朱红膏对中性粒细胞分泌炎症因子及凋亡的影响

目的 观察朱红膏对中性粒细胞(PMN)炎症因子分泌和凋亡的影响，研究其促进慢性皮肤溃疡愈合的机制。方法 原子荧光光谱仪检测汞的含量，磁珠法提取PMN, CCK-8法检测细胞活性；CBA法检测IL-1β、IL-8的含量；Annexin V-PI法检测PMN凋亡；Real Time-PCR法检测PMN Caspase-3 mRNA和Caspase-9 mRNA的表达；Western blot法检测Cytochrome C、Bcl-2和Bax蛋白表达。结果 选择汞含量0.96、0.48、0.24 mg/L分别作为朱红膏的高、中、低三个浓度组；与模型组相比，高浓度组显著性抑制PMN分泌IL-1β(P<0.01),各组均显著性抑制的IL-8分泌(P<0.01),促进PMN凋亡(P<0.01)、Cytochrome C和Bax蛋白表达(P<0.01),降低Bcl-2蛋白表达(P<0.01)。结论 朱红膏通过抑制中性粒细胞分泌炎症因子和促进凋亡治疗慢性皮肤溃疡。     

朱红膏对破损皮肤模型大鼠汞蓄积及肾组织形态的影响

目的:通过对破损皮肤模型大鼠连续给予朱红膏4周和停药4周各相关指标的检测,探讨其对汞蓄积和肾组织形态的影响,为临床安全用药提供科学依据。方法:将大鼠随机分成4组:破损皮肤对照组、朱红膏低、中、高剂量组。于连续给药4周和停药4周后,分别测定尿汞、血汞、肾汞、β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)、β2-微球蛋白(β2-MG)、血清尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)、尿蛋白(PRO)和尿液pH,计算肾脏系数,进行肾脏组织形态学观察。结果:连续给药4周,3个剂量组大鼠尿汞、血汞和肾汞含量与对照组比较显著升高(P<0.01),且存在量毒关系。停药4周,3个剂量组大鼠尿汞和血汞含量均恢复正常,肾汞含量仍明显升高(P<0.01)。高剂量组大鼠NAG显著升高。停药4周,不同剂量组与对照组比较没有差异。结论:对破损皮肤大鼠长期大剂量使用朱红膏会出现汞蓄积,有可能造成肾组织损伤,临床使用朱红膏应积极监测患者体内的汞含量和肾功能指标。     

朱红膏治疗慢性皮肤溃疡血尿汞浓度波动的临床研究

目的:探讨汞离子在人体内的吸收与排泄过程。方法:将慢性皮肤溃疡患者48例随机分为2组,试验组外用朱红膏,对照组使用不含汞的龙珠软膏,于用药前及用药后2周、4周、6周,停药后2周、6周测其血汞及尿汞浓度。结果:血汞、尿汞浓度有随时间变化的趋势;时间因素的作用因分组的不同而不同;药物因素能升高患者血尿汞浓度,停药后浓度明显下降。结论:朱红膏外用于溃疡面积小于60 cm~2慢性皮肤溃疡患者6周,血尿汞随用药时间的延长有不同类型的波动形式,但其值仍在安全范围之内。     

朱红膏对动物急性毒性和皮肤刺激性的实验研究

目的研究外用制剂朱红膏对大鼠的急性毒性和对豚鼠的皮肤刺激性,为临床安全用药提供依据。方法急性毒性实验：建立朱红膏外用大鼠模型,制备破损皮肤,选取相当于临床用药剂量320倍的朱红膏（原药材609.28 mg/kg）进行实验,记录毒性反应和体质量增加情况。皮肤刺激性实验：建立朱红膏外用豚鼠模型,制备破损皮肤,采用同体左右侧自身对照法进行单次和多次给药的皮肤刺激性实验。结果急性毒性实验中,未见大鼠出现急性毒性反应,给药组大鼠体质量和对照组比较,差异无统计学意义。皮肤刺激性实验中,未见豚鼠给药处皮肤出现红斑、水肿等情况。结论一定时间内外用一定剂量的朱红膏对大鼠没有出现急性毒性反应,对豚鼠破损皮肤没有产生刺激性。     

中药外用制剂朱红膏对皮肤溃疡模型大鼠肾脏过氧化及金属硫蛋白的影响

目的研究经大鼠溃疡皮肤反复给予朱红膏对肾组织丙二醛（MDA）、Na＋-KLATP酶及金属硫蛋白（MT）的影响,初步探讨朱红膏中汞经皮吸收作用于肾的机理。方法将80只SD大鼠随机分为8组：朱红膏A组（1218．56mg／kg）、B组（609．28mg／kg）、C组（304．64mg／kg）、D组（152．32mg／kg）、E组（76．16mg／kg）5个剂量组及基质组（凡士林）、溃疡模型组、皮肤破损组。溃疡模型采用皮肤缺损＋埋置异物＋细菌感染法造模,皮肤破损组仅以刀片刮伤大鼠皮肤,基质组及朱红膏各剂量组将药纱条直接贴敷于创面,每日给药4h,连续给药14d。测定肾组织中MDA含量、Na＋-K＋-ATP酶活力,并采用酶联免疫分析法测定MT含量。结果与溃疡模型组比较,朱红膏A组MDA含量升高（P〈0．05）;朱红膏A组Na＋-K＋-ATP酶活力显著降低（P〈0．01）,基质组与朱红膏C、D、E组酶活力均呈不同程度的升高;朱红膏A、B、C、D组MT含量均显著升高（P〈0．01）,其余差异无统计学意义（P〉0．05）。结论反复过量使用朱红膏,汞经皮吸收作用于肾脏,可以引起脂质过氧化,影响能量代谢,诱导MT的产生。     

朱红膏促进皮肤溃疡愈合的安全性研究

目的研究朱红膏促进皮肤溃疡愈合的安全性,为临床用药提供依据。方法 SD雄性大鼠66只随机分为皮肤破损组、溃疡模型组、凡士林基质组及朱红膏高（38.08 mg/kg）、中（19.04 mg/kg）、低（9.52 mg/kg）剂量组。皮肤破损组仅以刀片刮伤大鼠皮肤;溃疡模型组选择皮肤缺损＋细菌感染＋埋置异物法造模;朱红膏和凡士林基质组以纱条方式在大鼠造模创面上贴敷给药14 d,每日保证给药时间4 h,观察尿β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶（NAG）活性、尿视黄醇结合蛋白（RBP）含量及肾脏组织病理改变。结果与溃疡模型组比较,朱红膏各剂量组、凡士林基质组及皮肤破损组尿NAG活性未见明显差异（P〉0.05）,尿RBP含量显著升高（P〈0.05,P〈0.01）,肾脏组织病理检查结果示,随着用药剂量的增加,肾脏组织病变有加重趋势,与皮肤破损组比较,朱红膏高剂量组有较明显病变（P〈0.05）,与溃疡模型组比较,朱红膏各剂量组、凡士林基质组及皮肤破损组肾脏病变未见明显差异（P〉0.05）。结论朱红膏中剂量用药2周可认为基本安全,朱红膏高剂量用药2周有可能引起肾脏损伤。     

外用制剂朱红膏肾脏早期毒性敏感指标NAG、RBP的监测

目的:筛选朱红膏肾脏靶器官早期毒性的敏感指标。方法:将80只SD大鼠随机分为8个组:朱红膏A、B、C、D、E,5个剂量组,基质组(凡士林),溃疡模型组及皮肤破损组。连续给药14d,记录给药7d及14d大鼠体质量,并测定尿液pH值及NAG、RBP水平。结果:A、B、C、D组大鼠体质量增长受到抑制;给药7d,尿液存在大量酸性样本,不符合检测β2-MG的条件;给药7d,A组NAG及RBP水平均升高;给药14d,A组NAG水平升高,A、B、C、D组RBP含量均明显升高。结论:RBP可以作为朱红膏肾脏靶器官早期毒性的监测指标,并且较NAG敏感。     

朱红膏对基质金属蛋白酶活性及成纤维细胞分泌的影响

目的:观察朱红膏是否通过对基质金属蛋白酶的影响来促进创面的愈合.方法:收集阳证疮疡创面渗液8例,检测朱红膏对渗出物中明胶酶MMP-2,MMP-9酶活性的影响;在蛋白水平观察朱红膏对MMP-1,-2活性的影响;检测朱红膏对HSF细胞的细胞毒性及IC50及用药前后HSF细胞MMP-1,-2,-9的蛋白表达.结果:朱红膏对创面渗出液中MMP-2活性有明显的抑制作用,与对照组相比P＜0.01;对创面渗出液中MMP-9活性在lg·L-1时与对照组比较无差异,但高于5g·L-1时有明显抑制作用,与对照组比较有差异.当汞质量浓度为320 mg· L-1时,朱红膏溶液能直接抑制MMP-1活性(P＜0.01)和MMP-2活性(P＜0.05);但当汞质量浓度为2.56～0.51 mg·L-1时,朱红膏溶液能增强MMP-1活性(P＜0.05);同时当汞在0.51 ～64 mg·L-1时,朱红膏溶液能够增强MMP-2活性(P＜0.01).朱红膏在DMEM的饱和浓度为39.6 mg·L-1,当汞质量浓度大于1.23 mg·L-1时有细胞毒性,HSF细胞IC50汞质量浓度为61.11 mg· L-1,在1.23,0.62,0.31 mg· L-1组均可促进HSF细胞MMP-1的蛋白表达(P＜0.01);朱红膏1.23,0.62 mg· L-1组对HSF细胞MMP-2蛋白表达有抑制作用,作用不明显,0.31 mg·L-1组对MMP-2蛋白表达有促进作用,作用不明显;在汞0.62 mg·L-1时,朱红膏可促进HSF细胞表达MMP-2(P＜0.01);但在这3个汞浓度条件下,朱红膏均可降低HSF细胞MMP-9的蛋白表达.结论:朱红膏在高浓度情况下对创面渗出液的MMP-2,MMP-9均有抑制作用,且抑制作用呈朱红膏含量依赖性增强;并直接抑制体外激活的MMP-1,MMP-2活性.但低浓度情况下却刺激正常成纤维细胞MMP-1,2蛋白的表达及体外酶活性;但对正常成纤维细胞MMP-9的表达表现出抑制效应.     

朱红膏治疗慢性溃疡的临床研究

目的 :探讨外科传统中药朱红膏治疗慢性皮肤溃疡的临床疗效及部分作用机理。 方法 :将 4 3例慢性溃疡患者随机分为三组 :治疗组、对照组和同种基质空白对照组。治疗组 19例 ,外用朱红膏创面换药 ;对照组 15例 ,外用龙珠膏换药 ;空白对照组 9例 ,外用白凡士林纱条换药。观察溃疡面积脱腐及愈合情况以及创面LN及ET - 1的表达。 结果 :治疗组有效率为 84 2 % ,对照组有效率为 73 3% ,空白对照组为 2 2 2 %。治疗组与空白对照组有显著性差异 (P <0 0 1)。 结论 :朱红膏具有较强的化腐生肌、改善创面微循环及抑菌作用 ,可促进创面角朊细胞和内皮细胞增殖迁移     

朱红膏毒性靶器官及安全用药范围研究

目的:研究含汞中药外用制剂朱红膏的毒性靶器官和安全用药范围。方法:将200只大鼠随机分5组:朱红膏高、中、低剂量组,基质组(凡士林)及皮肤破损组。采用刀片刮伤造成大鼠皮肤破损,连续给药4周,分别于给药2周、4周,给药4周停药2周、4周,检测大鼠尿汞含量、尿NAG活性、观察肾组织形态。结果:与皮肤破损组比较,高、低剂量组尿汞含量均显著升高(P<0.01),基质组及朱红膏各组NAG活性均未见显著差异。低剂量给药各时期未见明显肾组织病理损伤。中剂量给药2周,肾脏出现轻度病理改变;给药4周病变有加重趋势,停药后病变有减轻趋势,但与2周比较,均未见显著差异。结论:朱红膏反复给药可引起肾小管损伤,9.52mg生药/kg为相对安全剂量。