细胞间缝隙连接通讯改变在神经系统疾病中的应用

细胞间缝隙连接通讯（gap junctional intercellular communication，GJIC）概念的提出已达40年，随着划痕标记染料示踪（scrape—loading and dye transfer，SLDT）技术和激光扫描共聚焦显微镜下荧光淬灭后恢复（fluorescence redistribution after photobleacing，FRAP）技术的创立，使得近10余年来各学科关于细胞间缝隙连接通讯的研究快速发展，业已成为生命科学的研究热点之一。     

功能性量子点作为荧光探针测定环磷酸腺苷的含量

在温和的水溶液中合成水溶性的Mn2＋参杂的L-半胱氨酸包裹的ZnS量子点。该量子点在水溶液中能稳定存在,并与环磷酸腺苷有较强的亲和性。量子点与环磷酸腺苷相互作用产生荧光淬灭。在最优条件下,环磷酸腺苷在0.25×10-7~4.0×10-7mol.L-1浓度范围内与量子点有较好的线性关系,检出限为2.2×10-8mol.L-1。本文对常见干扰离子进行了考察,结果显示量子点对环磷酸腺苷有较强的选择性。该方法简便,快速,灵敏度高。     

荧光淬灭法分析奈韦拉平含量

目的建立测定奈韦拉平含量的新方法。方法采用合成的荧光试剂[Ni(phen)2PHPIP].2ClO4],在激发波长226 nm,发射波长340 nm的条件下,用荧光淬灭法测定奈韦拉平。结果在pH 6.0的磷酸盐缓冲介质中,荧光试剂的荧光淬灭程度与奈韦拉平浓度呈良好的线性关系。奈韦拉平的线性范围为5.0×10-7~1.0×10-5mol/L,检测限为1.0×10-7mol/L,相关系数0.9946,奈韦拉平回收率102%(n=5),RSD 2.57%,日内及日间RSD分别为2.64%和3.77%(n=5)。结论测定奈韦拉平含量的荧光淬灭方法具有杂质干扰少、操作简便等优点。     

自身淬灭荧光技术定量检测临床分离的淋病奈瑟菌DNA

目的 探讨自身淬灭荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测临床分离的淋病奈瑟菌DNA的临床应用价值。方法 以建立的淋病奈瑟菌自身淬灭FQ-PCR方法为基础，对59例疑为淋病奈瑟菌感染患者的标本进行检测，并与分离培养法进行分析比较。结果自身淬灭FQ-PCR标准品浓度为10^2～10^7拷贝／μ时，方法能够保持良好的线性关系，标准曲线为：Y=-0．273X＋10．781，相关系数为0．9895。自身淬灭FQ-PCR阳性检出率为64．41％，高于培养法52．54％（χ^2=5．14，P〈0．05）；两者特异性均为100％。结论 自身淬灭FQ-PCR用于临床分离的淋病奈瑟菌DNA检测，敏感性、特异性均高，对淋病的诊断有较高价值，实现了PCR扩增、荧光探针杂交及检测一体化，简便省时。     

8-烷基小檗碱同系物对蛋白荧光的淬灭作用与其抗菌活性的关系

目的：了解8-烷基小檗碱同系物（Ber-C8-n）对蛋白荧光的淬灭作用与其抗菌活性的关系,探讨Ber-C8-n抗菌活性变化的机制.方法：以牛血清白蛋白（BSA）为实验材料,等渗磷酸缓冲液（PBS）为溶剂,分别将每种Ber-C8-n用PBS溶液配制不同浓度的梯度溶液,测定BSA与不同浓度Ber-C8-n在PBS体系中反应后苯丙氨酸（Phe）,色氨酸（Trp）和酪氨酸（Tyr）残基的荧光强度,观察Ber-C8-n对BSA残基荧光的淬灭情况.结果：Ber-C8-n对BSA中3种氨基酸残基的荧光均有不同程度的淬灭作用,并均有明显的剂量效应.比较后发现,Ber-C8-n对BSA中Phe,Trp和Tyr残基荧光的淬灭作用表现出相似规律,即Ber-C8-8同样表现了最强的荧光淬灭作用,其次为烷基链较长或较短的Ber-C8-n,基本上呈现以Ber-C8-8顶点的抛物线.3种残基之间比较,Ber-C8-8对Trp残基荧光的淬灭作用明显强于对Tyr和Phe残基的作用.结论：抗菌活性越强的Ber-C8-n对BSA荧光的淬灭作用也越强,Ber-C8-n抗菌活性的差异可能是不同Ber-C8-n与目标蛋白的富Trp残基区的结合能力差异导致的．     

荧光淬灭法测定羟乙磷酸二钠的含量

建立了荧光淬灭法测定羟乙磷酸二钠（ＥＨＤＰ）的含量，激发波长４００ｎｍ，检测波长５００ｎｍ。大本实验条件下线性范围０．３～０．８ｍｇ／Ｌ，ｒ＝－０．９９９２，回收率９８．７６％～１００．５％，（ｎ＝６），ＲＳＤ小于１．３６％，日内和日间ＲＳＤ分别为０．６４％和２．５７％。     

载水淬灭荧光探针的单甲氧基聚乙二醇-聚己内酯纳米粒的制备与体外评价

目的 制备载水淬灭荧光探针的单甲氧基聚乙二醇-聚己内酯(mPEG-PCL)纳米粒,并评价其体外特性及稳定性.方法 以聚己内酯(PCL)、mPEG-PCL为材料,采用乳化-溶剂挥发法分别制备包载水淬灭荧光探针P2的PCL纳米粒和具有不同mPEG链长(mPEG5k 、mPEG2k)的mPEGPCL纳米粒,对其体外特性(表面形态、粒径大小及分布)进行表征.P2探针包载于纳米粒中时发出荧光信号,但释放到水中时荧光迅速淬灭,利用P2探针的这一性质,考察各种纳米粒在不同水性溶媒中的稳定性.结果 所制备的mPEGPCL纳米粒形态圆整、表面光滑,粒径约200 nm,分布较窄,多分散系数(PDI)均低于0.06,表面电荷近中性.在不同pH的缓冲介质和模拟生理体液中,所有纳米粒均表现出良好的稳定性,粒径、PDI、荧光强度均未发生明显变化.结论 mPEG-PCL纳米粒具有良好的体外特性与稳定性,以水淬灭探针为指示剂可以快速、方便地进行稳定性研究.     

用于检测胆碱的光纤生物传感器

目的:研制一种基于荧光淬灭原理的,快速准确检测胆碱含量的光纤生物传感器。方法:利用钌(Ⅱ)-联吡啶配合物作为氧指示剂,在胆碱氧化酶的作用下胆碱产生的氧气可以淬灭其产生的荧光,从而可以通过荧光强度的变化检测胆碱的含量。结果:该传感器的检测下限为1×10-9mol/L,响应时间T≤10s,并具有较强的抗干扰能力。结论:该传感器可以快速准确检测胆碱含量,且灵敏度高,响应时间快,信噪比高,可重复性和稳定性好,使用安全,操作简便,便于仪器的机械化、集成化和商品化。