和PHA-LCM液相-半固体二步培养法检测不同浓度的TSRP对K562和人原代白血病细胞增殖及其与化疗药联用后的影响;观察TSRP分别和Hom、Ara-c联用的抑制作用,用药物相互作用指数评价药物协同作用;DAPI染色法观察一定浓度下TSRP协同化疗药诱导K562细胞凋亡;Western blot检测促凋亡蛋白Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9和Cleaved PARP以及抗凋亡蛋白Survivin的表达。结果:TSRP能够抑制K562和人原代白血病细胞的增殖,呈浓度依赖性,在一定浓度范围内TSRP和化疗药有显著的协同作用;DAPI染色法观察TSRP和化疗药协同较单用化疗药出现明显凋亡现象,诱导细胞发生凋亡;Western blot检测TSRP联合Hom较单用Hom显著提高了K562细胞内PARP、Cleaved caspase-3和Cleaved caspase-9的活性;TSRP联合Ara-c较单用Ara-c显著提高了K562细胞内PARP和Cleaved caspase-3的活性,但是对Cleaved caspase-9的活性影响差别不大;TSRP联合Hom或Arac对Survivin的活性影响均未见明显差别。结论:TSRP分别和化疗药Hom或Ara-c联用对K562和人原代白血病细胞有明显的增殖抑制和诱导凋亡作用,且主要是通过线粒体途径增强凋亡效应,从而增加化疗药物的敏感性,具有良好的临床应用前景。     

茅莓总皂苷的含量测定

目的:建立茅莓总皂苷的含量测定方法.方法:通过对样品采用不同溶剂及不同提取方法所得的提取液显色后,以分光光度法测定总皂苷的含量.结果:本法测定的线性范围为22～176μg(r=0.9997);平均回收率为102.1%,RSD=2.82%(n=6);样品以70%乙醇回流提取所得的总皂苷含量最高.结论:该方法灵敏、可靠,显色后的样品比较稳定,可用于茅莓药材的质量控制及品质评价.     

甜叶苷R1水解产物苷元的分离鉴定与抗帕金森病药效研究

目的 研究甜叶苷R1(Suavissimoside R1)的水解产物苷元是否具有抗帕金森病(Parkinson's disease,PD)药理作用.方法 先用体外化学方法碱性水解甜叶苷R1,其水解产物用硅胶柱层析分离,将含量最多的化合物纯化收集后经核磁共振13C谱、1H谱、EI-MS谱以及熔点等数据分析后确定该物质结构为甜叶苷R1的苷元.在1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)处理的大鼠原代培养中脑多巴胺(DA)能神经元凋亡的PD细胞模型和1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)处理的小鼠PD动物模型上检测甜叶苷R1的苷元是否具有保护多巴胺能神经元的药理作用.结果 甜叶苷R1水解分离得到苷元,苷元纯度为95.8%.甜叶苷Rl在100 μmol·L-1和300 μmol·L-1浓度时对MPP+处理的大鼠原代培养中脑多巴胺能神经元有明显的保护作用.甜叶苷R1在0.75mg·kg-1剂量时能够明显提升MPTP处理的小鼠纹状体DA含量.甜叶苷R1的苷元则没有显示出明显的保护作用.结论 甜叶苷R1,而不是其苷元具有抗PD作用.     

茅莓总皂苷对局灶性脑缺血/再灌注大鼠的比较蛋白质组学研究

目的采用蛋白质组学技术研究茅莓总皂苷对脑缺血/再灌注大鼠脑组织差异蛋白的影响,进一步揭示茅莓总皂苷的脑保护作用及抗损伤修复机制。方法建立脑缺血/再灌注大鼠动物模型,分别提取蛋白质后进行2-DE电泳分离,应用相关软件比较分析,找出差异蛋白,酶切消化后进行肽指纹图谱分析,通过数据检索,初步鉴定差异蛋白质。结果与模型组比较,茅莓总皂苷组找到29个差异点,其中18个蛋白点表达上调,11个蛋白点表达下调,鉴定了其中7个蛋白。结论茅莓总皂苷对脑保护作用及抗损伤修复机制的机制是多个蛋白质共同参与的结果。     

茅莓总皂苷体外抗肿瘤作用研究

茅莓（Rubus parviflolius L．），别名天青地白草、红梅消、三月泡，为蔷薇科悬钩子植物，具有活血化瘀，清热解毒等作用。本研究选择了HR8348直肠腺癌细胞、A375黑色素瘤细胞、Hut-78人皮肤T细胞淋巴瘤细胞和A431人表皮癌细胞为癌细胞株，用茅莓总皂苷对它们进行体外抗肿瘤试验，同时检测了茅莓总皂苷对HR8348直肠腺癌周期的影响，结果显示对前三种肿瘤有良好的抗肿瘤活性，通过将细胞周期阻滞在S期在而发挥抗肿瘤作用。     

茅莓的药理研究

茅莓水提物可缩短小鼠出血时间和凝血时间,缩短家兔优球蛋白溶解时间,抑制家兔体内血小板血栓形成,增加离体大鼠心脏冠脉流量,对抗垂体后叶素诱发大鼠缺血性心电图改变,增强小鼠常压和低压情况下的缺氧耐力,毒性低。     

茅莓根中对多巴胺神经元保护作用成分的分离鉴定研究

目的：从茅莓根中分离鉴定出具有保护多巴胺能神经元作用的甜叶苷R1（Suavissimoside R1）。方法：用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）处理的小鼠帕金森病模型检测从茅莓根中提取出的粗提物以及二次提取物（精提物）的保护作用,然后在此基础上对精提物进行分离纯化,最后分离出白色针状结晶性成分,根据化合物的理化常数测定和用红外光谱数据分析鉴定该成分结构为甜叶苷R1。以1-甲基-4-苯基吡啶离子（MPP＋）处理的大鼠中脑多巴胺能神经元为模型,检测了甜叶苷R1对多巴胺能神经元的保护作用。结果：分离得到甜叶苷R1。甜叶苷R1浓度在100μmol/L时,对MPP＋处理的多巴胺能神经元有明显的保护作用。结论：甜叶苷R1对多巴胺能神经元有保护作用。