灯台叶总碱与氟康唑联用对耐药白念珠菌株CA23的协同抑菌作用

目的 探讨灯台叶总碱与氟康唑联用对耐药白念珠菌CA23毒力因子的作用和潜在机制。方法 微量稀释法、棋盘法及时间-杀菌曲线测定灯台叶总碱与氟康唑联用效果;荧光探针测定菌株外排泵功能,实时荧光定量PCR法检测耐药相关基因表达;倒置显微镜、扫描电镜观察菌丝诱导培养基中菌株形态转换,RT-qPCR法检测菌丝相关基因表达,添加外源性cAMP验证;卵黄琼脂平板法检测菌株胞外磷脂酶活性。结果 灯台叶总碱与氟康唑对耐药白念珠菌具有较强的协同抑菌作用;联用处理并不能显著抑制菌株的外排功能,与耐药相关基因表达结果一致;两药联用可以抑制在SD和Spider诱导培养基中菌丝生长,且下调菌丝相关基因CYR1、ALS3、RAS1、BCR1、ALS2、TPK2表达,添加外源性cAMP后,能恢复部分药物联用引起的菌株形态变化;两药联用能抑制胞外磷脂酶活性,且对灯台叶总碱存在剂量依赖性。结论 灯台叶总碱与氟康唑联用对氟康唑耐药株表现为协同抑菌作用,其机制与调节Ras1-cAMP-PKA信号通路抑制菌丝生长,并降低胞外磷脂酶活性从而影响耐药白念珠菌毒力因子有关。     

云南傣族药物灯台叶中黄酮类成分

目的:研究云南傣族传统药物灯台叶Alstonia scholaris中黄酮类化学成分.方法:用色谱分离,用理化性质和波谱鉴定化学结构.结果:分离鉴定了山柰酚(1),槲皮素(2),异鼠李素(3),山柰酚-3-O-β-D-半乳糖苷(4),槲皮素_3-O-β-D-半乳糖苷(5),异鼠李素-3-O-β-D-半乳糖苷(6),山柰酚-3-O-β-D-半乳糖-(2→1)-O-β-D-木糖苷(7),槲皮素-3-O-β-D-半乳糖-(2→1)-O-β-D-木糖苷(8)共8个黄酮类成分.结论:化合物1-7为首次从傣药灯台叶分离得到.     

灯台叶醇提物体外抗肿瘤作用研究

目的研究灯台叶醇提物对体外肿瘤细胞增殖和凋亡的影响,以及对鸡胚尿囊膜血管生成的抑制作用。方法采用MTT法检测灯台叶醇提物对体外培养肿瘤细胞(人卵巢癌细胞C200、人乳腺癌细胞MNK-7、人肝癌细胞SNU-398)的抗肿瘤作用;以PI/Annexin-V染色检测灯台叶醇提物对人乳腺癌细胞MNK-7凋亡的影响;以鸡胚尿囊膜血管生成(CAM)实验,研究灯台叶醇提物对新生血管生成的抑制作用。结果灯台叶醇提物在0.1～2.0 mg/mL对各肿瘤细胞的增殖有显著抑制作用,2.0 mg/mL灯台叶醇提物对人乳腺癌细胞增殖抑制率达到83.6%;2.0 mg/mL灯台叶醇提物作用后人乳腺癌细胞凋亡率达到62.5%;灯台叶醇提物在1～1000μg/mL对鸡胚尿囊膜血管生成有显著抑制作用,给药鸡胚的新生血管数减少,其中10μg/mL抑制率最高,一级血管抑制率为52.1%,二级血管抑制率为48.3%。结论在实验给药浓度下,灯台叶醇提物对受试肿瘤细胞的增殖具有较强抑制作用,对鸡胚尿囊膜血管生成有显著抑制作用。     

灯台叶醇提物对H22肝癌移植小鼠免疫和抗氧化功能的影响

目的探讨灯台叶醇提物抗肿瘤作用及其机制。方法以移植H22荷瘤小鼠为模型,设置阴性组、灯台叶醇提物低中高剂量组（0.2,1.0,5.0 g/kg）,阳性药环磷酰胺组,检测其抑瘤效果、碳廓清能力、耳肿胀度、血清中GR、GSH-PX、CAT、SOD和MDA含量。结果灯台叶醇提物高剂量能够明显抑制小鼠H22实体瘤生长（P〈0.05）,其抑瘤率为61.7%;高剂量组对小鼠耳肿胀度无明显影响,但增强其碳廓清能力,与阴性对照组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;高剂量组中血浆MDA含量水平明显降低（P〈0.05）,GR、GSH-PX、CAT、SOD活性水平比阴性对照组明显升高,还能够降低移植瘤细胞中活性氧ROS（P〈0.05）。结论灯台叶醇提物能够增强小鼠的免疫功能;清除自由基,减轻活性氧带来的损伤,从而起到抗肿瘤作用。     

灯台叶树的组培快繁研究

用灯台叶树茎尖为材料进行离体培养，在5种不同培养基上诱导愈伤组织发生和芽的分化过程，结果证明在MS培养基上附加2.4-D2mg/L,NAA2mg/L,6-BA3mg/L时，愈伤指数最高（92.3%)。在另5种不同浓度培养基上诱导芽的形成时，于MS为基本培养基，添加NAA0.25mg/L,Kt2mg/L时，芽的分化率最高（86.7%)，当激动素的浓度提高或降低时，均引起芽的分化数目下降。     

灯台叶颗粒联合环酯红霉素治疗类百日咳综合征的临床研究

目的 探讨灯台叶颗粒联合环酯红霉素治疗类百日咳综合征的临床疗效。方法 选取2018年4月—2020年4月郑州大学附属儿童医院收治的120例类百日咳综合征患儿,随机分为对照组和治疗组,每组各60例。对照组口服环酯红霉素干混悬剂,15 mg/（kg·d）,每12小时服用1次。治疗组在对照组基础上口服灯台叶颗粒,10 g/次,3次/d。两组均持续治疗14 d。观察两组的临床疗效,比较两组临床症状、体征缓解时间和住院时间,血清炎性因子、细胞免疫功能指标和不良反应。结果 治疗后,治疗组总有效率是95.00%,显著高于对照组的78.33%（P<0.05）。治疗后,治疗组肺部啰音消失时间、呼吸困难缓解时间、痉挛性咳嗽缓解时间及住院时间均显著短于对照组（P<0.05）。治疗后,两组血清白介素-6（IL-6）、白介素-4（IL-4）、干扰素-γ（IFN-γ）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平均显著降低（P<0.05）;治疗后治疗组血清炎性因子水平显著低于对照组（P<0.05）。治疗后,两组CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺均显著升高,但对照组CD8⁺显著升高,治疗组CD8⁺显著降低（P<0.05）;治疗后治疗组细胞免疫功能优于对照组（P<0.05）。治疗组不良反应发生率低于对照组（5.00%vs 20.00%）（P<0.05）。结论 灯台叶颗粒联合环酯红霉素治疗类百日咳综合征的临床疗效较好,可缓解患儿临床症状及体征,降低炎性因子,安全性较高,具有一定的临床推广应用价值。     

HS-GC法检测灯台叶提取物中的乙酸乙酯残留物

目的：采用顶空气相色谱法对灯台叶提取物中残留的乙酸乙酯进行检测。方法：色谱柱为AglientHP—INNOWAX毛细管柱（30m&#215;0．32mm&#215;0．25μm）;柱温：60℃恒定6min;进样口温度：180℃,分流比25：1;检测器温度：250℃;顶空温度为60℃,顶空时间30min载气为氮气,流速为2．0mL／min。结果：乙酸乙酯残留物在所考察的浓度范围内线性关系良好（r=0．99999）,精密度RSD为0．55％;回收率在95．37％～97．97％之间,RSD为0．504％。结论：该方法操作简便、快速、准确度高,可用于检测灯台叶提取物中的乙酸乙酯残留。     

HPLC法同时测定傣药灯台叶中鸭脚树叶碱、齐墩果酸和熊果酸的含量

目的:建立同时测定傣族传统药物灯台叶中鸭脚树叶碱、齐墩果酸和熊果酸含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Agilent ZORBAX Eclipse SB-C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-pH7.6的磷酸盐缓冲液(梯度洗脱),检测波长为220nm。结果:鸭脚树叶碱、齐墩果酸和熊果酸3种成分的检测浓度分别在0.01～0.20mg·mL-1(r=0.9997)、0.06～1.20mg·mL-1(r=0.9996)、0.10～2.00mg·mL-1(r=0.9998)范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系;平均加样回收率依次为102.0%、101.1%、99.3%,RSD分别为1.84%、2.00%、0.91%(n均为6)。5批灯台叶中鸭脚树叶碱的含量在0.085%～0.122%之间,齐墩果酸含量在0.517%～0.582%之间,熊果酸含量在1.71%～1.85%之间。结论:本方法简便、准确、精密度高、重复性好,可同时测定灯台叶中鸭脚树叶碱、齐墩果酸和熊果酸的含量,可为灯台叶的质量控制提供科学依据。     

基于UPLC-ESIQ-TOF-MS法分析灯台叶颗粒的主要活性成分

目的建立超高效液相-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-EIS-Q-TOF-MS)法分析灯台叶颗粒活性成分。方法色谱条件:Agilent Extend C_(18)(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相为0.1%甲酸胺水(A)-乙腈(B),梯度洗脱,体积流量为0.4 mL·min~(-1),质谱使用ESI离子源正离子模式下采集数据,并运用Agilent Masshunter Qualitative Analysis工作站中的分子特征提取(MFE)功能,根据提供化合物的准确相对分子质量、质谱碎片离子信息,并结合参考文献等进行成分鉴定。结果从灯台叶颗粒中鉴定出27种化学成分,黄酮及其苷类7个,生物碱类7个,萜类10个,氨基酸类3个。芹菜素、齐墩果酸羧甲酯、齐墩果酸羧乙酯、β-香树脂醇、苯丙氨酸、环(酪氨酸-酪氨酸)、N-乙酰-L-脯氨酸7个化合物均为首次从灯台草制剂中被发现并报道。结论 UPLC-ESIQ-TOF-MS技术能够快速、准确地鉴定灯台叶颗粒中的化学成分,为其质量控制和临床应用提供了理论依据。     

灯台叶中鸭脚树叶碱化学对照品的制备

目的:以灯台叶为原料,研究鸭脚树叶碱对照品的制备与分析技术。方法:用溶剂法提取灯台叶中生物碱,通过色谱方法分离主要成分鸭脚树叶碱,用光谱方法鉴定其结构,并用TLC、HPLC方法检查纯度和标定含量。结果:鸭脚树叶碱对照品经TLC检查无杂质斑点,二维及三维HPLC检查为单一成分,峰纯度因数999.878,含量为99.35%.结论:鸭脚树叶碱对照品已达到中药质量标准用化学对照品技术要求。